Pleurotus eryngii, a white rot fungus, produces two extracellular lignin-degrading enzymes, laccase and manganese peroxidase (MnP). Owing to these enzymes, P. eryngii efficiently degrades synthetic chemicals such as azo, phthalocyanine, and triphenyl methane dyes. In this study, we investigated the degradation processes of four aromatic dyes, congo red (CR), methylene blue (MB), crystal violet (CV), and malachite green (MG), by P. eryngii under solid and liquid culture conditions. CR and MG were the most quickly degraded under solid and liquid culture conditions, respectively. However, compared to CR, CV, and MG, MB was not degraded well under both culture conditions. The activities of ligninolytic enzymes (laccase and MnP) were also investigated. Laccase was identified to be the major enzyme for dye degradation. A positive relationship between decolorization and enzyme activity was observed for CR, MB, and CV degradation. In contrast, decolorization of MG ensued after high enzyme activity. These results indicate that the degradation process differs between MG and the other aromatic dyes. Therefore, P. eryngii could be a potential tool for the bioremediation of synthetic aromatic dye effluent.
Objective: The objective of this study was to explore the effects of maize straw treated with calcium oxide (CaO) and various moisture, on the composition and molecular structure of the fiber, and gas production by fermentation in an in vitro rumen environment. Methods: The experiment used 4×3 Factorial treatment. Maize straws were treated with 4 concentrations of CaO (0%, 3%, 5%, and 7% of dry straw weight) and 3 moisture contents (40%, 50%, and 60%). Scanning electron microscopy, Fourier transform infrared spectroscopy and X-ray fluorescence spectroscopy were employed to measure the surface texture, secondary molecular structure of carbohydrate, and calcium (Ca) content of the maize straw, respectively. The correlation of secondary molecular structures and fiber components of maize straw were analyzed by CORR procedure of SAS 9.2. In vitro rumen fermentation was performed for 6, 12, 24, 48, and 72 h to measure gas production. Results: Overall, the moisture factor had no obvious effect on the experimental results. Neutral detergent fiber (NDF), acid detergent fiber, acid detergent lignin, hemicellulose and cellulose contents decreased (p<0.05) with increasing concentrations of CaO treatment. Surface and secondary molecular structure of maize straw were affected by various CaO and moisture treatments. NDF had positive correlation (p<0.01) with Cell-H (H, height), Cell-A (A, area), CHO-2-H. Hemicellulose had positive correlation (p<0.01) with Lignin-H, Lignin-A, Cell-H, Cell-A. Ca content of maize straw increased as the concentration of CaO was increased (p<0.01). Gas production was highest in the group treated with 7% CaO. Conclusion: CaO can adhere to the surface of the maize straw, and then improve the digestibility of the maize straw in ruminants by modifying the structure of lignocellulose and facilitating the maize straw for microbial degradation.
Two experiments were conducted to determine the effect of alkaline hydrogen peroxide (AHP) treatment (1% NaOH+1.5% $H_2O_2$; 1 AHPMS, 2% NaOH+1.5% $H_2O_2$; 2AHPMS) on rate and extent of degradation of mustard straw (MS) in sacco in sheep, and its in vivo digestion and ruminal fermentation characteristics when fed to sheep with concentrate (200 g per sheep daily). The treatment of straw with 1 and 2% AHP increased its sodium content by 148 and 296% to that of untreated straw (UMS). There was significant decrease in NDF and hemicellulose contents of AHP treated straw and increase in cellulose and lignin contents. Phenolic acids like ferrulic, $\rho$-coumaric and o-coumaric significantly (p<0.001) reduced by AHP treatment of mustard straw. In first experiment the in sacco degradation of DM, OM and NDF was significantly (p<0.01) greater for 2 AHPMS than for UMS at all incubation periods. The disappearance of nutrient from 1 AHPMS and 2 AHPMS treated straws continue to increase up to 96 h whereas in UMS the peak disappearance was found at 48 h. By using the equation {(y=a+b) ($1-e^{-ct}$)} the degradation rates (c) for DM, OM, and NDF were significantly higher for UMS than AHP treated straws. Level of alkali (1 and 2%) had significant effect on degradation characteristics (a, b, c and $P_{0.05}$) of DM and NDF fraction of MS. However, the effect was not pronounced on OM fraction of MS. In feeding experiment, the intake of nutrients for DM, OM, cell wall constituents and energy was higher on 2 AHPMS, whereas no effect on the digestibility of these nutrients was observed. The apparent nitrogen retention was higher (p<0.05) both in 1 and 2 AHPMS groups. Water intake by animals was significantly increased due to AHP treated mustard straw feeding. Rumen liquor pH was higher in 2 AHPMS fed animals. The $NH_3-N$ of rumen liquor was not affected by feeding of AHP treated MS based diets. Total VFA concentration was significantly (p<0.01) higher in UMS fed group. The fractional out flow rate of DM was higher (p<0.05) in animals fed on 2 AHPMS diets compared to UMS and lAHPMS fed groups. The population of large holotrichs was higher (p<0.05) on AHP treated MS fed diets compared to UMS. The study indicated that treatment of mustard straw with AHP changed its chemical composition towards a better feed. The nutritive value of 2% AHP treated mustard straw was better in terms of dry matter intake and apparent nitrogen retention. The higher in sacco DM, OM and NDF disappearance however, was not confirmed by in vivo data in this study.
Xylan, the major hemicellulose component of many plants, occurs naturally in a partially acetylated form and lignin, the most resistant component in plant cell wall degradation, is also attached to ${\beta}-1,4-linked-D-xylose$ backbone through the ester linkage. Esterases are required to release the esterified substituent and acetyl esterases are important in the complete degradation of acetylated polysaccharides, like pectins and xylans. The gene(Axe) encoding acetyl xylan estarase(AXE) was isolated from genomic ${\lambda}$ library from Aspergillus ficuum. Nucleotide sequencing of the Axe gene indicated that the gene was separated with two intervening sequences and the amino acid sequence comparison revealed that it was closely related to that from A. awamori with the 92 % indentity. Heterologous expression of AXE was conducted by using YEp352 and Saccharomyces cerevisae 2805 as a vector and host expression system, respectively. The Axe gene was placed between GAL1 promoter and GAL7 terminator and then this recombinant vector was used to transform S. cerevisiae 2805 strain. Culture filtrate of the transformed yeast was assayed for the presence of AXE activity by spectrophotometry and, comparing with the host strain, four to five times of enzyme activity was detected in culture filtrate of transformed yeast.
Organosolv pretreatments which utilized sulfuric acid, sodium hydroxide and ammonia as catalysts were conducted to screen the effective catalyst for organosolv pretreatment of Liriodendron tulipifera. The enzymatic hydrolysis was achieved effectively with sulfuric acid (74.2%) and sodium hydroxide (63.7%). They were thus considered as effective catalysts for organosolv pretreatment of L. tulipifera. The organosolv pretreatments with sulfuric acid and sodium hydroxide showed a different behavior on the reaction mechanism. The pretreatment with sulfuric acid increased the biomass roughness and pore numbers. On the other hand, the pretreatment with sodium hydroxide enhanced the surface area due to the size reduction and minor defiberization which were caused by hemicellulose degradation at an initial stage and more defiberization by lignin degradation at a later stage. The organosolv pretreatment with sodium hydroxide was performed at several different conditions to evaluate effectiveness of sodium hydroxide as a catalyst for organosolv pretreatment. According to the results of enzymatic digestibility, the changes of chemical composition and the morphological analysis of pretreated biomass, it was suggested that the pretreatment time impacted primarily on enzymatic hydrolysis. Increase in surface area during the pretreatment was a major cause for improvement in enzymatic digestibility when sodium hydroxide was used as a catalyst.
This study was conducted to examineboth the type of wood decay and the degree of degradation for the waterlogged woods (Alnus spp. and Fraxinus spp., about 5,700~5,900 year old), which were excavated at Higokri, Pyungteak in the west-coastal region of Korea. The transmission electron microscope (TEM) observation indicated the degradations by soft rot and bacteria were common in both woods. Erosion bacteria attacked gradually and irregularly from the secondary layer to compound middle lamella and often produced the cavity which was similar to soft-rot cavity but much smaller ones. Tunneling bacteria decomposed mainly $S_2$ layer. Though of highly degraded walls, the cells almost kept the original form with intact lignin-rich middle lamella, which were saturated by water. No marine borer's trace indicated that the sealine rise in the western coast of Korean peninsula during the climate optimum period in the holocene might not be high enough to submerge the Higokri area which locates about 2 km from the present sealine.
The rate and extent of digestion of dietary carbohydrates has a tremendous impact on ruminal fermentation and the productivity of the animals. The objective of the study was to determine the dry matter (DM) and neutral detergent fiber (NDF) degradabilities and rate and extent of feed byproducts (cotton seed cake, wheat bran), legumes [berseem (Egyptian clover), lucern (Medicago sativa), cowpeas (Vigna sinensis)], grasses [maize (Zea mays), millet (Panicum miliaceum), sorghum (Sorghum vulgare)] and wheat straw in ruminally fistulated male buffalo calves. By using nylon bags, 10 grams sample was exposed to the ruminal fermentation for 0, 1, 2, 4, 6, 10, 16, 24, 36, 48 and 96 hours. Dry matter and NDF degradability was measured at 48 hours. Extent of DM and NDF disappearance was determined at each time point. Rates of disappearance of DM and NDF were determined by regressing the natural logarithm of the percentage of original DM and NDF remaining in the bags between 1 and 96 hours. The dry matter digestibility (DMD) of the feed byproducts (FBP) and legume forages when incubated in the rumen of male buffalo calves were greater (p < 0.05) than grasses. Extent of digestion followed similar pattern as DMD. Rate of DMD was higher in FBP than in legumes and was the lowest in the wheat straw. The NDF degradability (NDFD) of FBP, legumes and grasses did not differ, however, wheat straw had the lowest NDFD from all the feeds tested. The lowest NDFD of wheat straw may have been due to the depressing effect of lignin on fiber digestion. The FBP and legumes had higher (p < 0.05) rates and lower extents of NDF digestion than grasses.
Micromorphological and chemical characteristics of living Castanea spp. and Tamarix spp. attacked by a brown-rot fungus were examined. Micromorphological features of brown-rotted hardwood species were similar to those observed in softwoods such as losses in birefringence under polarized microscopy, preferential degradation of $S_2$ layer and cracks in the $S_3$ layer. Thinning of the secondary cell wall in fibers was also observed, although it did not seem to be the main symptom. FT-IR analysis showed that bands assigned to cellulose and hemicelluloses decreased or disappeared, whereas the bands assigned to lignin increased. X-ray diffraction analysis exhibited the decrease of relative crystallinity, indicating that degradation of hardwood by a brown-rot fungus was in the advanced stages.
This study was conducted to investigate the pyrolysis characteristics of switchgrass using TGA-FTIR instrument. Switchgrass is a high yielding perennial grass that has been designated as a potential energy crop, because of its high energy value. Ground switchgrass were pyrolysed at different heating rates of 10, 20, 30, and $40^{\circ}C/min$ in a TGA-FTIR instrument. The thermal decomposition characteristics of switchgrass were analyzed, and the gases volatilized during the experiment were identified. The thermal decomposition of switchgrass started at approximately $220^{\circ}C$, followed by a major loss of weight, where the main volatilization occurred, and the thermal decomposition was essentially completed by $430^{\circ}C$. The pyrolysis process was found to compose of four stages; moisture evaporation, hemicellulose decomposition, cellulose decomposition, and lignin degradation. The peak temperatures for hemicellulose decomposition ($306^{\circ}C$ to $327^{\circ}C$) and cellulose decomposition ($351^{\circ}C$ to $369^{\circ}C$) were increased with greater heating rates. FTIR analysis showed that the following gases were released during the pyrolysis of switchgrass; $CO_2$, CO, $CH_4$, $NH_3$, COS, $C_{2}H_{4}$, and some acetic acid. The most gas species were released at low temperature from 310 to $380^{\circ}C$, which was corresponding well with the observation of thermal decomposition.
Inter-specific hybridization between Pleurotus pulmonarius and P. florida was attempted through PEG-induced protoplast fusion to select a fusant. The protocol for protoplast release, regeneration and fusion in these two Pleurotus species was standardized using the variables controlling the process. The mixture of mycolytic enzymes, i.e. commercial cellulase, crude chitinase and pectinase, KCl (0.6 M) as osmotic stabilizer, pH 6 of the phosphate buffer and an incubation time of 3 hours resulted in the maximum release of protoplasts from 3-day-old mycelia of P. florida ($5.3{\sim}5.75{\times}10^{7}$ protoplasts/g) and P. pulmonarius ($5.6{\sim}6{\times}10^{7}$ protoplasts/g). The isolated protoplasts of P. florida regenerated mycelium with 3.3% regeneration efficiency while P. pulmonarius showed 4.1% efficiency of regeneration. Polyethyleneglycol (PEG)-induced fusion of protoplasts of these two species resulted in 0.28% fusion frequency. The fusant produced fruiting bodies on paddy straw but required a lower temperature of crop running ($24{\pm}2^{\circ}C$) than its parents which could fruit at $28{\pm}2^{\circ}C$. The stable fusant strain was selected by testing for the selected biochemical markers i.e. Carbendazim tolerance and utilization of the lignin degradation product, vanillin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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