하나로(HANARO)를 이용하여 핵분열 방법으로 진단용 방사선원인 $^{99m}$ Tc의 모핵종인 Mo-99를 생산할 경우, HEU 및 LEU UO2 표적이 사용될 수 있다. 표적연료로서 HEU(93w/o $^{235}$ U)가 LEU(19.75w/o $^{235}$ U)에 비해 생성수율(Ci/gU)이 높게 나타났으며 제품의 질(quality)을 좌우하는 비방사능(Ci$^{99}$Mo/gMo)은 같게 나타났다. HEU가 같은 Mo-99의 방사능량을 얻기 위해서는 우라늄 장전량이 적어지므로 폐기물측면과 용해측면에서 이득이나 농축도를 고려하면, 큰 이득이 발생하지 않으므로 하나로에 LEU를 사용하는 것도 타당하다 할 수 있다.
파, 마늘, 생강, 적생고추, 고추가루의 멸균 추출액의 농도가 2%와 4%가 되도록 첨가한 배지에서 김치의 주된 젖산균들인 Leu. mesenteroides와 Lac. plantarum의 생육을 조사하였는데, 모든 부재료가 Lac. plantarum의 생육을 저해하였으며 마늘은 이 균에의 저해효과가 가장 컸으며, 생강이 Leu. mesenteroides의 생육에 증진 효과를 보였고, 마늘이 역시 Leu. mesonteroides의 생육에 저해효과를 나타내었다. 마늘, 생강 및 고추가루의 연속분획추출 후 멸균액을 배지에 첨가해 역시 두균의 생육정도를 조사하였을 때 마늘의 부탄을 분획물이 두균의 생육에 저해효과를 보여 그 효과물질은 alkaloid나 flavonoid일 것으로, 또 생강과 고추가루의 물 분획물이 Leu. mesenteroides의 생육 촉진 효과를 나타낸 바 그 효과물질은 당류일 것으로 추정되었다.
The principal objective of this study was to determine the effects of leucine on body weight reduction in high fat diet-induced overweight rats. To induce overweight, six-month-old male Sprague-Dawley rats (n = 80) were divided into 8 groups; one group of 10 rats was fed on a normal fat diet and the remaining 70 rats were fed on a high-fat diet (40% of energy as fat) for 14 weeks. Then, 10 rats fed on the normal fat diet and another 10 rats fed on the high fat diet were sacrificed to identify overweight induction. The remaining 60 rats were divided randomly into 6 groups according to body weight and fed on one of the diets with different dietary fat levels (9.6% or 40% of energy as fat) and leucine levels (0, 0.6 or 1.2 g/kg BW) for the following 5 weeks of experiments. The body weight loss in the Leu-administered groups (0.6 g, 1.2 g/kg BW) was significantly higher than those of Leu non-administered groups. The perirenal fat pad weights in the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. Of the hepatic enzymes, glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) activities were reduced significantly in the Leu-administered groups than in the Leu non-administered groups. With the oral glucose tolerance test (OGTT), the incremental areas under the curve of the glucose response (IAUC) of the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. The fasting glucose concentration and HOMA-IR of the Leu-administered groups were significantly lower than those of the Leu non-administered groups. In conclusion, the results of this study suggest that one of the possible mechanisms of leucine in the observed body weight reduction might involve the inhibition of lipogenic enzyme activities such as glucose-6-phosphate dehydrogenase, rather than the activation of lipolysis enzymes. Additionally, leucine adminstration resulted in improved glucose metabolism.
군소의 중추신경계로부터 myomodulin A (MMA)과 myomodlin E (MME)의 정제에 대해 보고하고자 한다. 500마리 군소의 중추신경계를 산조건으로 추출한 후 4종류의 HPLC column system에 적용하여 두가지 신경성 펩타이드를 정제하였다. HPLC 분리과정에서 얻어진 모든 분획의 활성을 조사하기 위하여 bioassay system으로 진주담치 (Mytilis edulis)의 ABRM을 이용하였다. 최종 정제된 신경성 펩타이드는 Edman 분해법을 이용한 아미노산 서열 분석기, 질량분석기와 화학합성을 통해 완전한 일차구조를 밝힐 수 있었다. 정제한 MMA와 MME의 일차구조는 각각 Pro-Met-Ser-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$, (847.41 Da) 과 Gly-Leu-Gln-Met-Leu-Arg-Leu-$NH_2$, (830.50Da) 이었다. 또한 이들 합성 펩타이드는 진주담치의 ABRM에 대해 phasic contration의 조절활성을 나타내었다.
The kinetics of the thermolysin-catalyzed synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-phenylalanyl-L-leucine ethyl ester (Z-Phe-LeuOEt) from N-(benzyloxycarbonyl)-L-phyenylalanine (Z-Phe) and L-leucine ethyl ester (LeuOEt) in an ethyl acetate saturated aqueous system in a batch operation were studied. The kinetics for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt were expressed using a rate equation for the rapid equilibrium random bireactant mechanism. The four kinetic constants involved in the rate equation were determined numerically by the quasi-Newton method so as to fit the calculated results with the experimental data. Within the pH and temperature range examined, the $K_{cat}$ value for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt reached a maximum at pH 7.0 and $45^{\circ}C$, whereas the affinity between Z-Phe and thermolysin reached a maximum at pH 6.0 adn $40^{\circ}C$. The inhibitory effect of Z-Phe on the condensation reaction decreased as the pH and temperature decreased. In contrast, they affinity between LeuOEt and thermolysin remained unchanged within the pH and temperature range examined. Therefore, it was concluded that the protonation state of the carboxyl groups. of Z-Phe was more imprtant than that of the amono groups of LeuOEt for the synthesis of Z-Phe-LeuOEt in the present solvent system. The equilibrium yield at pH 6.0 and $30^{\circ}C$ was 8% higher than that at pH 7.0 and $40^{\circ}C$, although the rate was much slower. This result suggested that the affinity between the enzyme and the substrate rather than the overall rate was a more important factor affecting the equilibrium yield, when the peptide synthesis was carried out in a product-precipitation system.
새로운 NK-2 antagonist이며 고리상 펩티드인 cycIo-($Gln^1-Trp^2-Phe^3-{\beta}Ala^4-Leu^5-Met^6$)의 DMSO 용액 중에서의 형태를 2차원 핵자기공명과 분자동력학적인 계산에 의하여 결정하였다. 조건을 만족시키는 25개의 구조는 모든 아미노산 잔기의 골격원자들 (N,$C^{\alpha}$, C')의 자승 평균 평방근이 $0.02{\AA}$이내로 수렴하였다. 이 고리상 펩티드의 구조는 $Met^6NH$와 $Ala^4CO$, $Ala^4NH$와 $Met^6CO$, $Phe^3NH$와 $Met^6CO$의 사이에 분자내 수소결합이, Gln과 Trp에 type-I ${\beta}$-turn, 그리고 Leu에서 ${\gamma}$-turn을 취하고 있었다. 알려져 있는 고리상 펩티드인 cyclo-($Gln^1-Trp^2-Phe^3-Gly^4-Leu^5-Met^6$)의 Gly이 ${\beta}$Ala으로 바뀜에 따라 ${\beta}$Ala의 여분의 메틸렌이 고리의 골격의 반발력을 완화시키고 수소결합들이 형태의 안정에 기여하고 있다고 생각된다.
A series of 13- and 14-membered cyclic enkephalin analogs based on the moderately $\mu$ selective prototype compound Tyr-C[D-$A_2bu$-Gly-Phe-Leu] 8a were synthesized to investigate the structure-activity relationship. The modifications of sequence were mainly focused on two positions 3 and 5, critical for the selective recognition for $\mu$ and $\delta$ opioid receptors. The substitution of hydrophobic $Leu^5$ with hydrophilic $Asp^5$ derivatives led to Tyr-C[D-$A_2bu$-Gly-Phe-Asp(N-Me)] 7 and Tyr-C[D-Glu-Phe-gPhe-rAsp(O-Me)] 5, the peptides with a large affinity losses at both $\mu$ and $\delta$ receptors. The substitution of $Phe^3$ with $Gly^3$ led to Tyr-C[D-Glu-Gly-gPhe-rLeu] 3 and Tyr-C[D-Glu-Gly-gPhe-D-rLeu] 4, the peptides with large affinity losses at $\mu$ receptors, indicating the critical role of phenyl ring of $Phe^3$ for $\mu$ receptor affinities. One atom reduction of the ring size from 14-membered analogs Tyr-C[D-Glu-Phe-gPhe-(L and D)-rLeu] 6a, 6b to 13-membered analogs Tyr-C[D-Asp-Phe-gPhe-(L and D)-rLeu] 1, 2 reduced the affinity at both $\mu$ and $\delta$ receptors, but increased the potency in the nociceptive assay, indicating the ring constrain is attributed to high nociceptive potency of the analogs. For the influence of D- or L-chirality of $Leu^5$ on the receptor selectivity, regardless of chirality and ring size, all cyclic diastereomers displayed marked $\mu$ selectivity with low potencies at the $\delta$ receptor. The retro-inverso analogs display similar or more active at $\mu$ receptor, but less active at $\delta$ receptor than the parent analogs.
본 연구는 insulin-like growth factors(IGFs)가 돼지 지방전구세포의 증식과 분화에 미치는 작용기전을 구명하기 위해서 수행하였다. 지방전구세포는 갓난 암퇘지의 등지방에서 분리하였고, serum-deprived 조건하에서 IGFs와 mutant IGFs를 함유시켜 배양했는데 이 mutant IGFs는 IGF-Ⅰ에 비해 type-1 IGF receptor와 insulin receptor에 대한 친화력이 낮다. 50ng/ml의 IGF-Ⅰ, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ 및 [Leu27]IGF-Ⅱ를 배양중인 세포에 4일동안 처리했다. IGF-Ⅰ, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ 및 [Leu27]IGF-Ⅱ는 돼지 지방전구세포의 증식을 각각 39%, 8%, 25% 및 2% 촉진했다(증가된 세포수에 의해 측정). 이 사실은 IGF-Ⅰ과 IGF-Ⅱ는 type-1 IGF receptor 또는 insulin receptor에 결합을 통해서 지방세포의 증식 촉진을 가져왔음을 나타낸다. 그리고 IGF-Ⅰ, [Leu60]IGF-I, IGF-Ⅱ 및 [Leu27] IGF-Ⅱ는 지방전구세포의 분화를 50%, 17%, 37% 및 30% 각각 촉진시켰다(세포 분화는 glycerol- phosphate dehydrogenase 활성도에 의해 측정했다). IGF-Ⅰ의 type-1 IGF receptor 또는 insulin receptor에의 친화력이 낮아져서 세포 분화 촉진작용을 감소시킨 것이다. 그러나 [Leu27] IGF-Ⅱ의 분화촉진 작용은 IGF-Ⅱ의 그것에 비해 크게 차이가 나지 않았는데, 이 사실은 IGF-Ⅰ과 IGF-Ⅱ는 서로 다른 수용체-매개 작용기전에 의해 세포분화를 촉진시킴을 나타낸다. 즉 IGF-Ⅱ는 type-1 IGF receptor 또는 insulin receptor가 관여하지 않는 작용을 통해 돼지 지방전구세포의 분화를 촉진시켰다. 이 작용은 IGF-Ⅱ가 type-2 IGF receptor(또는 cation- independent mannose-6 phosphate receptor [CIM6P /IGF2 receptor])에 결합을 통해서 이뤄지는 것으로 여겨진다. 위의 결과는 IGF-Ⅱ가 CIM6P/ IGF2 receptor에의 결합을 통해 동물 지방전구세포의 분화를 촉진시킨다는 것을 밝혀낸 최초의 연구이다. 요약하면 이 본 연구는 IGF-Ⅰ과 IGF-Ⅱ는 서로 다른 세포내 receptor가 관여하는 작용기전을 통해 돼지 지방전구세포의 분화를 촉진함을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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