TR75, a rice (Oryza sativa L. var. Sasanishikj) mutant resistant to 5-methyltryptophan (5MT) was segregated from the progenies of its initial mutant line, TR1. The 5MT resistance of TR75 was inherited in the M$_{8}$ generations as a single dominant nuclear gene, and was also expressed in callus derived from seeds, roots, and anthers as well as in the seedlings. The callus induced from these organs could grow at 50 mg/1 of 5MT, whereas the growth of wild-type callus was completely inhibited even at 25 mg/1. The seedlings of TR75 did not show resistance to L-azetidine-2-carboxylic acid, S-2-aminoethyl-L-cysteine, p-fluoro-DL-phenylalanine. The content of free amino acids in the TR75 homozygous seeds increased approximately 1.5 to 2.0 fold compared to wild-type seeds. Especially, the contents of tryptophan, phenylalanine and aspartic acid were 5.0, 5.3 and 2.7 times higher than those of wild-type seeds, respectively.y.
In Peucedanum japonicum and Aster tataricus L. chlorogenic acid was identified by methods of P.P.C. and T.L.C. $L-Phenylalanine-U-^{14}C\;and\;sodium\;acetate-2-^{14}C$ were administered to Peucedanum japonicum, $L-Tyrosine-U-^{14}C$ to Aster tataricus and $caffeic\;acid-carboxyl-^{14}C\;and\;L-tyrosine-U-^{14}C$ to Fagopyrum esculentum $M_{OENCH}$. The incorporation of each compound into chlorogenic acid was compared. $L-Phenylalanine-U-^{14}C$ showed higher incorporation to chlorogenic acid than sodium $acetate-2-^{14}C$ in Peucedanum japonicum. $Caffeic{\;}acid-carboxyl-^{14}C$ was higher to chlorogenic acid than $L-tyrosine-U-^{14}C$ in Fagopyrum esculentum. $L-Tyrosine-U-^{14}C$ was comparatively low in Aster tataricus.
Four derivatives of kojic acid were synthesized and their inhibitory activities against tyrosinase were evaluated. The C-2 hydroxymethyl and C-7 hydroxyl of kojic acid were replaced by carboxylate and amine, respectively. These derivatives were coupled to L-phenylalanine, producing two amide compounds. The carboxylate derivative (3), its amide compound (5), and the amine derivative (7) were weak inhibitors. The amide compound (9) where amine derivative (7) coupled to L-phenylalanine showed strong inhibitory activity ($IC_{50}=24.6{\;}{\mu}M$) comparable to kojic acid.
Yoon, Hyeokjun;You, Young-Hyun;Kim, Ye-Eun;Kim, Young Ja;Kong, Won-Sik;Kim, Jong-Guk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.23
no.8
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pp.1055-1059
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2013
The ectomycorrhizal fungus Tricholoma matsutake grows symbiotically with Pinus densiflora. Phenylalanine ammonia-lyase (E.C. 4.3.1.24) catalyzes the conversion of L-phenylalanine to trans-cinnamic acid. The role of fungal phenylalanine ammonia-lyase, however, has not been clear until now. In this study, the gene encoding phenylalanine ammonia-lyase (PAL), which was isolated from T. matsutake, was cloned and characterized. The PAL gene (tmpal) consists of 2,160 nucleotides, coding for a polypeptide containing 719 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of tmpal from T. matsutake shows high identity (70%) with that from Laccaria bicolor. Comparative analysis of the PAL genes among T. matsutake and other species of the class Agaricomycetes showed that both active sites and binding sites were significantly conserved among these genes. The transcriptional analysis of the PAL gene revealed a differential gene expression pattern depending on the developmental stages (mycelium, primordium, stipe, pileus, and gills) of T. matsutake. These results suggest that the PAL gene in T. matsutake plays an important role in multiple physiological functions.
Yoon Jae-Ho;Song Won-Seob;Lee Mee Sook;Yang Deok Chun
Korean Journal of Plant Resources
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v.18
no.1
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pp.57-63
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2005
In order to develop the mass production method of anticancer compound-polyacetylene from tissue culture of Panax ginseng C.A. Mayor, these studies were carried out for the effects of various chemicals used as precursor and elicitor in viかo. Ginseng callus cultured on the growth medium containing 5mg/l L-phenylalanine was well grown and detected polyacetylene compounds as well as panaxydol and panxynol. But same media containing $\alpha-methyl-D.L.methionine$ and D.L.-norleucine was not detected any polyacetylene. Panaxydol, one of polyacetylene and active anticancer compound, was detected in calli cultured on media with upper 1mg/l chitosan used as elicitor, but panaxynol was not detected. Nigeran used as active elicitor, caused to decrease the growth of ginseng callus, and don't work as elictor on the biosynthesis of polyacetylene from ginseng callus.
A colorimetric assay for $\gamma$-glutamyl transpeptidase ($\gamma$-CTP; E.C 2.3.2.2) employing 2, 4, 6-trinitrobenzene sulfonate (TNBS) to detect the amount of disappeared acceptor via transpeptidation, has been developed. Under the experimental conditions using L-$\gamma$-glutamyl ethyl ester and L-phenylalanine as $\gamma$-glutamyl donor and acceptor, respectively, it was found that the decreased absorbance of yellow color at 420 nm was strictly related to the amount of L-$\gamma$-glutamyl-L-phenylalanine (L-$\gamma$-Glu-L-Phe) formed, which was determined by DEAE-cellu-lose column chromatography. Concentrations of the enzyme and $\gamma$-glutamyl products were able to be determinedin the nanogram and nanomoles per milliliter range, respectively, with high precision and reliability. This novel assay system may therefore be a useful means for understanding of catalytic function of the $\gamma$-CTP spectrophotometrically without any usage of sophisticated instruments.
Journal of The Korean Society of Inherited Metabolic disease
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v.20
no.2
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pp.37-43
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2020
Phenylketonuria is the most prevalent disorder caused by an inborn error in aminoacid metabolism. It results from mutations in the phenylalanine hydroxylase (PAH) gene. If untreated or late treated, results in profound and irreversible mental disability. Newborn screening test identify patients with phenylketouria. The early initiation of a phenylalanine restricted diet very soon prevents most of the neuropsychiatric complications. However, the diet therapy is difficult to maintain and compliance is poor, especially in adolescents and adulthood. Since 2015, American Medical College of Medical Genetics and Genomics (ACMG) recommended more strong restrictive diet therapy for target blood level of phenylalanine (<360 umol/L). For over four decades the only treatment was a very restrictive low phenylalanine diet. This changed in 2007 with the approval of cofactor therapy (Tetrahydrobiopterin, BH4) which is effective in up to 30% of patients. Data from controlled clinical trials with sapropterin dihydrochloride indicate a similar occurrence of all-cause adverse events with this treatment and placebo. Large neutral aminoacids (LNAA) competes with phenylalanine for transport across the blood-brain-barrier and have a beneficial effect on executive functioning. A new therapy has just been approved that can be effective in most patients with PAH deficiency regardless of their degree of enzyme deficiency or the severity of their phenotype. Phenylalanine ammonia lyase (PAL-PEG) was approved in the USA by FDA in May of 2018 for adult patients with uncontrolled blood phenylalanine concentrations on current treatment. Nucleic acid therapy (therapeutic mRNA or gene therapy) is likely to provide longer term solutions with few side effects.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.31
no.5
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pp.775-781
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2002
The T-type amino acid transporter 1 (TATI) is a Na$^{+}$-independent amino acid transporter which selectively trans- ports aromatic amino acids subserving the amino acid transport system T. To understand the transport properties of aromatic amino acids by human TAT1 (hTATl ), we have examined the hTATl -mediated aromatic amino acid transports using a Xenopus laeuis oocyte expression system. When expressed in Xenopin laeuis oocytes, hTATl induced L- [$^{14}$ C]tryptophan transport which was not dependent on Na$^{+}$ or Cl$^{[-10]}$ in the medium. Uptake was time-dependent and exhibited a linear dependence on incubation time up to 30 min. The L- ($^{14}$ C)tryptophan uptake was highly inhibited by L-isomers of tryptophan, tyrosine and phenylalanine, whereas other L-amino acids did not inhibit hTATl -mediated L- ($^{14}$ C)tryptophan uptake. The hTATl induced the relatively low-affinity transport of aromatic amino acids such as L- ($^{14}$ C)tryptophan, L- ($^{14}$ C)tyrosine and L- ($^{14}$ C)phenylalanine (Km values: 450~750 $\mu$M), consistent with the properties of classical amino acid transport system T. The L- ($^{14}$ C)tryptophan uptake did not show any remarkable pH dependence within the pH range of 5.5 to 8.5. The time-dependent efflux of L- ($^{14}$ C)tryptophan was detected from the oocytes expressing hTATl, which was not affected by the presence or absence of L-tryptophan in the extracellular medium, indicating that hTATl-mediated transport is due to the facilitated diffusion. Expression of hTATl in Xenopu laevis oocytes induced the transport of tryptophan, tyrosine and phenylalanine, indicating that hTATl is a transporter subserving system T These results suggest that hTATl has essential roles in the absorption of aromatic amino acids from epithelial cells to the blood stream. Hecause hTATl is proposed to be crucial to the efficient absorption of aromatic amino acids from intestine and kidney, its defect such as blue diaper syndrome could be involved in the disruption of aromatic amino acid transport.ort.
Optimization of the fermentation medium for phenylethyl alcohol (PEA) production by Pichia anomala SKM-T was performed. The carbon source (glucose), nitrogen source (L-phenylalanine), and initial pH value were independent variables of the optimized medium. The central composite rotatable design was used for the experimental design and the analysis of the results. The optimum medium composition for the maximal production (621.27 mg/L) of PEA was found to be an initial pH of 5.03, and concentrations of L-phenylalanine at 6.53 and glucose at 6.11 g/L (w/v). This experimental finding is in close agreement with the model prediction (702.79 mg/L; desirability 0.884) with an 11.6% difference.
The aspartame, $\alpha$-L-aspartyl-L-phenylalanine methylester, is an artificial sweetener. Taking advantage of the fact that the aspartame is a derivative of dipeptide, synthesis of aspartame from the artificial polypeptide made by an artificial gene has been attempted. The artificial polypeptide (LAP32), a polymer of tripeptide (aspartyl-phenylalanyl-lysine), was purified from the E. coli cells harboring a recombinant plasmid containing the artificial gene. This polypeptide was then digested with trypsin and carboxypeptidase B to produce dipeptide (Asp-Phe). Using the esterase activity of $\alpha$-chymotrypsin, the dipeptide was directly converted into Asp-Phe methylester in a water-methanol system. When the methanol concentration in reaction mixture was 25%, 50% of dipeptide was converted to the dipeptide methylester without producing any by-products.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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