Listeria spp. were isolated from the samples submitted from various seafood plants such as raw materials, products, swab samples of plants floor and conveyor belts through the whole processing procedures. All the samples were collected from 3 kinds of seafood plants such as a imitation crab meat plant, jeotgal plant and frozen seafood plant. And also serotypes of the identified L. monocytogenes were determined. Among the 301 strains of isolated Llsteria spp., 96 strains, 179 strains and 26 strains were identified as L. monocytogenes, L. innocua and L. welshimeri, respectively. While among the 145 strains of Listeria spp. isolated from the imitation crab meat plant, $74\;(51.0\%)$ strains, $64\;(44.1\%)$ strains and $7\;(4.8\%)$ strains were identified as L. monocytogenes, L. innocua and L. welshimeri, respectively. In the case of the 126 strains of Listeria spp. isolated from the frozen seafood plant, $22\;(17.5\%)$ strains of L. monocytogenes,$93\;(73.8\%)$ strains of L. innocua, and $11\;(8.5\%)$ strains of L. wdshimeri were detected. Among the 30 strains isolated from a jeotgal plant, $22\;(73.3\%)$ strains of L. innocua and $8\;(26.7\%)$ strains of L. welshimeri were detected. The detection rates of L. monocytogenes, one of the very important food poisoning bacteria especially in frozen and/or refrigerated seafoods, were relatively high as $77.1\%$ (74/96 strains) in a imitation crab meat plant and $22.9\%$ (22/96 strains) in a frozen seafood plant, but not detected from jeotgal plant. Distribution of L. monocytogenes serotypes and characterization were examined. The serotypes of 96 L. monocytogenes isolated from pork skin, pork fat, the floor and conveyor belts were 1/2a $(59.4\%)$, l/2b $(6.2\%)$, 1/2c $(12.5\%)$ and unknown serotypes $(21.9\%)$. Unknown serotypes were divided into three specific groups by the O antigen they have.
Molecular subtyping of Listeria monocytogenes, including type strains and isolates from Korean foods, were performed using random amplification of polymorphic DNA (RAPD). Each Listeria species showed specific RAPD band patterns, and L. monocytogenes serotypes and isolates were divided into two clusters. RAPD results showed that L. monocytogenes isolates from Korean foods were divided into two groups. Group I contained L. monocytogenes serotypes 1/2b and 4b, whereas Group II contained serotypes 1/2a and 1/2c. These results suggested RAPD as possible subtyping methods for Listeria species. Also, RAPD Results showed significant correlation between molecular subtyping and serotyping of L. monocytogenes, and classified two different groups of L. monocytogenes isolated from Korean foods.
Listeria monocytogenes is a highly pathogenic gram-positive bacterium that is easily isolated from cheese, meat, processed meat products, and smoked salmon. A zero-tolerance (n=5, c=0, m=0/25 g) criteria has been applied for L. monocytogenes in cheese meaning that L. monocytogenes must not be detected in any 25 g of samples. However, there was a lack of scientific information behind this criteria. Therefore, in this study, we conducted a risk assessment based on literature reviews to provide scientific information supporting the baseline and to raise public awareness of L. monocytogenes foodborne illness. Quantitative risk assessment of L. monocytogenes for cheese was conducted using the following steps: exposure assessment, hazard characterization, and risk characterization. As a result, the initial contamination level of L. monocytogenes was -4.0 Log CFU/g in cheese. The consumption frequency of cheese was 11.8%, and the appropriate probability distribution for amount of cheese consumed was a Lognormal distribution with an average of 32.5 g. In conclusion, the mean of probabilities of foodborne illness caused by the consumption of cheese was 5.09×10-7 in the healthy population and 4.32×10-6 in the susceptible population. Consumption frequency has the biggest effect on the probability of foodborne illness, but storage and transportation times have also been found to affect the probability of foodborne illness; thus, management of the distribution environment should be considered important. Through this risk assessment, scientific data to support the criteria for L. monocytogenes in cheese could be obtained. In addition, we recommend that further risk assessment studies of L. monocytogenes in various foods be conducted in the future.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.29
no.6
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pp.1016-1024
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2000
The study was conducted to develop a rapid method for the detection of Listeria monocytogenes in foods via polymerase chain reaction (PCR) technique using hemolysin gene (hlyA) primers. Specificity and sensitivity of PCR, optimal conditions for PCR and application of hlyA gene primers for the detection of L. monocytogenes from milk and beef were investigeted. Each of the 20 L. monocytogenes strains gave a single 713 bp band, but other Listeria sup. and other bacteria did not show any bands. As few as 1 pg of L. monocytogenes DNA or 2.4$\times$10$^4$L. monocytogenes cells could be detected with hlyA gene primers. PCR product was most improved at 20~30 cycle in terms of removal of tailing and sensitivity. Also, the sensitivity was significantly improved by the further 10~15 cycle after 20 cycle PCR amplication. Milk (10 mL) and beef (10 g) samples were inoculated with L. monocytogenes at the concentrations ranging from 0 to 10$^{7}$ CFU/mL or g to determine the best sensitivity of PCR for the rapid detection of L. monocytogenes. PCR assay could detect 2 cells in milk with repeating PCR amplication and 2.6$\times$10$^2$cells in beef sample after 24 hr enrichment growth at 35$^{\circ}C$ in LEB.
Kim, Eun-Ah;Mang, So-Yeon;Seong, Jong-Hwan;Lee, Young-Guen;Kim, Han-Soo;Kim, Dong-Seob
Journal of Life Science
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v.22
no.5
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pp.692-696
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2012
$Listeria$$monocytogenes$, a fatal food-borne pathogenic bacteria, can form a biofilm on many different supports. The biofilm gives $L.$$monocytogenes$ more viability and resistance to disinfectants and sterilization procedures.$L.$$monocytogenes$ formed biofilms on various culture vessels tested in this experiment and showed the maximum amount of biofilm when it was cultured for 4 days at $30^{\circ}C$ in BHI broth. In this study, biofilm formation was stimulated or inhibited by addition of different Kimchi samples. That was not in accordance with the effect of Kimchi on the growth of $L.$$monocytogenes$.
Jang Sung-Sik;Choo Eui-Young;Han Ki-Seon;Miyamoto Takahisa;Heu Sung-Gi;Ryu Sang-Ryeol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.8
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pp.1276-1284
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2006
Listeria monocytogenes is a well-known high-risk foodborne pathogen that grows at refrigeration temperature and is responsible for outbreaks of listeriosis. We report here the incidence of L. monocytogenes in fresh chicken carcasses and present genetic diversity of L. monocytogenes isolates. In this study, 25 g of chicken carcasses from markets in Korea were examined according to the FDA method, and presumptive isolates were confirmed by multiplex PCR assay. L. monocytogenes isolates were analyzed by Pulsed-Field Gel Electrophoresis using restriction enzymes, ApaI and AscI, to obtain strain-specific DNA fragments profiles. Antimicrobial resistance of L. monocytogenes strains against generally used antibiotics (Penicillin G, Kanamycin, Tetracycline, Vancomycin, Cephalothin, Rifampicin, Erythromycin, Ampicillin, Gentamicin, Streptomycin, and Chloramphenicol) were analyzed by NCCLS protocols to examine the presence of antimicrobial resistance in natural L. monocytogenes. Of a total 274 chicken samples, 81 samples (29.6%) were positive for L. monocytogenes. Listeria innocua (50.1%), Listeria welshimeri (6.9%), and Listeria grayi (11.3%) were also detected. PFGE analysis, using restriction enzymes ApaI and AscI, showed 27 pulsotypes of L. monocytogenes. Antimicrobial resistance analysis confirmed the existence of antimicrobial resistance for penicillin G and tetracycline in isolated L. monocytogenes strains.
The inhibitory effect of Lactobacillus plantarum (Lb. plantarum) which is bacteriocinproducing strain against the growth of Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) was examined in trypticase soy broth (TSB). TSB was inoculated with 104 cells/me L. monocytogenes and then with different numbers $(10^6\;10^4\;and\;10^2\;cells/ml)$ of Lb. plantarum. The mixed cultures were incubated at 37, 25 and $4^{\circ}C$. The most effective inhibition of was found at $37^{\circ}C$ and a less inhibition at $25^{\circ}C$. However, there was no significant change in the cell numbers of both L. monocytogenes and Lb. plantarum at $4^{\circ}C$. At same incubation temperature, the higher initial inoculum level of Lb. plantarum, the better inhibitory effect against L. monocytogenes. In addition, TSB was inoculated with L. monocytogenes at different initial inoculum levels of $10^6,\;10^4$ and $10^2$ cells/me and then supplemented with 0, 30, 60 and 100 AU/ml of bacteriocin produced by Lb. plantarum. The mixed cultures were incubated at 37, 25 and $4^{\circ}C$. L. monocytogenes of three different initial inoculum levels began to be inhibited in the presence of more than 60 AU/ml of bacteriocin at $37^{\circ}C$. In TSB containing more than 60 AU/me of bacteriocin and incubated at $25^{\circ}C$, L. monocytogenes decreased by 2 log-units during the period of 12 hrs incubation and thereafter remained steady. At $4^{\circ}C$, L. monocytogenes decreased by 1.5 log-units in the presence of 60 AU/ml bacteriocin during the period of 4 days incubation and dropped to the non-detectable level in TSB with 100 AU/ml bacteriocin.
This study evaluated the effects of NaCl on heat resistance and Caco-2 cell invasion of Listeria monocytogenes in broth media and sausage. A 10-strain mixture of L. monocytogenes was inoculated in tryptic soy broth containing 0.6% yeast extract (TSBYE), and sausage formulated with 0, 2, 4, and 6% NaCl. The medium was stored at 7, 15, 20, and $25^{\circ}C$ for 3-16 d, and medium samples were withdrawn at the appropriate time and challenged to 55, 60, and $63^{\circ}C$ to evaluate the thermal resistance of the pathogen. Sausage samples were stored at 7 and $25^{\circ}C$, and they were exposed to $63^{\circ}C$ to evaluate thermal resistance. NaCl-habituated L. monocytogenes strains NCCP10811 and NCCP10943 were examined for 12 antibiotics and Caco-2 cell invasion assay (only L. monocytogenes NCCP10943). Bacterial populations of L. monocytogenes generally increased (p<0.05) during the heat challenge as NaCl concentrations increased in both TSBYE and sausage samples. The antibiotic resistance of L. monocytogenes was not observed ($p{\geq}0.05$) when it was exposed to a single concentration of NaCl in TSBYE, but the pathogen obtained resistance to some antibiotics when exposed to a sequential increase of NaCl concentration. Invasion efficiency of L. monocytogenes NCCP10943 was not increased ($p{\geq}0.05$) with NaCl concentration increase. These results indicate that NaCl may increase the resistance of L. monocytogenes to heat and to some antibiotics, but may not increase Caco-2 cell invasion of L. monocytogenes.
In recent years, biocontrol of foodborne pathogens has become a concern in the food industry, owing to safety issues. Listeria monocytogenes is one of the foodborne pathogens that causes listeriosis. The major concern in the control of L. monocytogenes is its viability as it can survive in a wide range of environments. The purpose of this study was to isolate lactic acid bacteria with antimicrobial activity, evaluate their applicability as a cheese starter, and evaluate their inhibitory effects on L. monocytogenes. Lactococcus lactis strain with antibacterial activity was isolated from raw milk. The isolated strain was a low acidifier, making it a suitable candidate as an adjunct starter culture. The commercial starter culture TCC-3 was used as a primary starter in this study. Fresh cheese was produced using TCC-3 and L. lactis CAU2013 at a laboratory scale. Growth of L. monocytogenes (5 Log CFU/g) in the cheese inoculated with it was monitored during the storage at 4℃ and 10℃ for 5 days. The count of L. monocytogenes was 1 Log unit lower in the cheese produced using the lactic acid bacteria strain compared to that in the cheese produced using the commercial starter. The use of bacteriocin-producing lactic acid bacteria as a starter culture efficiently inhibited the growth of L. monocytogenes. Therefore, L. lactis can be used as a protective adjunct starter culture for cheese production and can improve the safety of the product leading to an increase in its shelf-life.
Behavior of Listeria monocytogenes in Skim milk during fermentation by Lactobacillus bulgaricus YI-2 and Streptococcus lactis FYI-1 were determined. Autoclaved skim milk was inoculated with ca. 10$^{3}$ L. monocytogenes (Strain LM91-1 or LM 96-2) cells/ml, and with 5.0, 1.0, 0.5 or 0.1% of a milk culture of either L. bulgaricus TI-2 or S. lactis FYI-1. Skim milk containing ca. 10$^{3}$ L. monocytogenes was incubated at 37 or 42$\circ $C for 15 h with L. bulgaricus YI-2, and at 21 or 30$\circ $C for 15 h with S. lactis FYI-1. Cultured skim milks were stored at 4$\circ $C in the refrigerater. Samples were plated on Oxford Agar with oxford antimicrobic supplement to enumerate L. monocytogenes and on either modified MRS agar to enumerate lactic acid bacteria. L. monocytogenes survived the 15-h fermentation with S. lactis FYI-1 in all combinations of level of inoculum and temperature of incubation, but inhibition of growth ranged from 94 to 100%. When incubated with over the 1.0% of L. bulgaricus, L. monocytogenes inhibited or disappeared in fermented skim milk from 9 h after incubation. Especially, incubation at 42$\circ $C with 5.0% L. bulgaricus YI-2 as inoculum appeared to be the most effective inhibitory combination for strain LM 91-1, causing 100% inhibition in growth based on maximum papulation attained. In most instances of incubated with L. bulgaricus YI-2, growth of the pathogene appeared to be completely inhibited when the pH dropped below 4.38.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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