• 제목/요약/키워드: L6 cell

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Cross-flow filtration에 의한 Bifidobacterium longum의 고농도 배양 (High Cell Density Culture of Bifidobacterium longum by Cross-flow Filtration)

  • 이명석;박연희
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제40권1호
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    • pp.18-22
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    • 1997
  • Bifidobacterium longum을 고농도 배양하기 위하여 최적 생육 조건을 조사하고 cross-flow filtration으로 생육 저해 대사산물인 lactic acid와 acetic acid를 제거하면서 균체 순환 배양을 사용하였다. 회분 배양에서는 탄소원으로 glucose를 50 g/l 농도로 사용하고 초기 pH 6.5인 경우 생육이 가장 높았다. B. longum을 cross-flow filtration으로 12시간 배양한 결과, 희석속도 $0.31h^{-1}$에서 최대 균체농도에 도달하여 16.4g/l의 건조균체량을 얻었으며 이로써 회분 배양시 보다 약 4배 높은 균체를 생산하였다.

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관상동맥우회술 환자에서 술 전 백혈구 수치가 수술 후 경과에 미치는 영향 (Effect of Preoperative White Blood Cell Count on Postoperative Course in Patients with Coronary Artery Bypass Grafting)

  • 손국희;김재호;김정택;윤용한;김광호;백완기
    • Journal of Chest Surgery
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    • 제38권10호
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    • pp.669-674
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    • 2005
  • 배경: 동맥경화가 일종의 염증성 반응에 의해 매개된다는 이론을 바탕으로 여러 연구에서 백혈구 수치의 증가가 심혈관 질환에 의한 사망에 영향을 준다는 결과가 보고되고 있다. 같은 맥락에서 관상동맥우회술 시에도 수술 전 백혈구 수치가 수술 후 사망의 독립예측변수라는 보고들이 있다. 저자들은 본 연구를 통해 관상동맥우회술시 수술 전 백혈구 수치가 수술 후 사망 및 합병증 발생에 있어 과연 어떤 영향을 미치는가를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법 : 1996년부터 2003년까지 인하대병원 흉부외과에서 단독 관상동맥우회술(isolated coronary artery bypass grafting)을 시행한 환자 133명을 대상으로 의무 기록의 후향적 분석을 시행하였다. 수술 전 백혈구 수에 따라 환자들을 오름차순으로 배열한 후 균등하게 A, B, C, D군의 네 군으로 나누었을 때 수술 전 백혈구 수치의 범위는 A군은 $1.3\times10^3/{\mu}L$에서 $5.9\times10^3/{\mu}L$까지, B군은 $6.0\times10^3/{\mu}L$에서 $7.0\times10^3/{\mu}L$까지 C군은 $7.1\times10^3/{\mu}L$에서 $8.9\times10^3/{\mu}L$까지 D군은 $8.9\times10^3/{\mu}L$에서 $16.9\times10^3/{\mu}L$까지로 환자 수는 A군만 34명을 포함시켰으며 나머지 군은 모두 33명으로 동일하였다. 결과: 수술 전 심근경색이 선행된 환자 수는 A군에서는 0명, B군 2명$(6.1\%)$, C군 4명$(12.1\%)$, D군 8명$(24.3\%)$으로 백혈구 수가 높은 군일수록 심근경색이 선행된 환자 수가 많음이 입증되었다(p<0.01). 수술 후 사망 예는 모두 6예로, A군 1명$(2.9\%)$, B군 1명$(3.0\%)$, C군 2명$(6.1\%)$, D군 2명$(6.1\%)$으로 각 군에 따른 유의한 차이는 보이지 아니하였다(p=0.44). 수술 후 창상 감염은 3명의 환자에서 발생하였는데 3명 모두 D군에서 발생하였다. 결론: 관상동맥우회술 환자에서 수술 전 백혈구 수치와 술 후 사망간의 연관 관계는 찾을 수 없었다. 술 전 백혈구 수치가 높은 군에서 술 후 창상 감염의 빈도가 증가하였다.

Lactobacillus crispatus 생균 생산을 위한 whey 배지 최적화 (Production of Viable Lactobacillus crispatus by Using Whey Based Medium)

  • 장정은;구자룡;소재성;윤현식
    • KSBB Journal
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    • 제26권6호
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    • pp.529-532
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    • 2011
  • Whey based medium was optimized for the production of viable Lactobacillus crispatus KLB 46 isolated from the vagina of Korean women. Among the various nitrogen sources such as yeast extract, beef extract, and proteose peptone no. 3 supplemented to whey, beef extract showed the highest viable cell production. The addition of Tween 80 to the whey based medium increased viable cell concentration. As beef extract supplementation is not economically attractive, corn steep liquor was added as a supplementary nitrogen sources. When corn steep liquor was supplied with beef extract with the ratio 5 : 1, the viable cell count was $3.11{\times}10^9$ CFU/mL. Also, the addition of mineral salts containing sodium acetate (5 g/L), potassium phosphate dibasic (2 g/L), magnesium sulfate (0.1 g/L) and manganese sulfate (0.05 g/L) to the whey medium increased viable cell count further ($5.00{\times}10^9$ CFU/mL).

족제비싸리 부위별 추출물의 항암 및 면역활성 (Anticancer and Immune Activities of the Extracts from Amorpha fruticosa L.)

  • 김정화;김대호;유진현;권민철;이현정;이학주;이현용
    • 한국약용작물학회지
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    • 제13권1호
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    • pp.41-47
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    • 2005
  • 족제비싸리의 각 부위별 추출물의 정상세포에 대한 독성을 살펴보기 위하여 인간 정장 폐세포인 HEL299를 이용하였으며 각 추출물은 1.0 g/l의 농도에서 최고 22.2%의 세포독성을 나타내었다. 또한 항암활성효과를 살펴보기 위하여 2가지의 암세포를 이용하였는데, A549와 AGS에서 뿌리 추출물의 경우 1.0 g/l의 농도에서 70%정도의 높은 억제활성을 나타내었고, 또한 암세포의 생육활성에 대한 정상 세포의 세포독성의 비로 나타낸 선택적 사멸도는 고농도에서는 모두 1.5이상으로 나타나 모두 암세포에 대한 선택성이 있는 것으로 나타났다. 면역세포의 생육 촉진 실험을 위하적 인간의 B cell과 T cell을 이용하였으며 각 추출물의 농도를 $0.5 g/l로 하여 실험을 실시하였다. 생육도는 T cell의 경우 배양 6일째 수피 추출물이 $7.5{\times}10^4\;cells/ml$의 세포농도를 나타냈으며 B cell의 경우 배양 5일째 $4.5{\times}10^4\; cells/ml$의 농도를 나타내었다. 면역세포를 이용한 cytokine의 분비량 측정실험에서는 뿌리의 추출물이 배양시간에 따른 cytokine의 분비가 가장 높게 나타나는 것을 확인 할 수 있었다. 각 세포의 $TNF-{\alpha}$의 분비량은 6일째 최고의 분비량을 나타내었고 뿌리추출물의 경우 대조구에 비해 $7{\sim}8$배 가량 정도 더 높은 분비량을 나타낸 것으로 확인되었다. IL-6의 경우 5일째까지 감소하다가 6일째부터 증가하는 경향을 나타내었는데 잎과 열매에서 가장 높은 분비량을 나타내었다. 또한 족제비싸리 추출물을 첨가한 배지에 의한 B cell과 T cell의 면역활성 및 cytokine의 분비량에 따른 NK cell의 면역 활성을 측정하였으며 모든 추출물에서 배양 시간에 따라 유의적으로 증가하는 것을 확인하였다. 그 중 족제비싸리의 수피 추출물에서 B cell의 경우 $14.2{\times}10^4\;cells/ml$, T cell의 경우 $14.2{\times}10^4\;cells/ml$으로 가장 높은 생육 활성을 나타내었다.

Alcaligenes eutrophus A52의 무세포 추출액에 의한 D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam으로부터 L-Lysine으로의 전환 (Conversion of D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam into L-Lysine Using Cell-free Extracts of Alcaligenes eutrophus A52)

  • 박희동;최선택;이인구
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제15권6호
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    • pp.375-380
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    • 1987
  • Alcaligenes eutrophus A52의 무세포 추출액으로부터 유안염석 및 DEAE-cellulose 이온교환 크로마토그래피로서 D-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam(DAC) racemase 와 L-$\alpha$-Amino-$\varepsilon$-Caprolactam(LAC) hydrolase를 분획하였다. A. eutrophus A52에 의한 DAC로부터 L-lysine으로의 전환은 DAC가 racemase에 의해 LAC로 전환된 후 hydrolase에 의해 L-lysine으로 가수분해됨을 확인하였다. DEAE-cellulose 이온교환 크로마토그래피에 의해 분리된 racemase의 분획은 최적온도가 55$^{\circ}C$, 최적 pH는 8.0이었으며 hydrolase의 분획은 최적온도가 $65^{\circ}C$ 최적 pH가 9.0이었다. 이 두 효소를 모두 함유하는 무세포 추출 액에 의한 DAC로부터 L-lysine으로의 전환은 6$0^{\circ}C$와 pH8.5에서 최대를 나타내었고 2% 이상의 DAC와 L-lysine에 의해 상당한 저해를 받았으나 0.5% DAC를 3.1mg의 단백질에 상당하는 무세포 추출액으로서 전환시킨 결과 55$^{\circ}C$에서 10시간 동안에 약 98%가 L-lysine으로 전환되었다.

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Effect of Donganme (Sorghum bicolor L. Moench) against oxidative stress in vitro and in a cellular system in glial cells

  • Choi, Ji Myung;Kim, Yeo Jin;Lee, Ah Young;Cho, Eun Ju
    • 농업과학연구
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    • 제47권3호
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    • pp.497-508
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    • 2020
  • In this study, we investigated the protective effects of 'Donganme' (Sorghum bicolor L. Moench) against oxidative stress under in vitro conditions and in a cellular system using C6 glial cells. The radical scavenging activities were observed using the substrates 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl (•OH) radicals. The Donganme extract had an •OH radical scavenging activity of 82.66% at a concentration of 100 ㎍·mL-1. Additionally, when DPPH was used as the substrate, the Donganme extract exhibited a strong radical scavenging activity in a concentration-dependent manner with an IC50 value of 28.56 ㎍·mL-1. Furthermore, treating C6 glial cells with hydrogen peroxide (H2O2) reduced the cell viability and generated reactive of oxygen species (ROS) and lactate dehydrogenase (LDH) compared to the normal levels, indicating that H2O2 induced oxidative stress. However, Donganme extracts increased the cell viability and inhibited ROS and LDH production against oxidative stress by H2O2 in the C6 glial cells. In particular, it showed effective cell protection with the cell viability, ROS production, and LDH release at 83.50, 88.06, and 14.87%, respectively, which were lower than the control or similar to the normal levels even at a low concentration of 100 ㎍·mL-1. The present study suggests that the Donganme extract was effective in protecting against oxidative stress in C6 glial cells through its antioxidant activity. Thus, Donganme could be a promising therapeutic agent for neurodegenerative diseases due to oxidative stress.

계기복령환이 수종(數種)의 암세포주(癌細胞柱) 및 면역기능(免疫機能)에 미치는 영향(影響) (The effect of KaegiBokryengHwan on sereval cancer cell lines and immuno-function)

  • 강성도;진천식;정현우
    • 대한한의학방제학회지
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    • 제7권1호
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    • pp.107-120
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    • 1999
  • The purpose of this Study was to investigate effects of KaegiBokryengHwan(KBH) on anti-tumor, immunocytes and nitric oxide(NO). This Study estimated the proliferation of L1210 cell lines, HeLa cell lines, SK-OV3 cell lines, MCF-7 cell lines, balb/c mouse 3T3 cell lines, mouse thymocytes and mouse splenocytes and NO production from peritoneal macrophages in vitro. and estimated the proliferation of L1210 cells, mouse thymocytes and splenocytes and NO production from peritoneal macrophages and body weight in L1210 cells-transplanted mice in vivo. The result were obtained as follow ; 1. KBH inhibited significantly SK-OV3 cell lines in vitro. 2. KBH was accelerate significantly the proliferation of balb/c mouse thymocytes in vitro. 3. KBH increased significantly NO production from peritoneal macrophages in vitro. 4. KBH didn't effect the cytotoxicity of L1210 cells in L1210 cells-transplanted mice. 5. KBH was accelerate the proliferation of splenocytes in L1210 cells-transplanted mice. 6. KBH increased NO production from peritoneal macrophages in L1210 cells-transplanted mice. 7. KBH increased the body weight as comparing with control group in L1210 cells-transplanted mice.

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In Vitro Antitumor Properties of an Isolate from Leaves of Cassia alata L

  • Olarte, Elizabeth Iglesias;Herrera, Annabelle Aliga;Villasenor, Irene Manese;Jacinto, Sonia Donaldo
    • Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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    • 제14권5호
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    • pp.3191-3196
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    • 2013
  • Leaf extracts of Cassia alata L (akapulko), traditionally used for treatment of a variety of diseases, were evaluated for their potential antitumor properties in vitro. MTT assays were used to examine the cytotoxic effects of crude extracts on five human cancer cell lines, namely MCF-7, derived from a breast carcinoma, SK-BR-3, another breast carcinoma, T24 a bladder carcinoma, Col 2, a colorectal carcinoma, and A549, a nonsmall cell lung adenocarcinoma. Hexane extracts showed remarkable cytotoxicity against MCF-7, T24, and Col 2 in a dose-dependent manner. This observation was confirmed by morphological investigation using light microscopy. Further bioassay-directed fractionation of the cytotoxic extract led to the isolation of a TLC-pure isolate labeled as f6l. Isolate f6l was further evaluated using MTT assay and morphological and biochemical investigations, which likewise showed selectivity to MCF-7, T24, and Col 2 cells with $IC_{50}$ values of 16, 17, and 17 ${\mu}g/ml$, respectively. Isolate f6l, however, showed no cytotoxicity towards the non-cancer Chinese hamster ovarian cell line (CHO-AA8). Cytochemical investigation using DAPI staining and biochemical investigation using terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL)-a method used to detect DNA fragmentation-together with caspase assay, demonstrated apoptotic cell death. Spectral characterization of isolate f6l revealed that it contained polyunsaturated fatty acid esters. Considering the cytotoxicity profile and its mode of action, f6l might represent a new promising compound with potential for development as an anticancer drug with low or no toxicity to non-cancer cells used in this study.

탱크 교반형 생물반응기의 scale-up이 Eschscholtzia californica 세포생장 및 알칼로이드 생성에 미치는 영향 (Effects of Stireed Tank Bioreactor Scale-up on Cell Growth and Alkaloids Production in Cell Cultures of Eschscholtzia californica)

  • 유병삼;변상요
    • KSBB Journal
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    • 제13권6호
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    • pp.700-705
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    • 1998
  • Studies were made to investigate effects of the scale-up of stirred tank bioreactors on cell growth and alkaloids production for suspension cultures of Eschscholtzia californica. In the 1.5 L STR, cell lysis was observed at 110 rpm or higher agitation speed. The agitation speed of 30 L STR was 43.7 rpm to maintain the same shear stress developed in 1.5 L STR of 100 rpm. As a result of scale-up from 1.5 L to 30 L STR, the specific growth rate was decreased from 0.12 to 0.07 day-1. The alkaloids productivity was also decreased from 0.24 to 0.14 mg/L-day. Changes of mixing performance and oxygen transfer were studied to explain the decrease of cell growth and alkaloids production. Decreased oxygen transfer rate coefficient(KLa) and increased mixing time by the scale-up was observed at various aeration rates.

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Alcaligenes sp. GB-77 에 의한 Polyhydroxyalkanoic Acid의 생산 (Polyhydroxyalkanoic Acid Production by Alcaligenes sp. GB-77)

  • 김근배;손홍주;이상준
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.220-228
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    • 1995
  • For polyhydroxyalkanoic acid (PHA) production, several microorganisms were isolated from sewage sludge. One of them, GB-77 strain, was chosen from its PHB/HV copolymer production on only fructose without cosubstrate. The isolated strain GB-77 was identified as the genus Alcaligenes. Optimal temperature and pH for cell growth were 36C and 6.8. Optimal medium composition was 10 g/l of fructose and 5 g/l of polypeptone, 1 $\times$ 10$^{-2}$M Na$^{2}$HP0$^{4}$, 1.3 $\times$ 10$^{-2}$M KH$^{2}$PO$^{4}$. To investigate the optimal condition for polyhydroxyalkanoic acid production two-stage culture technique was used; first stage for cell growth and second stage for PHA production on unbalanced growth conditions. Optimal conditions for high PHA production were C/N ratio 50, temperature 36$\circ$C and pH 6.8. To overcome fructose inhibition on cell growth, intermittent feeding fed-batch culture technique was used. Total cell concentration was 17.4 g/l with 9.1 g/l of PHA. The purified PHA was identified PHB/HV copolymer by NMR analysis.

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