Effects of 14 carbohydrates supplied as carbon sources on cell growth and sporulation of, and the production of insecticidal crystal proteins by Bacillus thuringiensis strains were investigated in liquid cultures. Strains grew well in media containing any one of the 14 carbohydrates supplied, reaching maximum cell densities of $10^7{\sim}10^8\;cells/ml$ in 16.7 to 22 hours after inoculation depending on the strain. Spores first appeared in 16.7 to 24.7 hours after inoculation, and 80% sporulation was reached in 28 to 51.3 hours after inoculation depending on the strain. No change in pH of media was observed after cell multiplication. The production of total protein was highest when supplied with sucrose and was lowest with starch. More insecticidal crystal proteins were produced when supplied with glucose, lactose, maltose, or sucrose. The amount of insecticidal crystal proteins produced by the strains was proportional to that of the total protein. The relative amount of individual insecticidal crystal protein species produced by B.t. kurstaki and B.t. israelensis was not influenced by the carbohydrates supplied.
In this study, whether Giemsa staining solution can accurately determine bacterial contamination of liquid spawn for Flammulina velutipes in a short period of time was investigated. Giemsa solution staining cells of blood, bone marrow, lymph node, malaria parasites, rickettsia et al. was prepared by dissolving basic methylene azul and methylene blue, and acidic eosine in methyl alcohol-glycerine. Supernatant samples of Flammulina velutipes liquid spawn cultured under explosive aeration were placed on a slide, mixed with Gimesa solution and examined with optical microscope after staining. In 40 to 60 seconds bacterial cells were distinguishable from soybean meal residual and hyphal cell fragments. Thus we conclude that microscopy using Gimesa staining solution is a quick, simple and accurate method for the mushroom growers to effectively use to detect bacterial contamination of the liquid spawn.
We studied the effect of inoculation of microorganisms known to produce plant growth promoting substances, on the growth and yield of cucumber(Cucumis sativa L.), through a field experiment. The microorganisms used were isolated from the forest soil and consisted of Micrococus sp., Baccilus sustilis, Enterobacter agglomerans, Baccilus megaterium, Pseudomonas putida, Cellulomonas sp. and Staphylococus xyposus. Fotr the multiplication, microorganisms were cultured in liquid media of Pseudomonas P and Sabouraud dextrose. Inoculation of microorganisms was done by spraying the culture media after the culture of them to soil and cucumber plants, three times during the growth of cucumber at the rate of 10l/ha. The inoculation of microorganisms tended to promote the growth of cucumber plant and increase the yield of it. No sign of significant improvement of soil chemical and physical properties were observed after the harvest of crop. The population of bacteria and actinomycetes tended to be higher in the inoculated plots than in not inoculated plots, while opposite was the case in the population of fungi.
To develope a microbial pesticide for the control of agricultural and forestal pests in Korea, the mass culture system of entomopathogenic fungi was studied. Previously, we have developed the mass culture system which was adaptable for the culture of Beauveria bassiana. In this study, we determined the efficacy of this mass culture system for other entomopathogenic fungi, B. bassiana, Beauveria brongniartii, Metarhizium anisopliae, and Verticillium lecanni. To determine the efficacy of mass culture system, we examined the growth rate of entomopathogenic fungi in this system which was composed of 1st liquid media for growth of blastospore and 2nd pellet media for growth of conidia. As the result, we obtained that the blastopore numbers increased 103-104 times in liquid media at 72 hrs post inoculation. The results showed that this mass culture system for the growth of entomopathogenic fungi was effective.
The principal objective of this study was to determine the optimal liquid culture conditions in shake flasks for maximal sporulation of Beauveria bassiana. The optimal initial pH for the spore production of B. bassiana using Potato Dextrose Broth was 5.2. The screening in shake flasks of carbon and nitrogen sources resulted in the identification of an optimal medium based on 3% sucrose and 1% casamino acid, with a C : N ratio of 22 : 4. Using this medium, a production level of $5.65{\times}10^7$ spores per ml was obtained after 5 days of culture. Using 3% corn meal, 2% corn steep powder, and 2% rice bran, the maximum spore concentration of $8.54{\times}10^8$/ml was achieved 8 days after inoculation at $25^{\circ}C$ in a rotary shaking incubator operated at 200 rpm. This represents a yield gain of approximately 2.89 times that of pre-optimization.
Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides are crucial functional starters and predominant isolates in a wide range of fermented foods, particularly kimchi, whose constituents exhibit bioactive properties. We previously developed a methodology using anion exchange resins to purify peptidyl compounds from Lb. plantarum LBP-K10. Antibacterial cultures of Lb. plantarum LBP-K10 were obtained from the respective cultures' supernatants and filtrates. However, conclusive evidence of the efficacy of kimchi filtrates in eradicating pathogenic bacteria is lacking. We aimed to simulate the potential effects of antibacterial filtrates that contained antibacterial compounds which were derived from cultures of Lb. plantarum LBP-K10. We acquired the kimchi filtrates using a combination of centrifugation and filtration methodologies, without the requirement for inoculation. The filtered liquid from Chinese cabbage kimchi, inoculated with Lb. plantarum LBP-K10 as a starter culture, and the non-inoculated liquid from Chinese cabbage kimchi (referred to as CCK and CCKRef, respectively) were were examined. CCK demonstrated greater inhibitory activity and a more significant bactericidal effect against the bacterial indicator strains. The minimum inhibitory concentration demonstrated comparable outcomes in tests against both Gram-positive and Gram-negative bacteria. This research offers a groundbreaking examination that displays the effectiveness of profiling peptidyl compounds within kimchi filtrates for curing bacterial infections.
Park, Cheon-Bo;Nam, Bo-Hyeon;Heo, Byeong-Gi;Yun, Hyeon-Sik
한국생물공학회:학술대회논문집
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2002.04a
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pp.395-398
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2002
Bioremediation has been showing promise as an alternative to conventional environmental cleanup technologies. The objective of this study is to maximize the degradability of jet fuel in the soil system. The cells isolated from petroleum contaminated site was used for the degradation of jet fuel. When this strain was cultured in the MSM(minimal salt media) containing jet fuel for ten days, the degradability of jet fuel was almost 100%. The concentration of jet fuel did not affect the degradability much and the increased inoculution of strain and addition of nitrogen source decreased the time for complete degradation of jet fuel in the liquid culture. Inoculation of this strain increased the jet fuel degradability in the soil column by 15% and the aeration(50ml/min) and the addition of nutrients($NaNO_3$, $KH_2PO_4$) enhanced the jet fuel degradability(about 90%).
Yahaghi, Zahra;Shirvani, Mehran;Nourbakhsh, Farshid;de la Pena, Teodoro Coba;Pueyo, Jose J.;Talebi, Majid
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.28
no.7
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pp.1156-1167
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2018
The aim of this study was to isolate and characterize lead (Pb)-solubilizing bacteria from heavy metal-contaminated mine soils and to evaluate their inoculation effects on the growth and Pb absorption of Brassica juncea. The isolates were also evaluated for their plant growth-promoting characteristics as well as heavy metal and salt tolerance. A total of 171 Pb-tolerant isolates were identified, of which only 15 bacterial strains were able to produce clear haloes in solid medium containing PbO or $PbCO_3$, indicating Pb solubilization. All of these 15 strains were also able to dissolve the Pb minerals in a liquid medium, which was accompanied by significant decreases in pH values of the medium. Based on 16S rRNA gene sequence analysis, the Pb-solubilizing strains belonged to genera Bacillus, Paenibacillus, Brevibacterium, and Staphylococcus. A majority of the Pb-solubilizing strains were able to produce indole acetic acid and siderophores to different extents. Two of the Pb-solubilizing isolates were able to solubilize inorganic phosphate as well. Some of the strains displayed tolerance to different heavy metals and to salt stress and were able to grow in a wide pH range. Inoculation with two selected Pb-solubilizing and plant growth-promoting strains, (i.e., Brevibacterium frigoritolerans YSP40 and Bacillus paralicheniformis YSP151) and their consortium enhanced the growth and Pb uptake of B. juncea plants grown in a metal-contaminated soil. The bacterial strains isolated in this study are promising candidates to develop novel microbe-assisted phytoremediation strategies for metal-contaminated soils.
This study was carried out to determine the effect of medium solidity, salt strength, sugar and nitrogen sources, and pH levels on in vitro multiplication of pathogen-free yam (Dioscorea opposita Thunb.). Liquid medium was more effective in the growth of plant height, fresh weight, and formation of microbulb than the solid medium. Optimal condition for plant fresh weight, growth, and multiplication axillary bud was in 1MS salt strength with 60 $g{\cdot}L^{-1}$ sucrose and half strength of $KNO_3$. Optimal condition for microbulb formation was $\frac{1}{2}$ MS salt strength supplemented with glucose 60 $g{\cdot}L^{-1}$ and half strength of $KNO_3$. The number of leaves and nodes were sharply increased from 2 to 5 weeks, whereas plant fresh weight was steadily increased from 3 to 11 weeks after inoculation. Microbulbs were formed at 2 weeks after inoculation and continuously increased until 12 weeks.
Kim, Young-Ho;Jhune, Chang-Sung;Park, Soo-Chul;You, Chang-Hyun;Sung, Jae-Mo;Kong, Won-Sik
Journal of Mushroom
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v.7
no.3
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pp.110-114
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2009
Sawdust bag cultivation of Shiitake mushroom (Lentinula edodes) is getting increase. The mycelia browning on the substrate surface is important for the stable production. The development of methods for the rapid mycelia browning is quite required. In this study changes in intracellular enzyme during the mycelial browning were investigated to find the rapid mycelia browning. Mycelia of L. edodes was changed into brown color while it grew in agar and liquid media like sawdust substrates. Mycelia of L. edodes was started to change color at 25 days after inoculation and browning was occurred in whole mycelia colony at 30 days and browning was completed at 40 days. The activities of enzymes was evaluated in these periodically color changing mycelia. Laccase activity was highest at 15 days after inoculation on PDB, but it gradually decreased from 15 days. Tyrosinase activity drastically increased in period between 30 days and 40 days while mycelia browning was progressed. The kinds of phosphotase identified by electrophoresis were esterase, acid phosphotase, and alkaline phosphotase. Activities of phosphotase were increased before the initiation of mycelial browning but they were decreased after browning.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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