여러 온도 조건에서 김치에서 분리된 유산균에 의하여 아질산염을 소모하는 정도와 이들 분리균에 의하여 성장온도와 배지의 pH에 따른 아질산염 소모의 영향을 검토하였다. 15와 2$0^{\circ}C$에서 L. plantarum과 L. sake는 성장 초기에 아질산염 소모 활성이 낮았으나 성장기간과 온도에 따라 활성이 높았고, $25^{\circ}C$와 3$0^{\circ}C$에서는 L. plantarum은 성장 1일 부터 90% 이상, L. sake는 아질산염을 75% 이상 소모하였으며, 성장 2일 이후에는 거의 대부분을 소모하였다. L. mesenteroides는 15와 2$0^{\circ}C$에서는 성장 4일이 경과한 후에 150과 250$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 아질산염에 대한 소모율이 각각 75와 65% 이하로서 Lactobacillus에 비하여 소모 활성 이 낮았으나, 성장 4일이 경과한 후 $25^{\circ}C$에서는 83% 이상, 3$0^{\circ}C$에서는 98% 이상을 소모하였다. 한편, L. plantarum은 600과 900$\mu\textrm{g}$/$m\ell$의 고농도의 아질산염에 대해서도 성장 2일만에 거의 대부분을 소모하였다. 모든 김치 분리 유산균은 성장 온도와 배양 기간에 따라 배지의 pH가 낮아졌으며, 또한 배지의 pH가 낮아짐에 따라 아질산염 소모율이 증가하였다. 15와 2$0^{\circ}C$에서는 배지의 pH가 아질산염의 감소와 관련이 없었으나, $25^{\circ}C$이상에서는 직접적인 관련이 있어서, pH의 감소가 어느 정도 아질산염 소모에 관여하기는 하였지만, pH보다는 온도의 영향이 더 컸다.
본 연구에서는 폐기되고 있는 꽃송이버섯 기부 발효에 적합한 균주 선발을 위해 Lactobacillus plantarum, Saccharomyces cerevisiae, Bacillus subtilis를 활용하여 발효를 진행하였으며, 생균수 실험 결과 L. plantarum이 발효 48시간에 1.486의 흡광도를 보여 빠른 발효속도와 생육능을 보였다. 총 페놀 함량은 L. plantarum과 S. cerevisiae를 활용하여 발효한 실험구에서 301.68 ppm, 299.35 ppm으로 발효 전보다 높은 함량을 보였으며, B. subtilis 발효 실험구는 큰 차이를 보이지 않았다. DPPH 라디칼 소거 활성은 L. plantarum이 63.9%로 가장 우수한 항산화 활성을 보여 L. plantarum을 이용하여 꽃송이버섯 기부를 발효한 후 장어에 사료 첨가제로 급이하였다. 6주간 장어의 폐사는 대조구에서 60마리로 가장 많은 폐사를 보였으며, 꽃송이버섯 기부 추출물이 24마리로 가장 적은 폐사를 보였다. 장어 혈청의 lysozyme 용균 활성 및 E. coli 살균능은 꽃송이버섯 기부 추출물과 발효물 모두 대조구에 비해 높은 활성을 보였다.
The lactic acid bacteria species Lactobacillus plantarum (L. plantarum) has been used extensively for vaccine delivery. Considering to the critical role of dendritic cells in stimulating host immune response, in this study, we constructed a novel CD11c-targeting L. plantarum strain with surface-displayed variable fragments of anti-CD11c, single-chain antibody (scFv-CD11c). The newly designed L. plantarum strain, named 409-aCD11c, could adhere and invade more efficiently to bone marrow-derived DCs (BMDCs) in vitro due to the specific interaction between scFv-CD11c and CD11c located on the surface of BMDCs. After incubation with BMDCs, the 409-aCD11c strain harboring a eukaryotic vector pValac-GFP could lead to more efficient expression of GFP compared with wild-type strains shown by flow cytometry analysis, indicating the enhanced translocation of pValac-GFP from L. plantarum to BMDCs. Similar results were also observed in an in vivo study, which showed that oral administration resulted in efficient expression of GFP in both Peyer's patches (PP) and mesenteric lymph nodes (MLNs) within 7 days after the last administration. In addition, the CD11c-targeting strain significantly promoted the differentiation and maturation of DCs, the differentiation of $IL-4^+$ and $IL-17A^+$ T helper (Th) cells in MLNs, as well as production of $B220^+$$IgA^+$ B cells in the PP. In conclusion, this study developed a novel DC-targeting L. plantarum strain which could increase the ability to deliver eukaryotic expression plasmid to host cells, indicating a promising approach for vaccine study.
Two experiments were conducted to evaluate the effects of direct-fed microbial supplementation on the growth performance and nutrient digestibility in pigs. In experiment 1, forty eight pigs were used in a 42-d growth assay. There were four pigs per pen and three pens per treatment. Dietary treatments included 1) NC (without antibiotic basal diet), 2) PC (NC diet+0.1% antibiotic, 100 g/kg chlortetracycline), 3) DFM-1 (NC diet+0.2% Lactobacillus reuteri and Lactobacillus salivarius complex) and 4) DFM-2 (NC diet+0.2% Lactobacillus reuteri, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus plantarum and Yeast complex). For the overall period, no treatment had significant effects in growth performance. In the nutrition digestibility, the pigs fed DFM diets were improved in DM and N digestibility compared with the pigs fed NC and PC diets but it was not significantly different. In experiment 2, sixty four crossbred pigs were used in a 98-d growth assay. There were four pigs per pen and four pens per treatment. Dietary treatments included 1) HND (high nutrient diet), 2) LND (low nutrient diet), 3) HND+DFM (HND diet+0.2% Lactobacillus reuteri and Lactobacillus plantarum complex) and 4) LND+DFM (LND diet+0.2% Lactobacillus reuteri and Lactobacillus plantarum complex). For overall period of growing phase, the pigs fed LND diets had improved gain/feed (p=0.01) and for overall period in the finishing phase, the pigs fed LND with DFM diets had higher ADG, ADFI and gain/feed than the others but there were no significant differences (p>0.13). In total period of growing-finishing phase, the pigs fed LND diet had higher gain/feed than the pigs fed HND diets (p<0.05). In growing phase, there were not significant differences among the treatments means for DM and N digestibility. However, the pigs fed diets with DFM had improved N digestibility (p<0.02) compared to the pigs fed diets without DFM in finishing phase. In conclusion, DFM slightly improved the growth performance in growing-finishing pigs.
단백질이 풍부한 식품을 고온 하에서 조리하는 과정 중에 주로 발생되는 돌연변이원 heterocyclic amines (HCAs)에 대한 유산균의 결합력 및 제거능을 조사하였다. 당 발효능 및 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 동정된 19종의 유산균 중 Lactobacillus acidophilus D11, Enterococcus faecium D12, Pediococcus acidilactici D19, L. acidophilus D38, Lactobacillus sakei D44, Enterococcus faecalis D66 및 Lactobacillus plantarum D70의 세포이나 배양 상등액은 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indole (Trp-P-1)과 3-amino-1-methyl-5Hpyrido[4,3-b] indole (Trp-P-2)에 의한 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100의 돌연변이 유발을 억제할 수 있었다. HCAs에 대한 유산균 세포의 결합력은 cell wall, exopolysaccharide 및 peptidoglycan 보다 높게 나타났다. 한편, 이들의 결합력은 단백질 분해효소, 가열, sodium metaperiodate 및 산 처리에 의해 유의하게 감소되었으므로 세포벽에 존재하는 당이나 단백질 성분이 이들 HCAs을 결합시키는데 중요한 역할을 하는 것으로 확인되었다. 또한 E. faecium D12, L. acidophilus D38 및 E. faecalis D66의 결합력은 SDS나 금속이온에 의해 감소되었으므로 이들세포와 돌연변이원 사이에는 이온 결합이나 소수성 결합이 작용하는 것으로 추정되었다. 한편, HCAs 결합력이 높은 L. acidophilus D38과 L. plantarum D70은 장관 상피세포에 대한 부착력이 낮으므로 돌연변이원을 세포에 결합시켜 체외로 배출함으로써 독성물질을 제거하는데 효과적인 것으로 확인되었다.
To produce novel cheese-like fermented soybean, the solid-state fermentation of roasted soybean flour (RSF) was performed using 1.0% inoculum Bacillus subtilis HA and Lactobacillus plantarum, with the initial 60% substrate moisture for 10 hr at $42^{\circ}$, resulting in pH 6.5, 0.82% acidity, 3.5% mucilage, 14.3 unit/g protease activity, 7.6 unit/g fibrinolytic activity, 216 mg% tyrosine content and $1.7{\times}10^{10}$ CFU/g of viable cell counts. After the second lactic acid fermentation with 10~30% skim milk powder, the fermented RSF resulted in an increase in acidity with 1.64~1.99%, tyrosine content with 246~308 mg% and protease activity in the range of 5.2~17.5 unit/g and 0.966 water activity. Viable cell counts as probiotics indicated $1.6{\times}10^8$ CFU/g of B. subtilis and $7.3{\times}10^{10}$ CFU/g of L. plantarum. The firmness of the first fermented RSF with 2,491 $g{\cdot}{\o}mm^{-1}$ greatly decreased to 1,533 $g{\cdot}{\o}mm^{-1}$ in the second fermented RSF, although firmness was slightly increased by adding a higher content of skim milk. The consistency of the second fermented RSF also decreased greatly from 55,640 to 3,264~ 3,998 in the presence of 10~30% skim milk. The effective hydrolysis of soy protein and skim milk protein in the fermented RSF was confirmed. Thus, the second fermented RSF with a sour taste and flavor showed similar textural properties to commercial soft cheese.
To understand the molecular mechanism involved in the survivability of cold-tolerant lactic acid bacteria was of great significance in food processing, since these bacteria play a key role in a variety of low-temperature fermented foods. In this study, the cold-stress response of probiotic Lactobacillus plantarum K25 isolated from Tibetan kefir grains was analyzed by iTRAQ proteomic method. By comparing differentially expressed (DE) protein profiles of the strain incubated at 10℃ and 37℃, 506 DE proteins were identified. The DE proteins involved in carbohydrate, amino acid and fatty acid biosynthesis and metabolism were significantly down-regulated, leading to a specific energy conservation survival mode. The DE proteins related to DNA repair, transcription and translation were up-regulated, implicating change of gene expression and more protein biosynthesis needed in response to cold stress. In addition, two-component system, quorum sensing and ABC (ATP-binding cassette) transporters also participated in cell cold-adaptation process. These findings provide novel insight into the cold-resistance mechanism in L. plantarum with potential application in low temperature fermented or preserved foods.
Choi, Dae-Woon;Jung, Sun Young;Kang, Jisu;Nam, Young-Do;Lim, Seong-Il;Kim, Ki Tae;Shin, Hee Soon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권2호
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pp.218-226
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2018
Nanometric Lactobacillus plantarum nF1 (nLp-nF1) is a biogenics consisting of dead L. plantarum cells pretreated with heat and a nanodispersion process. In this study, we investigated the immune-enhancing effects of nLp-nF1 in vivo and in vitro. To evaluate the immunostimulatory effects of nLp-nF1, mice immunosuppressed by cyclophosphamide (CPP) treatment were administered with nLp-nF1. As expected, CPP restricted the immune response of mice, whereas oral administration of nLp-nF1 significantly increased the total IgG in the serum, and cytokine production (interleukin-12 (IL-12) and tumor necrosis factor alpha (TNF-${\alpha}$)) in bone marrow cells. Furthermore, nLp-nF1 enhanced the production of splenic cytokines such as IL-12, TNF-${\alpha}$, and interferon gamma (IFN-${\gamma}$). In vitro, nLp-nF1 stimulated the immune response by enhancing the production of cytokines such as IL-12, TNF-${\alpha}$, and IFN-${\gamma}$. Moreover, nLp-nF1 given a food additive enhanced the immune responses when combined with various food materials in vitro. These results suggest that nLp-nF1 could be used to strengthen the immune system and recover normal immunity in people with a weak immune system, such as children, the elderly, and patients.
Park, Da Min;Bae, Jae-Han;Kim, Min Soo;Kim, Hyeontae;Kang, Shin Dal;Shim, Sangmin;Lee, Deukbuhm;Seo, Jin-Ho;Kang, Hee;Han, Nam Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권11호
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pp.1729-1738
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2019
In sourdough fermentation, lactic acid bacteria perform important roles in the production of volatile and antimicrobial compounds, and exerting health-promoting effects. In this study, we report the probiotic properties and baking characteristics of Lactobacillus plantarum SPC-SNU 72-2 isolated from kimchi. This strain is safe to use in food fermentation as it does not carry genes for biogenic amine production (i.e., hdc, tdc, and ldc) and shows no β-hemolytic activity against red blood cells. The strain is also stable under simulated human gastrointestinal conditions, showing tolerance to gastric acid and bile salt, and adheres well to colonic epithelial cells. Additionally, this strain prevents pathogen growth and activates mouse peritoneal macrophages by inducing cytokines such as tumor necrosis factor-α, interleukin (IL)-6, and IL-12. Furthermore, the strain possesses good baking properties, providing rich aroma during dough fermentation and contributing to the enhancement of bread texture. Taken together, L. plantarum SPC-SNU 72-2 has the properties of a good starter strain based on the observation that it improves bread flavor and texture while also providing probiotic effects comparable with commercial strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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