김치에 $Cu^{+}$와 $Cu^{2+}$ 을 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 및 5.0 mM 농도로 첨가하여 2$0^{\circ}C$에서 김치의 발효경향을 살펴보고 또한 젖산균 생육에 미치는 구리 이온의 영향을 알아보았다. Cu$SO_4$와 CuCl의 첨가는 김치에 생육하는 총생균, 젖산균의 생육을 저해하고 김치의 산도를 유지하는데 효과가 있었다. 또한 Leu. mesenteroides의 경우 발효 10일째 대조군의 급격한 감소와는 다르게 발효 14일째에 $10^{5}$ ~$10^{6}$ CFU/ml를 유지하였다. 따라서 $Cu^{+}$와 $Cu^{2+}$의 첨가는 김치의 숙성에 관여하는 주 발효균인 Leu. mesenteroides의 생육기간을 연장시키고 과도한 산의 생성을 억제함으로써 김치의 산패를 지연시킬 수 있는 것으로 생각된다. $Fe^{2+}$와 $SO_4$$^{2-}$ 이온은 김치발효에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 각각의 젖산균의 생육에 미치는 $Cu^{2+}$ 이온의 영향을 보기 위하여 각 젖산균마다 Cu$SO_4$를 농도별로 첨가한 후 흡광도를 측정한 결과 Leu. mesenteroides 6, Str. faecalis 12, Lac. plantarum 14, Lac. brevis 15, Leu. mesenteroides LA 10, Lac. plantarum LA 97의 6가지 젖산균은 $Cu^{2+}$ 첨가농도에 따른 균주마다 내성의 차이를 보였으나 각각의 균주 모두 $Cu^{2+}$ 첨가에 따라 균의 생육이 저해되었다.
$5{\sim}7^{\circ}C$의 저온에서 20일 및 50일간 각각 발효된 A 및 B의 두 김치시료에서 저온성 젖산균 각각 30주씩을 무작위로 분리하고 동정을 하였다. 김치 A에서 분리한 30주 중 14주는 Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides로, 12주는 Leu. mesenteroides subsp. dextranicum으로, 4주는 Lac. bavaricus로 각각 동정되었고, 김치 B에서 분리한 30주 중 20주는 Lac. bavaricus로, 3주는 Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides로, 3주는 Leu. lactis로, 2주는 Leu. paramesenteroides로, 2주는 Lac. homohiochii로 각각 동정되었다. 비록 본 균주들이 위와 같이 동정되었지만 당류발효 pattern과 arginine에서 $NH_3$의 생성능이 Bergey's Manual of Systematic Bacteriology에 기재된 내용과 일치하지 않는 균주가 많았고, Leu. mesenteroides subsp. mesenteroides와 Leu. mesenteroides subsp. dextranicum으로 동정된 균주들 중의 일부는 당류발효 pattern이 동일 subspecies의 균주들 사이보다 다른 subspecies와 더욱 일치하는 모순까지 드러내었다. 이들 저온성 젖산균들을 기존의 체제에 따라 분류함에는 어려움이 따랐으며 이의 해결을 위한 후속연구가 요구되었다.
Pepsin, ${\alpha}-chymotrypsin$, protease 및 papain을 이용하여 정어리육 단백질의 pepsin가수분해물로 부터 합성한 plastein과 유리 glutamic acid 및 leucine을 도입시킨 plastein의 일반성분, 수율, 아미노산조성 및 분자량을 측정하여 비교 검토한 결과 plastein의 단백질 함량은$82.0{\sim}88.2%$였으며 회분함량은 $2.7{\sim}7.6%$로 glu-papain plastein과 leu-papain plastein의 2.5% 및 1.9%보다 높았고, 지방함량은 $0.3{\sim}0.8%$범위였다. 수율은 protease plastein이 52.3%로 가장 높았고, papan plastein, pepsin plastein 및 ${\alpha}-chymotrypsin$ plastein은 각각 44.2%, 43.6%, 43.2%였으며, leu papain plastein과 glu-papain plastein은 각각 33.2% 및 29.0%였다. plastein종류에 따른 아미노산조성에는 큰 차이는 없었으며, leu-papain plastin과 glu-papain plastein의 leucine 및 glutamlc acid 함량은 각각 37.5% 및 39.3%였으나 대조구인 papain plastein에서는 이들의 함량이 7.1%, 14.4%에 불과하였다. 겔여과에 의한 가수분해물의 분자량은 1,800 및 285인 것이 주종을 이루었으나 이외에 분자량 3,600 및 830인 획분도 존재하였다. plasteln의 분자량은 ${\alpha}-chymotrypsin$ plastein이 26,000 및 9,100였으며 pepsin plastein은 23,000이 주증을 이루었고, 10,000 및 4,300도 존재하였고, protease plastein의 분자량은 18,000였다. leu-papain plastein과 glu-papain plastein은 각각 29,000 및 19,000 였으나 papain plastein 은 13,000로 가장 낮았다.
Acetolactate synthase (ALS)는 가지를 가진 필수아미노산 Val, Leu, Ile의 생합성 과정에서 공통적으로 작용하는 효소이다. ALS는 서로 구조적 유사성이 없는triazolopyrimidine, imidazolinone,sulfonylurea, 그리고 pyrimidyl-oxy-benzoate 제초제들의 공통적인 작용 표적이다. 보리로부터 부분 정제한 ALS를 이용하여 새로이 합성한 triazolopyrimidine sulfonamide 유도체들의 저해 활성을 측정하였다. 활성을 가진 유도체들의 $IC_{50}$ 값은 0.5nM∼8${\mu}M$ 범위였으며, 그 중에서 탁월한 저해 활성을 갖는 것은 TP1과TP2 유도체로 $IC_{50}$ 값은 각각 0.5 nM과 1.6 nM이였다. 이 저해제들은 기존의 상품화된 제초제인 Metosulam ($IC_{50}$;3.6 nM), Flumetsulam ($IC_{50}$;126 nM), 그리고 Cadre ($IC_{50};4 {\mu}M$)에 비해 보리 ALS에 대한 저해 활성이 보다 우수하였다. 보리 ALS에 대한 TP2의 저해 활성은 반응시간이 증가함에 따라 증가하였고, 혼합형 저해 유형을 보였다. TP2와 imidazolinone 계열의 제초제인 Cadre, 그리고 되먹임(feedback) 저해제인 Leu에 대한 이중저해 (dual inhibition) 실험 결과 TP2와 Cadre의 경우는 평행한 반응속도론적 형태가 그러나 TP2와 Leu의 경우는 한 점에서 만나는 반응속도론적 헝태가 얻어졌다. 이는 TP2와 Cadre의 결합 부위가 최소한 부분적으로 중복되고 있음을 시사한다. Cys 잔기에 대한 화학적 변형은 TP2와 Cadre의 결합에는 영향을 미치지 않으나, Leu의 결합에는 영향을 미쳤다.
Leu. mesenteroides CJNU 0705 균주는 모유에서 분리되었으며 16S rRNA 유전자 염기서열 분석과 자당(2%)이 포함된 tryptic soy agar plate상에서의 덱스트란 생성능을 통하여 동정하였다. Leu. mesenteroides CJNU 0705 균주는 미세먼지 속에 존재하는 피부 유해성 중금속인 납과 카드뮴에 대한 흡착능이 있으며 이러한 성질은 사균 상태에서도 확인되었다. 또한 Leu. mesenteroides CJNU 0705 균주는 여드름 원인균인 P. acnes 균주에 대하여 항균활성을 나타내었다. 마지막으로 피부 건강기능소재로 잘 알려진 녹차, 당근, 개똥쑥, 파슬리, 브로콜리 및 옥수수수염 추출물을 기본 배지(A)로 하여 2% 자당(B) 혹은 2% 자당과 3% 효모추출물(C)을 각각의 추출물에 첨가한 후 Leu. mesenteroides CJNU 0705 균주를 접종 및 배양하여 덱스트란 생산량을 확인한 결과 C 배지가 최적배지로 확인되었으며 덱스트란의 생산은 주사전자현미경 사진으로도 관찰되었다. 결론적으로 모유 유래의 Leu. mesenteroides CJNU 0705 균주나 이를 이용한 천연발효추출물은 피부 건강기능소재로 활용될 수 있을 것이다.
The purpose of this research was to investigate the potential use of cheese whey protein (CWP), a cheese by-product. The physiological activity of calcium-binding peptides in CWP may be used as a food additive that prevents bone disorders. This research also examined the characteristics of calcium-binding peptides. After the CWP was heat treated, it was hydrolyzed by trypsin. Then calcium-binding peptides were separated and purified by ion-exchange chromatography and reverse phase HPLC, respectively. To examine the characteristics of the purified calcium-binding peptides, amino acid composition and amino acid sequence were analyzed. Calcium-binding peptides with a small molecular weight of about 1.4 to 3.4 kDa were identified in the fraction that was flowed out from 0.25 M NaCl step gradient by ion-exchange chromatography of tryptic hydrolysates. The results of the amino acid analysis revealed that glutamic acid in a calcium-binding site took up most part of the amino acids including a quantity of proline, leucine and lysine. The amino acid sequence of calcium-binding peptides showed Phe-Leu-Asp-Asp-Asp-Leu-Thr-Asp and Ile-Leu-Asp-Lys from $\alpha$-LA and Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys and Val-Tyr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys from ${\beta}$-LG.
We examined a role of proteasome, the non-lysosomal multicatalytic protease complex,on the differentiation of chick embryonic myoblasts in culture. The peptide hydrolyzing activities of proteasome were found to change; the hydrolyzing activity against N-succinyl-Leu-Leu- Val- Tyr-7 -amido-4-methy1coumarin (SLLVY-AMC) was prominent and increased with myogenic differentiation. Proteasome inhibitors, N-carbobenzoxy-Leu-Leu-norvalinal (MG115) and N-carbobenzoxy-Ile-Glu (O-t-butyl)-Ala-Leucinal (PSI), blocked membrane fusion of myoblasts as well as the SLLVY-AMC hydrolyzing activity. Those inhibitory activities of the agents occurred in parallel, but were reversible and both cell fusion and the peptidase activity were restored when the agents were withdrawn from the culture medium. On the other hand, the agents caused accumulation of the ubiquitinylated proteins in the cytoskeletal proteins. These results suggest that each of the peptide hydrolyzing activities of proteasome is independently regulated during the myogenic differentiation and the chymotrypsin-like activity may play an important role in that process.
Kim, Hee-Sik;Lee, Chang-Ho;Suh, Hyun-Hyo;Ahn, Keug-Hyun;Oh, Hee-Mock;Kwon, Gi-Seok;Yang, Ji-Won;Yoon, Byung-Dae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제7권3호
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pp.180-188
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1997
Bacillus subtilis C9 was selected by measuring the oil film-collapsing activity and produced biosurfactant in a medium containing glucose as a sole carbon source. The biosurfactant emulsified hydrocarbons, vegetable oils and crude oil, and lowered the surface tension of culture broth to 28 dyne/cm. A biosurfactant, C9-BS produced by B. subtilis C9 was purified by ultrafiltration, extraction with chloroform and methanol, adsorption chromatography, and preparative reversed phase HPLC. Structural analyses, IR spectroscopy, FAB mass spectroscopy, amino acid composition, and NMR analyses, demonstrated that C9-BS was a lipopeptide comprising a fatty acid tail and peptide moiety. The lipophilic part consisting of $C_{14}\;or\;C_{15}$ hydroxy fatty acid was linked to the hydrophilic peptide part, which contained seven amino acids (Glu-Leu-Leu-Val-Asp-Leu-Leu) with a lactone linkage.
Two new bitter-tasting cyclic peptides comprising six amino acids, namely gamakamide C and D, were isolated from cultured oysters Crassostrea gigas. Dimethylaminoazobenzene sulfonyl-amino acid analysis detected Val and Leu in gamakamide C and Ile and Leu in gamakamide D. The molecular formula of gamakamide C was determined as $C_{43}H_{60}N_{7}O_8S$ by high-resolution fast atom bombardment mass spectroscopy (HR FAB-MS) ($[M+H]^+m/z822.4200{\Delta}-2.4mmu$), and that of gamakamide D was determined as $C_{43}H_{62}N_7O_8S$ by HR FAB-MS ($[M+H]^+m/z836.4379{\Delta}-2.0mmu$). Comparison of amino acid analyses and fragment ions by MS/MS among gamakamide C, D, and E (known), the structures of gamakamide C and D were confirmed $as-{\small{L}}-Val-{\small{L}}-Met(SO)-{\small{L}}-NMe-Phe-{\small{L}}-Leu-{\small{D}}-Lys-{\small{L}}-Phe-$ and $-{\small{L}}-Ile-{\small{L}}-Met(SO)-{\small{L}}-NMe-Phe-{\small{L}}-Leu-{\small{D}}-Lys-{\small{L}}-Phe-$, respectively.
어류 가공시 부산물로 얻어지는 어피를 보다 효율적으로 이용할 목적으로 말쥐치피로부터 콜라겐을 추출한 후, 이에 소수성 잔기를 증가시키기 위하여 leucine alkyl ester를 도입하여 기능성 개량을 시도하였다. 말쥐치피 콜라겐 및 FSC-Leu-OCn의 콜라겐 함량, 아미노산 조성에 의한 소수성, 분자량, 용해도, 보수력, 분산성, 지방흡수력, 포말성, 유화성 등을 계면활성제인 Tween-60과 비교 검토한 결과, 어피 콜라겐에 leucine alkyl ester를 도입시킨 $FSC-Leu-OC_8$은 기능성 중 유화성 및 유화안정성이 매우 향상되어 유화제로 이용할 수 있을 것으로 본다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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