The effect of initial cell concentration on the characteristics of ethanol fermentation was investigated in the batch fermentation of Saccharomyces cerevisiae ATCC 24858. The characteristics were investigated in the range of 60 to 230 g/l of the initial sugar concentrations and 0.5 to 85 g/l of the initial cell concentrations. When the initial cell concentrations were 27 g/l for 60 g/l of the initial sugar and 85 g/l for 230 g/l, the fermentation time required for the complete consumption of the initial sugar was one hour, respectively. The ethanol productivity increased with the initial cell concentration so that, in the case of 100 g/l of initial sugar, the productivity rose up to 55 g/l/hr at 55 g/l of the initial cell concentration. The specific growth rate decreased according to the increase in the initial biomass concentration and finally became zero at around 25 g/l of the cell concentration regardless of the initial sugar concentration. The specific ethanol production rate was constant as 1.02 g/l/hr up to 150 g/l of the initial sugar. However, the rates decreased sharply with the augmentation of concentration of the initial sugar above 160 g/l. The overall ethanol yield represented a constant value, 0.475 g/g irrespective of the initial cell and sugar concentrations. The overall biomass yietd showed a trend to diminish in values with the biomass and ultimately to reach zero more than 25 g/l of the initial cell concentration.
Effects of feeding seven strains of Lactobacillus spp. on the level of cell glutathione sulphydryl (GSH) in spleen, liver and erythrocyte of the ICR mice and on the level of immunoglobulin M in the spleen were determined. The level of cell glutathione sulphydryl in the spleen was dependent on the strain of Lactobacilli, it was significantly higher in the mice fed with L. casei CU 001, L. rhamnosus CU 02, L. acidophilus NCFM and L. casei YIT9018 (p>0.05). The level of cell glutathione sulphydryl in the liver increased in the mice fed with L. casei YIT9018, L. acidophilus NCFM, L. casei CU 001 (p>0.05), the level of glutathione sulphydryl of the erythrocyte showed significantly higher value than control mice when fed with L. acidophilus NCFM, L. casei YIT9018, L. casei CU 001 (p>0.05). The level of immunoglobulin M in the spleen of ICR mice expressed as the plaque count revealed significantly higher value than the control mice when fed with L. casei CU 001, L. acidophilus NCFM and L.casei YIT 9018.
Butanol-resistant bacteria were isolated from butanol solvent. The cell growth of isolated strains declined with increasing concentrations of butanol, and isolated strain BRS02 displayed more resistance to 12.5 g/L of butanol than other isolated strains. In addition, strain BRS251, which was resistant to even higher concentrations of butanol, was developed by the mutation of BRS02 using UV. BRS251 could grow in LB medium containing up to 17.5 g/L of butanol, 32.5 g/L of propanol, or 6 g/L of pentanol, whereas the control strain Escherichia coli was found to be tolerant to 7.5 g/L of butanol, 20 g/L of propanol, or 2 g/L of pentanol. The isolated BRS02, a Gram(+) bacterium seen to have a cocci form under the microscope, grew in 6.5% NaCl. According to biochemical tests, BRS02 can metabolize and produce acid with D-galactose, D-maltose, D-mannitol, D-mannose, methyl-${\beta}$-Dglucopyranoside, D-ribose, sucrose, or D-trehalose, as carbon sources. Also, this strain showed resistance to bacitracin, vibriostatic agent O/129, and optochin, alongside positive activities for arginine dihydrolase, ${\alpha}$-glucosidase, and urease. The BRS02 strain was identified as Staphylococcus sp. by analyses of the 16S rRNA gene, phylogenetic tree, and biochemical tests.
Objective : Recently, regenerative therapies have been used in clinical trials (heart, cartilage, skeletal). We don't make use of these treatments to spinal cord injury (SCI) patients yet, but regenerative therapies are rising interest in recent study about SCI. Neural precursor/stem cell (NPSC) proliferation is a significant event in functional recovery of the central nervous system (CNS). However, brain NPSCs and spinal cord NPSCs (SC-NPSCs) have many differences including gene expression and proliferation. The purpose of this study was to investigate the influence of neural growth factor (NGF) on the proliferation of SC-NPSCs. Methods : NPSCs ($2{\times}10^4$) were suspended in $100{\mu}L$ of neurobasal medium containing NGF-7S (Sigma-Aldrich) and cultured in a 96-well plate for 12 days. NPSC proliferation was analyzed five times for either concentration of NGF (0.02 and 2 ng/mL). Sixteen rats after SCI were randomly allocated into two groups. In group 1 (SCI-vehicle group, n=8), animals received 1.0 mL of the saline vehicle solution. In group 2 (SCI-NGF group, n=8), the animals received single doses of NGF (Sigma-Aldrich). A dose of 0.02 ng/mL of NGF or normal saline as a vehicle control was intra-thecally injected daily at 24 hour intervals for 7 days. For Immunohistochemistry analysis, rats were sacrificed after one week and the spinal cords were obtained. Results : The elevation of cell proliferation with 0.02 ng/mL NGF was significant (p<0.05) but was not significant for 2 ng/mL NGF. The optical density was increased in the NGF 0.02 ng/mL group compared to the control group and NGF 2 ng/mL groups. The density of nestin in the SCI-NGF group was significantly increased over the SCI-vehicle group (p<0.05). High power microscopy revealed that the density of nestin in the SCI-NGF group was significantly increased over the SCI-vehicle group. Conclusion : SC-NPSC proliferation is an important pathway in the functional recovery of SCI. NGF enhances SC-NPSC proliferation in vitro and in vivo. NGF may be a useful option for treatment of SCI patients pending further studies to verify the clinical applicability.
Agromonia pilosa L. has been used as a medicinal plant in traditional folk remedy, and it shows increasing tendency at various sections such as medicine-making material, functional food, and agricultural chemicals using plant or extract. Dosage effect of extract from Agrimonia pilosa L. plant on rat performance experiments were summarized as follows : Body weight was increased with 0.02% dosage treated-rat by 5% as compared to non-treated one, however, decreasing tendency was observed with 0.04% extract of Agrimonia pilosa L. plant fed rat to control Considering feed efficiency was similar result between extract dosage with 0.02% and non-treated rat. The number of leucocyte was increased by dosage-treated level except 0.02% dosage-treated rat. Number of erythrocyte was increased with 0.06% extract dosage-treated rat by 20% as compared to non-treated one.
Callus cultures of Azadirachta indica flower petals were established on MS medium supplemented with naphthalene acetic acid (1 mg/L), kinetin (0.5 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$. Cell cultures of Azadirachta indica were established and studied the growth and production kinetics. Half 85 medium supplemented with dicamba (2 mg/L), kinetin (1 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$ was found to be suitable for initiation and maintenance of cell cultures from the calli. MS medium supplemented with naphthalene acetic acid (NAA) (1 mg/L), kinetin (0.5 mg/L) and sucrose $(3\%\;w/v)$ was found to be suitable as production medium. Around $80\%\;(0.05\%\;w/v)$ of azadirachtin was found to be intracellular. The effect of various precursors, elicitors, permeabilizing agents and growth retardants in cell cultures was studied. The addition of precursors sodium acetate (10 mg/L), squalene (10 mg/L), isopentenyl pyrophosphate (1 mg/L) and geranyl pyrophosphate (1 mg/L) to the cell cultures on day 3 has shown significant increase in bioproduction of azadirachtin $(64.94{\pm}4.40\;mg/L,\;72.81{\pm}0.04\;mg/L,\;51.63{\pm}1.26\;mg/L\;and\;30.70{\pm}0.28\;mg/L\;respectively)$ over the control cultures $(4.70{\pm}0.27 mg/L)$. $5\%$ v/v cell extracts of Fusarium solani has shown moderate increase in the content of azadirachtin $(5.71{\pm}0.34\;mg/L)$ when compared to control cultures $(2.40{\pm}0.56\;mg/L)$. The addition of methyl jasmonate $(500\;{\mu}M/L)$ on day 3 has shown $\~4$ fold improvement in bioproduction of azadirachtln $(6.92{\pm}0.11\;mg/L)$ when compared to control cultures $(1.63{\pm}0.02\;mg/L)$. There was no significant effect of the studied growth retardants and permeabilizing agents on bioproduction of azadirachtin. Cells are cultivated in large volumes using the effective precursors.
A study on the citric acid production was performed in various size dual hollow fiber bioreactors with immobilized Aspergillus niger (KCTC 1232). The final dry cell mass density reached 300g/l based on the space volume available for cell growth. Under air and oxygen aeration the volumethe productivity reached 0.63 and 1.02g/l.h, which cormsponded to 10 and 16 fold over those of batch fermentation, respectively. The initial pH of the medium was a critical factor and the lower value resulted in higher citric acid yield. The increase in the feeding rate of medium or the number of reactor unit resulted in the improvement of the productivity due to higher consumption rate of substrate.
In this study, the protective effects of EGCG on L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA)-induced oxidative cell death in catecholaminergic PC12 cells, the in vitro model of Parkinson's disease, were investigated. Treatment with L-DOPA at concentrations higher than $150{\mu}M$ caused cytotoxicity in PC12 cells, as determined using the 3-(4,5-dimetylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay and flow cytometry detection. The apoptotic ratio was similar in cells treated with $100{\mu}M$ EGCG plus $150{\mu}M$ L-DOPA (5.02%) and the control (0.96%) (P > 0.05), and was lower than that of cells treated with L-DOPA only (32.24%, P < 0.05). The generation level of ROS (% of control) in cells treated with EGCG plus L-DOPA was lower than that in cells treated with L-DOPA only (123.90% vs 272.32%, P < 0.05). The optical density in production of TBARS in cells treated with L-DOPA only was higher than that in the control ($0.27{\pm}0.05$ vs $0.08{\pm}0.04$, P < 0.05), and in cells treated with EGCG only ($0.14{\pm}0.02$, P < 0.05), and EGCG plus L-DOPA ($0.13{\pm}0.02$, P < 0.05). The intracellular level of GSH in cells treated with EGCG plus L-DOPA was higher than that in cells treated with L-DOPA only ($233.25{\pm}16.44$ vs $119.23{\pm}10.25$, P < 0.05). These results suggest that EGCG protects against L-DOPA-induced oxidative apoptosis in PC12 cells, and might be a potent neuroprotective agent.
Gu, Li-li;Shen, Zhe-lun;Li, Yang-Lei;Bao, Yi-Qi;Lu, Hong
Molecules and Cells
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v.41
no.5
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pp.401-412
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2018
Oxymatrine (OMT) often used in treatment for chronic hepatitis B virus infection in clinic. However, OMT-induced liver injury has been reported. In this study, we aim to investigate the possible mechanism of OMT-induced hepatotoxicity in human normal liver cells (L02). Exposed cells to OMT, the cell viability was decreased and apoptosis rate increased, the intracellular markers of oxidative stress were changed. Simultaneously, OMT altered apoptotic related proteins levels, including Bcl-2, Bax and pro-caspase-8/-9/-3. In addition, OMT enhanced the protein levels of endoplasmic reticulum (ER) stress makers (GRP78/Bip, CHOP, and cleaved-Caspase-4) and phosphorylation of c-Jun N-terminal kinase (p-JNK), as well as the mRNA levels of GRP78/Bip, CHOP, caspase-4, and ER stress sensors (IREI, ATF6, and PERK). Pre-treatment with Z-VAD-fmk, JNK inhibitor SP600125 and N-acetyl-l-cysteine (NAC), a ROS scavenger, partly improved the survival rates and restored OMT-induced cellular damage, and reduced caspase-3 cleavage. SP600125 or NAC reduced OMT-induced p-JNK and NAC significantly lowered caspase-4. Furthermore, 4-PBA, the ER stress inhibitor, weakened inhibitory effect of OMT on cells, on the contrary, TM worsen. 4-PBA also reduced the levels of p-JNK and cleaved-caspase-3 proteins. Therefore, OMT-induced injury in L02 cells was related to ROS mediated p-JNK and ER stress induction. Antioxidant, by inhibition of p-JNK or ER stress, may be a feasible method to alleviate OMT-induced liver injury.
Khademvatan, Shahram;Gharavi, Mohammad Javad;Rahim, Fakher;Saki, Jasem
Parasites, Hosts and Diseases
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v.49
no.1
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pp.17-23
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2011
The aim of this study was to assess the cytotoxic effects of various concentrations of miltefosine on Leishmania major (MRHO/IR/75/ER) and L. tropica (MHOM/IR/02/Mash10) promastigotes and to observe the programmed cell death features. The colorimetric MTT assay was used to find L. major and L. tropica viability and the obtained results were expressed as 50% inhibitory concentration (IC50). Also, 50% effective doses (ED50) for L. major and L. tropica amastigotes were also determined, Annexin-V FLUOS staining was performed to study the cell death properties of miltefosine using FAGS analysis. Qualitative analysis of the total genomic DNA fragmentation was performed by agarose gel electrophoresis. Furthermore, to observe changes in cell morphology, promastigotes were examined using light microscopy. In both strains of L. major and L. tropica, miltefosine induced dose-dependent death with features of apoptosis, including cell shrinkage, DNA laddering, and externalization of phosphatidylserine. The IC50 was achieved at 22 ${\mu}M$ and 11 ${\mu}M$ for L. major and L. tropica after 48 hr of incubation, respectively. ED50 of L. major and L. tropica amastigotes were 5.7 ${\mu}M$ and 4.2 ${\mu}M$, respectively. Our results indicate that miltefosine induces apoptosis of the causative agent of cutaneous leishmaniasis in a dose-dependent manner. Interestingly, L. major did not display any apoptotic changes when it was exposed to miltefosine in concentrations sufficient to kill L. tropica.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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