Shin, Su Young;Lim, Hae-Song;Seol, Min-A;Jung, Young Jun;Kim, Il Ryong;Song, Hae Ryoung;Lee, Jung Ro;Choi, Wonkyun
Journal of Plant Biotechnology
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v.43
no.4
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pp.473-478
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2016
With the increasing development and commercial use of genetically modified maize, it is essential to develop an appropriate method for detection of individual LMO (Living modified organism) events for monitoring the samples. In South Korea, commercial planting and accidental or unintentional releases of LMOs into the environment were not approved. In this study, to increase the efficiency of LMO detection, we developed simultaneous detection methods for 11 LM maize events. This multiplex PCR detection method is economical, as it saves time, cost and labor. We developed 11 individual LM maize events, and applied 4 multiplex PCR sets to the LM maize samples. These results are confirmed by applying the multiplex analysis of LMO environmental monitoring from 2012 to 2014, which represents the unintentionally released LM maize samples. The data were correlated with event specific PCR results. Our results indicate that the multiplex PCR method developed is suitable for detection of LM maize in LMO monitoring.
Shin, Su Young;Moon, Jeong Chan;Choi, Wonkyun;Kim, Il Ryong;Jo, Beom-Ho;Lee, Jung Ro
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.1
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pp.77-82
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2018
In South Korea, LM crops are not allowed to grow locally, but have been allowed to be imported as food and feed purposes. Currently, the typical LMO imports are continuously increasing in the region of South Korea. In 2014, we carried out a review of the environmental release monitoring of LM maize (Zea mays L.) in Gyeonggi-do of South Korea, and analyzed volunteer samples using strip test kits and polymerase chain reaction (PCR) methods. We thereby collected 44 volunteers of released LM maize in 169 locations around ports, from roadsides, feed factories and stockbreeding farmhouses. We found 4 positive samples at 3 sites using strip test kits. Based on the PCR analysis, the LM maize plants were found using event-specific primers. These results suggested that our monitoring is necessary to detect the presence of released LM maize in the natural environment of South Korea.
Do Yu, Kang;Myung Ho, Lim;Soo In, Sohn;Hyun Jung, Kang;Tae Sung, Park
Korean Journal of Agricultural Science
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v.48
no.4
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pp.1051-1065
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2021
Recent times have seen sustained increases in genetically modified (GM) crops not only for cultivation but also for the utility of food and feed worldwide. Domestically, commercial planting and the accidental or unintentional release of living modified (LM) crops into the environment are not approved. Many detection methods had been devised in an effort to realize effective management of the safety of agricultural genetic resources. In order to develop event-specific polymerase chain reaction (PCR) markers for LM crops, we analyzed the genetic information of LM crops. Genetic components introduced into crops are of key importance to provide a basis for the development of detection methods for LM crops. To this end, a total of 18 varieties from four major LM crop species (maize, canola, cotton, and soybeans) were subjected to an analysis. The genetic components included introduced genes, promoters, terminators and selection markers. Thus, if proper monitoring techniques and single or multiplex PCR strategies that rely on selection markers can be established, such an accomplishment can be regarded as a feasible solution for the safe management of staple crop resources.
Park, Jin Ho;Seol, Min-A;Eum, Soon-Jae;Kim, Il Ryong;Lim, Hye Song;Lee, Jung Ro;Choi, Wonkyun
Journal of Plant Biotechnology
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v.47
no.4
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pp.309-315
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2020
Advances in biotechnology have led to progress in crop genetic engineering to improve agricultural productivity. The use of genetically modified (GM) crops has increased, as have consumers' and regulators' concerns about the safety of GM crops to human health, and ecological biodiversity. As such, the identification of GM crops is a critical issue for developers and distributors, and their labeling is mandatory. Multiplex polymerase chain reaction (PCR) has been developed and its use validated for the detection and identification of GM crops in quarantine. Herein, we established a simultaneous detection method to identify four GM maize events. Event-specific primers were designed between the junction region of transgene and genome of four GM maize lines, namely 5307, DAS-40278-9, MON87460, and MON87427. To verify the efficiency and accuracy of the multiplex PCR we used specificity analysis, limit of detection evaluation, and mixed certified reference materials identification. The multiplex PCR method was applied to analyze 29 living, modified maize volunteers collected in South Korea in 2018 and 2019. We performed multiplex PCR analysis to identify events and confirmed the result by simplex PCR using each event-specific primer. As a result, rather than detecting each event individually, the simultaneous detection PCR method enabled the rapid analysis of 29 GM maize volunteers. Thus, the novel multiplex PCR method is applicable for living modified organism volunteer identification.
Seol, Min-A;Jo, Beom-Ho;Choi, Wonkyun;Shin, Su Young;Eum, Soon-Jae;Kim, Il Ryong;Song, Hae-Ryong;Lee, Jung Ro
Journal of Plant Biotechnology
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v.44
no.1
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pp.97-106
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2017
Living modified crops are genetically modified living organisms and are widely used in biotechnical research and desired goods. As the reliance on LM products, concerns about safety of LMOs have been continuously increased in South Korea. We established the detection methods for unintentional released LMOs in environmental conditions. To detect six LM event genes of 1 canola, 1 maize and 4 soybeans, PCR conditions were based upon consideration of the Joint Research Centre information. Genomic DNAs were isolated from LM samples and PCR analysis were performed using each event-specific primer pair. Event-specific genes of all events were efficiently recognized by our methods. To investigate the insertion site of LM genes in each genome, we verified PCR product sequence by DNA sequencing. These results suggest that the LM event-specific gene amplification can be efficiently developed. In addition, our detection method is fit for monitoring and post-management of LM crops in the environment.
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