Lactobacillus kefiranofaciens contains two types of β-galactosidase, LacLM and LacZ, belonging to different glycoside hydrolase families. The difference in function between them has been unclear so far for practical application. In this study, LacLM and LacZ from L. kefiranofaciens ATCC51647 were cloned into constitutive lactobacillal expression vector pMG36e, respectively. Furtherly, pMG36n-lacs was constructed from pMG36e-lacs by replacing erythromycin with nisin as selective marker for food-grade expressing systems in Lactobacillus plantarum WCFS1, designated recombinant LacLM and LacZ respectively. The results from hydrolysis of o-nitrophenyl-β-galactopyranoside (ONPG) showed that the β-galactosidases activity of the recombinant LacLM and LacZ was 1460% and 670% higher than that of the original L. kefiranofaciens. Moreover, the lactose hydrolytic activity of recombinant LacLM was higher than that of LacZ in milk. Nevertheless, compare to LacZ, in 25% lactose solution the galacto-oligosaccharides (GOS) production of recombinant LacLM was lower. Therefore, two β-galactopyranosides could play different roles in carbohydrate metabolism of L. kefiranofaciens. In addition, the maximal growth rate of two recombinant strains were evaluated with different temperature level and nisin concentration in fermentation assay for practical purpose. The results displayed that 37℃ and 20-40 U/ml nisin were the optimal fermentation conditions for the growth of recombinant β-galactosidase strains. Altogether the food-grade Expression system of recombinant β-galactosidase was feasible for applications in the food and dairy industry.
The effects of lactic acid bacteria on the chemical and microbial changes of fermented kimchi at various temperatures were studied. Kimchi was homogenized and was sterilized by ultra violet (UV), then Lactobacillus plantarum, Leuconostoc mesenteroides, Pediococous acidilactici, Lactobacillus brevis and the mixture of these bacteria inoculated on sterilized kimchi, respectively. The measurement of alcohol by gas chromatography, and changes of sugar content and total viable count were investigated and palatability test was carried while inoculated kimchi was fermented at $30^{\circ}C$, $21^{\circ}C$ and $7^{\circ}C$. Ethyl alcohol was detected by GC in sample I (original Kimchi homogenate), III(inoculated Leu. mesenteroides), V(inoculated with Lac. brevis), then especially, more content were detected at $14^{\circ}C$. Sugar content reduced in accordance with fermentation proceeding. Total viable count increased at early fermentation stage, but thereafter decreased slowly. In the result of palatability test, sample I was the highest at all temperatures, sample III and IV (inoculated with mixed lactic acid bacteria) was the following in that kimchi odor and taste and the temperature.
Kim, Myung-Hee;Oh, Se-Wook;Hong, Sang-Pill;Yoon, Suk-Kwon
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.30
no.6
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pp.1439-1447
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1998
Antimicrobial activity of chitosan and chitosan oligosaccharides on the microorganism related to Kimchi was investigated. 5 kinds of chitosan, which have different deacetylation degrees and molecular weights were prepared and its effect on the organoleptic characteristics, pH and titrable acidity of Kimchi in the storage time were examined. C-4 and C-5 chitosan (D.A.:$92{\sim}99%$, M.W.: $16,000{\sim}32,000)$ recorded high score in the texture and showed pH 4.9 and titrable acidity 0.35%, compared with control (pH 4.1, titrarable acidity 0.50 %) evaluated to optimal ripening time. The chitosan oligosaccharides containing relatively large amount of $pentamer{\sim}heptamer$ were chosen from C-4 chitosan hydrolyzates. Antimicrobial activity of C-4 and chitosan oligosaccharides against B. subtilis, B. cereus, Pse. fluorescens, E. coli, Lac. plantarum, Leu. mesenteroides, Lac. brevis, Ent. faecalis and 3 kinds of microflora from Kimchi were examined. The clear zone against microorganism were $9{\sim}20mm$ at 3.0% C-4 chitosan and $8{\sim}24mm$ at 5.0% chitosan oligosaccharides, and MIC of chitosan and chitosan oligosaccharides was shown $0.01{\sim}0.05%$ and $0.05{\sim}0.2%$, respectively. The antimicrobial effect of chitosan and chitosan oligosaccharides was also observed in 3 kinds of total microflora from Kimchi and was most strong in the microflora from the ripening stage of Kimchi, suggesting C-4 chitosan and chitosan oligosaccharides could be applicable to extending shelf-life of Kimchi.
Hwang, Chung Eun;Haque, Md. Azizul;Hong, Su Young;Kim, Su Cheol;Cho, Kye Man
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.62
no.4
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pp.441-446
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2019
The assortment of endophytic lactic acid bacteria (LAB) in kimchi derives from its raw vegetables, which include Chinese cabbage, radish, welsh onion, onion, garlic, red pepper, and ginger. These vegetables were examined during mulkimchi fermentation using gene-specific multiplex polymerase chain reaction and 16S ribosomal RNA sequence analysis. Sixteen species from five LAB genera (Leuconostoc, Lactobacillus, Lactococcus, Pediococcus, and Weissella) appeared in the raw kimchi materials. Interestingly, nine LAB species were identified in mulkimchi on fermentation day 0 as follows: Leuconostoc carnosum, Leuconostoc citreum, Leuconostoc gelidum, Leuconostoc inhae, Leuconostoc mesenteroides, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus sakei, Lactococcus lactis, and Weissella confusa. Seven additional LAB species were present in mulkimchi at fermentation day 9 as follows: Leuconostoc gasicomitatum, Leuconostoc kimchii, Lactobacillus brevis, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus pentosus, Pediococcus pentosaceus, and Weissella koreensis. These species corresponded completely with the LAB in kimchi vegetables. Wei. confusa was the predominant LAB during early fermentation (pH 6.20 to 4.98 and acidity 0.20 to 0.64%), while Lac. sakei, Lac. plantarum, and Wei. koreensis became dominant later in fermentation (pH 4.98 to 3.88 and acidity 0.64 to 1.26%). These results collectively demonstrate that the LAB involved in mulkimchi fermentation originates from the raw vegetables examined.
In this study, we isolated two species of bacteria for the powerful biotrasnformation of ginsenosides from Kimchi and human feces. Using biochemical tests and 16s rRNA sequencing, the selected strains were identified as Latobacillusplantarum (CKDHC0801) and Lactobacillussakei (CKDHC0802). Changes in cell growth and pH were examined in red ginseng. CKDHC 0801 and CKDHC 0802 reached their maximum growth phase after 24 hr and 48 hr, respectively, whereas the combined culture of CKDHC 0801 and CKDHC 0802 showed higher cell growth than bacterial strain alone. During fermentation of CKDHC 0801 and the combined culture, the pH values decreased from 5.2 to 4.2 after 24 hr, but CKDHC 0802 reached pH of 4.2 after 3day. The identities of ginsenosides were biotransferred from high molecular (Rg1 and Rb2) to low molecular (Rg3, Rg5, Rk1, PPD) by fermentation of both bacteria. Therefore, the results of this study demonstrate that CKDHC 0801 and CKDHC 0802 could be used to enhance to effects of red ginseng.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.28
no.5
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pp.1022-1028
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1999
The solvent extracts of Ulmi cortex, which were extracted by using several solvents with different polarities, were prepared for utility as a natural preservatives. The antimicrobial activities and cell growth inhibitions were investigated to each strain with the different concentrations of Ulmi cortex extracts. Methanol extract showed the highest antimicrobial activity. The methanol extract was represented the broad antimicrobial activities for the gram positive and negative strains. Minimum inhibitory concentrations (MIC) for each strains were appeared to around 0.3mg/ml at each of Bacillus cereus, Bacillus subtilis, and Staphylococcus aureus. The cell growth inhibitions were not shown on Lactobacillus bulgaricus, Lac tobacillus plantarum, and Bifidobacterium bifidum, but greatly on the Clostridium butyricum. The meth anol extracts were further reextracted sequentially with hexane, chloroform, ethyl acetate, and butanol for purifying crude methanol extracts. The extract, which was reextracted by butanol, showed the highest antimicrobial activity.
This study was undertaken to investigate the physicochemical properties of chitosans produced from chitins which were prepared from shrimp shell under the 4 different conditions(HCl concentration : 1 N, 4 N and reaction temperature $0^{\circ}C,\;20^{\circ}C$). The effects of chitosan on the properties of Kakdugi during storage also were examined. Viscosity of chitosan was markedly different$(313.1{\sim}98.8\;cps)$ depending on the production conditon. Chitosan solution showed pseudoplastic property. The infrared(IR) spectrums of chitosans prepared under the conditions of this study were very simillar, and the degree of deacetylation of chitosan was relatively high$(92{\sim}96%)$ independent of the extraction conditions of chitin. As the storage period was extended, markedly lower pH and higher titratable acidity were resulted in all the groups. Throughout the storage period, pH and titratable acidity of kakdugies with chitosan were higher and lower, respectively than those of control. Viscosity of kakdugi juice was significantly different among the groups and as the storage period increased, the juice viscosity decreased. At the eighth day of storage, the juice of control group was more viscous than those of kakdugies containing chitosan. Throughout the storage period the numbers of total microorganisms and of microorgarnisms of Leuconostoc genus in control kakdugi tended to be higher and lower, respectively than those in kakdugies containing chitosan. The growth of Lac. plantarum was slightly lower in kakdugi containing chitosan C produced at low HCl concentration and high temperature compared to the others.
The Leuconostoc paramesenteroides dominated at refrigeration temperature range was isolated from kimchi, and improved its growth properties by mutation for competitive growth against Lactobacillus plantarum at lower pH. It was found that the minimal pH for the wild type Leuconostoc paramesenteroides Pw growth was pH 4.5 adjusted with HCI and pH 5.0 adjusted with organic-mixture (lactic acid:acetic acid=1:2), respectively. The mutant P-100 could grow in pH 4.0, 4.5, respectively, in MRS broth. Two strains Pw and P-100 were added into kimchi as starter and compared the quality characteristics of kimchi. The total acceptability of Pw and P-100 inoculated kimchi were evaluated better than that of control kimchi (no starter added) by sensory test and extended the optimal pH range of kimchi up to about 2.2, 2.5 times, respectively. In kimchi added P-100, the succinic acid was more abundant than others and the total number of Lactobacillus plantarum was down about 2.5 times in contrast to control kimchi.
Red pepper powder sensitive to aflatoxins contamination is major ingredients of kimchi. This study was conducted to investigate the effect of lactic acid bacteria (LAB) on the changes in aflatoxin levels during kimchi fermentation. Baechu kimchi was contaminated with aflatoxins ($B_1$, $B_2$, $G_1$, and $G_2$) and inoculated with LAB (Lactobacillus plantarum and Leuconostoc mesenteroides), and the following characteristics were investigated for 8 weeks: pH, titratable acidity, salinity, microbial properties, and aflatoxin levels. The pH decreased rapidly during storage, and the titratable acidity was increased. The salinity of the samples was shown to increase from 2.30 to 2.40%. The total number of aerobic bacteria and lactic acid bacteria in kimchi inoculated with LAB was significantly higher than that of the others. Yeast and molds were detected at approximately 1~3 log CFU/g during storage. Coliforms were detected in the control after 4 weeks, whereas in other samples they were not detected until after 2 weeks. The aflatoxin levels reduced during kimchi fermentation. The average reduction rate of aflatoxin levels during kimchi fermentation was 8.39%, but in kimchi inoculated with Lac. plantarum and Leu. mesenteroides, the rate were 25.16 % and 27.86%, respectively. These results showed that aflatoxins can be removed by LAB during kimchi fermentation.
The characteristics of Kimchi, associated with proceeding velocity of fermentation, and microbial changes, were investigated during fermentation where kimchi were prepared by the addition of different kinds of minor ingredients. In all samples, total acidity increased, and the pH and total reducing sugar content decreased as the fermentation proceeded. Redox potentials decreased from early to middle fermentation period but thereafter increased and had the lowest value at optimum ripening stage. The counts of total viable and lactic acid bacteria increased rapidly at the begining and decreased slowly. These bacterial counts of kimchi samples containing ginger, red pepper powder, and mixture of all minor ingredients were higher than those of other samples. The number of Leuconostoc mensenteroides reached the maximum at the optimum fermenting stage, Lactobacillus plantarum appeared at the time when Leu. mesenteroides reduced. All these phenomena were observed earlier in the samples containing raw red pepper and later in the samples added garlic than in other samples. It is suggested that garlic is the ingredient which improved storage capacity by prolonging fermentation period by lactic acid bacteria beneficial to less acidification, and ginger and red pepper powder are materials which gave better taste to kimchi by stimulating the growth of Leu. mesenteroids. And redox potential was an useful indicator in choosing optimum ripening time during fermentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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