• 제목/요약/키워드: L-Glutamine

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효소분석법에 의한 미량암모니아의 정량 (Determination of Microquantities of Ammonia by Enzymatic Analysis)

  • 성하진;양한철
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제14권6호
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    • pp.495-500
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    • 1986
  • 단백질, 아미노산 등 각종 질소화합물의 공존하에서 $10^{-5}$M (0.01 $\mu$mole/$m{\ell}$)의 미량암모니아 정량이 가능한 효소적 분석법에 관하여 검토하였다. Glutamine synthetase의 L-glutamine합성 반응에서 생성되는 무기린정량법에 의하면 암모니아정량 범위는 0.01-0.10mM이였다. Glutamine synthetase와 pyruvate kinase 및 lactate dehydrogenase의 공역계를 이용하여 340nm에서의 NADH 산화에 의한 흡광도감소에 의하여 암모니아를 정량하였다. 이 방법의 정량범위는 0.01-0.05mM이었으며 반응계의 조성은 phosphoenol pyruvate, 3mM; L-glutamate, 10mM; ATP, 1mM; MgSO$_4$, 20mM;KCl, 75mM; NADH, 0.2mM; Tris-HCl buffer(pH 7.0), 100mM; pyruvate kinase, 10U/$m{\ell}$; lactate dehydrogenase, 12U/$m{\ell}$과 glutamine synthetase, 4U/$m{\ell}$이었다. 효소반응은 3$0^{\circ}C$에서 20분간 예비반응 후 각 농도의 염화암모니움을 가한후 3$0^{\circ}C$에서 30분간 반응시켰다. Glutamine synthetase와 glutamate synthase의 공역계를 사용한 암모니아정량법의 암모니아정량 범위는 0.01-0.05mM이었으며 반응계의 조성은 ATP, 5mM; L-glutamate, 5mM; $\alpha$-ketoglutarate, 5mM; MgCl$_2$, 1.5mM; NADPH, 0.15mM; Tris- HCl buffer(pH7.0) 100mM;glutamine synthetase, 1U/$m{\ell}$과 glutamate synthase, 0.5U/$m{\ell}$ 이었다. 효소반응은 3$0^{\circ}C$에서 20분간 예비반응시킨 후 각 농도의 염화암모니움을 가하여 3$0^{\circ}C$에서 30분간 반응시켰다.

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아미노산, Polyamine 및 flavonoid 첨가가 복숭아 화분의 저온 발아에 미치는 영향 (Effect of Amino Acid, Polyamine, and Flavonoid on the Pollen Germination of Peach(Prunus persica SIEB under Low Temperature Conditions)

  • 천병덕;최인수;강점순
    • 생명과학회지
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    • 제16권5호
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    • pp.711-715
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    • 2006
  • 복숭아는 다른 과수에 비하여 개화기가 빨라 저온으로 인한 화분발아 장해로 결실율이 저하되고 있다. 이러한 문제점을 해결하기 위하여 저온에서 복숭아의 화분 발아를 증진시킬 수 있는 방법을 강구하고자 화분발아 배지에 아미노산, polyamine, flavonoid 등을 첨가하여 일련을 실험을 수행하였다. 저온에서 배지내 첨가물질로써 asparagine, glutamine, spermine, putrescine, kaemferol이 유효하였으며, 이들의 적정농도는 asparagine과 glutamine는 10 mM, spermine 100 mM, putrescine 1000 uM, kaemferol은 1.0 uM 이였다. 저온에서 발아율이 높았던 처리는 $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ asparagine 혼용조합이었고, 다음이 $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ glutamine 혼용조합, $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+200\;{\mu}M$ spermine 혼용조합 순이었다. 기본배지에 치상된 ‘장택백봉’의 화분 발아율은 25.4%, '수봉' 13.9% 불과하였으나, $100\;mg{\cdot}L^{-1}\;H_3BO_3+10\;mM$ asparagine 첨가된 배지는 두 품종 모두 대조구보다 화분 발아율이 $18{\sim}19%$ 증진되었다. 아미노산과 폴리아민 첨가에 의한 화분발아율 증진 효과는 '장택백봉' 보다는 '수봉'에서 더욱 현저하였다.

백서에서 Methotrexate에 의하여 유발된 장관장벽손상 및 장내세균전위와 중량 변화에 대한 글루타민의 효과 (Effect of Glutamine on the Methotrexate Induced Gut Barrier Damage, Bacterial Translocation and Weight Changes in a Rat Model)

  • 김은정;김정욱
    • 약학회지
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    • 제51권1호
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    • pp.1-6
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    • 2007
  • The aim of this study was to examine whether administration of glutamine are able to prevent the methotrexate induced gut barrier damage, bacterial translocation, and weight changes. The animals with glutamine were fed with L-glutamine (1.2 and 2.4 mg/kg/day) for 7 days before methotrexate administration (20 mg/kg orally). 48 hour after methotrexate administration, intestinal permeability were measured for an assessment of the gut barrier dysfunction. Also, enteric aerobic bacterial counts, number of gram-negatives in mesenteric lymph node (MLN), liver spleen, kidney and heart were measured for an assessment of the enteric bacterial number and bacterial translocation. Amounts of food intake, body weight changes and organ weight changes of liver spleen, kidney and heart were measured. Methotrexate administration caused body and liver weight loss regardless amounts of food intakes. Methotrexate induced increasing intestinal permeability, enteric bacterial undergrowth and bacterial translocation to MLN, liver and spleen, but not kidney and heart. The supplements with glutamine reduced the intestinal permeability bacterial translocation, and not influences enteric bacterial number, and body and liver weight changes. This study suggested that glutamine might effectively reduce methotrexate induced intestinal damage and bacterial translocation, but not influence body and organ weight loss.

Ion Mobility Signatures of Glutamine-Containing Tryptic Peptides in the Gas Phase

  • Lee, Hyun Hee L.;Chae, Soo Yeon;Son, Myung Kook;Kim, Hugh I.
    • Mass Spectrometry Letters
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    • 제12권4호
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    • pp.137-145
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    • 2021
  • Herein we report multiple ion mobility (IM) peaks in electrospray ionization IM mass spectrometry (ESI-IM-MS) produced by glutamine residue in peptide. The mobility features of 147 peptides were investigated using ESI-IM-MS combined with liquid chromatography. Of these peptides, 66 presented multiple IM peaks, and analysis of their sequence using collision induced dissociation (CID) revealed that glutamine (Gln), as well as proline (Pro), plays a critical role in generating multiple IM peaks. Mutant-based investigations using Gln-containing peptides indicate that the side chain of Gln promotes intermolecular interactions, inducing multiple structures of the peptide ions in the gas phase. Consequently, the present study demonstrates that the distinct ion mobility signatures identified herein can potentially be used to characterize glutamine-containing peptide ions.

재대정맥 내피세포의 증식에 미치는 글루타민 및 혈청 결핍의 영향 (Effects of Glutamine Deprivation and Serum Starvation on the Growth of Human Umbilical Vein Endothelial Cells)

  • 정진우;이혜현;박철;김원재;최영현
    • 생명과학회지
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    • 제23권7호
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    • pp.926-932
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    • 2013
  • 글루타민과 혈청은 세포의 생존과 증식에 기본적으로 요구되지만, 그들의 양적 변화에 따른 내피세포 반응에 관한 신호전달 관련 연구는 거의 이루어지지 않았다. 본 연구에서는 인체 재대정맥 내피세포(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)의 증식에 미치는 글루타민과 혈청의 결핍에 관한 영향을 조사하였다. 본 연구의 결과에 의하면 글루타민 및 혈청이 결핍된 조건에서 배양된 HUVECs의 증식 억제는 apoptosis 유발과 연관성이 있었음을 DAPI staining에 의한 핵의 형태 변화와 유세포 분석을 통하여 확인하였다. 비록 혈청이 결핍된 조건보다 글루타민 결핍에 의한 apoptosis 유발 정도가 더 높게 나타났으나, 두 현상에 의한 apoptosis의 유발은 anti-apoptotic Bcl-2 및 Bcl-xL의 발현 저하와 pro-apoptotic Bax의 발현 증가, IAP family 단백질의 발현 감소, caspase의 활성 증가에 따른 PARP 단백질의 단편화와 연관성이 있었다. 또한 이러한 조건에서 HUVECs의 Bid 발현의 감소 또는 tBid 발현의 증가 현상이 관찰되어, 글루타민 또는 혈청 결핍에 의한 HUVECs의 apoptosis 유발은 세포막 수용체 및 미토콘드리아 활성 경로를 동시에 통하여 이루어지고 있음을 알 수 있었다. 그러나 글루타민과 혈청이 동시에 결핍된 조건에서 배양된 HUVECs의 증식 억제 현상은 각각의 조건에 비하여 증가되었으나 apoptosis는 유발되지 않았다.

Poly-$N^5$-(3-hydroxypropyl glutamine)/Poly (ethylene glycol)block copolymer hydrogel의 합성과 인공피부에의 응용 (Synthesis of Poly-$N^5$-(3-hydroxypropyl glutamine)/Poly (ethylene glycol)block Copolymer Hydrogel and Its Application to the Artificial Skin)

  • 조종수;오상봉
    • 대한의용생체공학회:의공학회지
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    • 제12권1호
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    • pp.57-62
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    • 1991
  • ABA type block copolymers composed of poly($\gamma-benzyl$ L-glutamate) (PBLG) as the A component and poly (ethylene glycol) as the B component were obtained by polymerization of $\gamma-benzyl$ L-gletamate N -carboxyanhydride, initiated by amino groups at both ends of poly(ethylene glycol) . From circular dichroism measurements in ethylene dichloride solution as well as from infrared spectTa measurements in solid state, it was found that the polypep- tide block exists in the a-helical conformation, as in PBLG homopolymer. $Poly-N^5$ (3-hydroxypropyl glutamine) (PHPG)/poly(ethylene glycol)block copolymer hydrogel was obtained by the treatment of PBLG/PBG block copolymer with the mixture of 3-ammine-1-propanol and diamlnooctane. The water content of PHPG/PEG block copolymer hydrogel was about 80wt% when the concentration of crosslinking agent was below 5 mole % per polymer.

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일본잎갈나무(Larix kaempferi) 유기질소원 및 식물생장조절물질 처리에 따른 조직증식 및 체세포배 유도 효과 (Effect of tissue proliferation and somatic embryo induction in Larix kaempferi following treatment with organic nitrogen sources and plant growth regulators)

  • 김용욱;김지아;문흥규;정수진
    • Journal of Plant Biotechnology
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    • 제42권4호
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    • pp.376-379
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    • 2015
  • 본 연구는 낙엽송의 배발생조직 증식 및 체세포배 유도에 영향하는 유기질소원(${\small{L}}$-Glutamine 및 casein hydrolysate, CH), 식물생장조절물질(옥신 및 사이토키니류)의 종류 및 농도의 효과를 평가하기 위해 수행되었다. 배발생조직 증식 비교에서 1,000 mg/L ${\small{L}}$-Glutamine 첨가 시 2주 혹은 4주 모두 가장 높은 조직생중량을 보였고 그 외 처리구에서는 대체로 유사하였다. 체세포배 유도에서는 0.2 mg/L IBA 첨가 시 가장 높은 426.3개를 유도하여 가장 효과적이었으나 0.2 mg/L BA 혹은 Kinetin처리구에서는 전혀 체세포배가 유도되지 않았다. IBA 농도 별 비교에서는 0.2 mg/L(303개)농도가 가장 좋았으며, 1.0 mg농도에서도 281개를 유도하여 체세포배 유도에 효과적이었으나 5.0 mg/L 첨가 시 109.3개로 가장 저조하였다.

Effects of L-glutamine supplementation on degradation rate and rumen fermentation characteristics in vitro

  • Suh, Jung-Keun;Nejad, Jalil Ghassemi;Lee, Yoon-Seok;Kong, Hong-Sik;Lee, Jae-Sung;Lee, Hong-Gu
    • Animal Bioscience
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    • 제35권3호
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    • pp.422-433
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    • 2022
  • Objective: Two follow-up studies (exp. 1 and 2) were conducted to determine the effects of L-glutamine (L-Gln) supplementation on degradation and rumen fermentation characteristics in vitro. Methods: First, rumen liquor from three cannulated cows was used to test L-Gln (50 mM) degradation rate and ammonia-N production at 6, 12, 24, 36, and 48 h after incubation (exp. 1). Second, rumen liquor from two cannulated steers was used to assess the effects of five levels of L-Gln including 0% (control), 0.5%, 1%, 2%, and 3% at 0, 3, 6, 12, 24, 36, and 48 h after incubation on fermentation characteristics, gas production, and degradability of nutrients (exp. 2). Results: In exp. 1, L-Gln degradation rate and ammonia-N concentrations increased over time (p<0.001). In exp. 2, pH was reduced significantly as incubation time elapsed (p<0.001). Total gas production tended to increase in all groups as incubation time increased. Acetate and propionate tended to increase by increasing glutamine (Gln) levels, whereas levels of total volatile fatty acids (VFAs) were the highest in 0.5% and 3% Gln groups (p<0.001). The branched-chain VFA showed both linear and quadratic effects showing the lowest values in the 1% Gln group particularly after 6 h incubation (p<0.001). L-Gln increased crude protein degradability (p<0.001), showing the highest degradability in the 0.5% Gln group regardless of incubation time (p<0.05). Degradability of acid detergent fiber and neutral detergent fiber showed a similar pattern showing the highest values in 0.5% Gln group (p<0.10). Conclusion: Although L-Gln showed no toxicity when it was supplemented at high dosages (2% to 3% of DM), 0.5% L-Gln demonstrated the positive effects on main factors including VFAs production in-vitro. The results of this study need to be verified in further in-vivo study.

Chlorobium limicola f. thiosulfatophilum NCIB 8327로부터 Glutamine Synthetase의 분리 및 특성분석 (Purification and Some Properties of Glutamine Synthetase lsolated from Chlorobium limicola f. thiosulfatophilum NCIB 8327)

  • 나종욱;김지윤;윤환;강사욱
    • 미생물학회지
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    • 제30권6호
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    • pp.564-569
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    • 1992
  • 녹황색 세균인 Chlorobium limicola f. thiosulfatophilum NCIB 8327을 glutamate 가 질소원으로 포함된 변형 Pfennig 배지에서 배양한 다음 균체를 얻고, glutamine synthetase 효소를 초원심분리, DEAE-Sepharose CL-6B 이온교환 크로마토그래피, Sephacryl S-300 젤여과 크로마토그래피, 분취용 액체크로마토그래피의 과정을 통해 2% 수율에 46.3배의 정제배수로효소를 분리정제하였다. UV-VIS 흡수스펙트럼과 polycrylamide 젤 정기영동을 통해분리된 효소의 순수도는 확인하였다. Sephacryl S-3000 젤을 이용하여 얻은 효소의 분자량은 280 kDa 정도였으며, SDS-polyacrylamide 젤 전기영동 결과, 30 kDa 정도의 분자랴ㄹ을 갖는 단위체의 심합체로 추정된다. 이효소의 최적 온도와 pH 는 각각 $30^{\circ}C$ 와 pH 7.0 이었으나, 두기질 L-glutamine 과 hydroxylamine-HCI 에 대한 km 값은 각각 27.9 mM 과 0.92 mM 이었다. 이 효소의 활성은 alamine, glycine, tryptophan 등의 아미노산에 의해 상당한 저해를 받는 것으로 나타났으며, asparagin, lysine, leucine, valine 등에 의해서는 거의 영향을 받지 않았다.

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Effects of Biocom as a Replacement of Glutamine on Performance and Blood Biochemical Indexes of Early Weaned Piglets

  • Zhou, R.Y.;Peng, J.;Liu, Z.L.;Fang, Z.F.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제19권6호
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    • pp.872-876
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    • 2006
  • The objective of this study was to evaluate Biocom (a protein source containing a high level of glutamine and alanyl-glutamine) as a replacement for glutamine (Gln) in nursery pig diets. Forty-two pigs (fourteen pigs per treatment) weaned at 28 d of age were used in a 28-d performance trial using three dietary treatments: control (no Gln), control supplemented with Gln or Biocom. The control diet was composed of corn, soybean meal, whey and fish meal. Individual body weight, pen feed disappearance and diarrhea were monitored. On d 0, 2, 7 and 14 postweaning, respectively, five pigs per treatment were selected and bled from the anterior vena cava to obtain five replicate samples of blood on each dietary treatment for determination of blood biochemical index. Dietary supplementation of Gln and Biocom did not influence performance, plasma Gln and total serum protein concentration (p>0.05). However, the addition of Gln and Biocom could prevent serum urea nitrogen and serum cortisol from increasing on d 2 postweaning (p<0.05). There were no significant differences (p>0.05) in any of the examined parameters between Gln- and Biocom-supplemented diets. In conclusion, dietary Gln did not influence the performance of early-weaned piglets owing to the complex diet containing whey, but could prevent the increase of serum urea and cortisol. Biocom could be used as a replacement for free pure Gln without any negative effect on early-weaned piglets.