Tenacibaculum maritimum (formerly Flexibacter maritimus) is the aetiological agent of an ulcerative and necrotic disease commonly called tenacibaculosis in marine fish. Tenacibaculosis is an economically important disease in a great variety species in Jeju Island cultured fish and leading to this pathogen initially affected by skin, mouth, fins, tail causing severe necrotic and ulcerative lesions on the body surface. In the present study, A-7 strain was isolated from Paralichthys olivaceus showing symptoms of tenacibaculosis and identified as T. maritimum by morphological, biochemical and molecular biological analysis. T. maritimum A-7 is experimentally infected through immersion route in Paralichthys olivaceus which the disease outbreaks in land-based fish tanks of Jeju Island. Up to data a number of treatments proposed for the tenacibaculosis outbreaks are based on the immersion administration of drugs in tank. Oxytetracycline is the most widely used disinfectants in fish farms. However, most of fish farms manager and consumers have expressed concern as bioaccumulation in tissue and its environmental. In addition, this antimicrobial compounds is expensive in fish farmers. The overcome of this problem is desired the application of natural plant derived products. To obtain as 70% EtOH extract antimicrobial compounds against tenacibaculosis from 35 species of Jeju Island native plants were screened for antimicrobial activity against T. maritimum. In the present study were identified most of the plant extracts were better antimicrobial activity against T. maritimum.
In this study, plant samples of five species were collected from the Dokdo islands in South Korea. Plant samples such as Asparagus schoberioides, Corydalis platycarpa, Festuca rubra, Sedum oryzifolium, and Setaria viridis were collected from the Dongdo and Seodo. Endophytic fungal strains were isolated from the roots of five plants from the Dokdo islands. Thirty-three fungal strains were isolated from these native plants. All the endophytic fungi were analyzed by internal transcribed spacer (ITS) sequencing (ITS containing ITS1, 5.8s, and the ITS2 region). Waito-c rice seedlings were treated with fungal culture filtrates to test their plant growth-promoting activity. A bioassay of the D-So-1-1 fungal strain isolated from S. oryzifolium confirmed that it has the highest plant growth-promoting activity. All the endophytic fungi belong to four orders: Eurotiales (86%), Capnodiales (3%), Hypocreales (4%), and Incertae sedis (7%). The endophytic fungi were classified as Ascomycota, which contained Aspergillus (12%), Cladosporium (3%), Eurotium (3%), Fusarium (18%), Microsphaeropsis (6%), and Penicillium (58%) at the genus level.
Kim, Ju Il;Kwon, Min;Shim, Jae Dong;Kim, Jeom Soon;Lee, Yeong Gyu;Jee, Sam Nyu;Lee, Jeong Tae;Ryu, Jong Soo;Yoo, Dong Lim;Lee, Gye Jun
Korean journal of applied entomology
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v.53
no.2
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pp.149-156
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2014
The resistance levels of the green peach aphid, Myzus persicae (Sulzer), against 10 insecticides was checked and selected the applicable insecticide resistance markers. We conducted our study in 5 cabbage cultivation regions (Pyeongchang, Hongcheon, Bongwha, Muju, and Jeju) of Korea, over 3 successive years (2009-2011). We selected a multi-resistant (MR) strain from among the 5 field-collected populations. We analyzed esterase over-expression and mutation(s) in the target sites, by using native isoelectric focusing (IEF) and quantitative sequencing (QS). We detected esterase over-expression and StoF mutation in the acetylcholinesterase 1 gene (ace1) in all of the field-collected populations, including the MR strain. We did not detect the LtoF mutation, which is a well-known knockdown resistance (kdr) mutation in the para-type sodium channel gene (para), in the MR strain; however, the value of the MR strain for bifenthrin was 3,461-fold higher than that of the susceptible strain. Our results indicate that insecticide resistance is more effectively evaluated using molecular markers than by conducting a bioassay. The molecular markers StoF in ace1 and MtoL in para can easily be applied in diagnostic methods such as QS or PCR amplification of specific alleles (PASA). These methods may be extended to management of M. persicae resistance in the field.
In order to improve the quality of greenish tobacco leaves, fermentation experiments by microbial treatment and periodical variations of fermentation temperature were performed. More than twenty strains were isolated from Hyangcho ( Sun cured Korean native leaves ) and Perique tobacco leaves. Among them, five strains which showed good growth in Nicotine Broth medium were selected. Identification experiments of these strains as well as checking the effects of fermentation by these treatment on the quality and aging rate of greenish tobacco leaves were carried out. The results were like following ; 1. Selected strains were identified as pseudomona.f for H-82, for P-4 and Bacillus for H-81. p- 4 and P-7. 2. Among the five strains, strain H- 82 showed the best effect on the forced aging and the quality of greenish tobacco leaves, The rate of oxygen uptaking, pH and nicotine contents were decreased. However, total volatile acids and petroleum ether extracts were increased. 3. After fermentation, taste from greenish tobacco leaf were removed and smoking characteristics were improved. Color was also changed from greenish yellow to dark brown.
A new isolate of Cucumber mosaic virus (CMV), identified as Li-CMV was isolated from a diseased Korean native lily (Lithium tsingtauense Gilg). Biological and serological properties of Li-CMV were characterized, and reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis, restriction enzyme profiling of RT-PCR products, and nucleotide sequence analysis of RNA3 of the virus were performed in this study. Remarkable differences in symptoms between Li-CMV and ordinary CMV strains were found in tobacco plants and Datura stramonium. Li-CMV-infected tobacco plants (cv. Xanthi-nc and cv. Samsun) induced chlorotic ringspots on uninoculated upper leaves, and the symptom expression was delayed or faint whereas, ordinary CMV strains induced green mosaic symptoms on the plant. Systemic infections were observed on Nicotiana benthamiana with severe mosaic symptom. Restriction mapping analysis of RT-PCR products using MspI showed that Li-CMV belonged to CMV subgroup I. A full-length CDNA copy of RNA3 for the virus was amplified by RT-PCR, cloned, and its complete nucleotide sequence was determined. The RNA3 of Li-CMV was 2, 232 nucleotides long, and consisted of two open reading frames of 843 and 657 bases encoding 3a protein (movement protein) and coat protein, respectively. Results of this study indicate that Li-CMV is a novel strain and belongs to subgroup I of CMV in the genus Cucumovirus.
To isolate probiotic lactic acid bacteria having superior inhibitory activities against animal gastro-intestinal pathogenic bacteria such as Salmonella gallinarum, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, 130 strains were initially isolated from the small intestines of Korean native chickens and 7 lactic acid bacteria were finally selected. By using API CHL kit and 16S rRNA sequencing method, the selected lactic acid bacteria were found to be belonged to genus Lactobacillus except BD14 identified as Pediococcus pentosaceus. Especially, Lactobacillus pentosus K34 showed the highest resistancy to both of HCl and bile salt, as well as the highest inhibitory activities against S. gallinarum, S. aureus and E. coli. All the selected strains were sensitive to various antibiotics such as neomycin, erythromycin, cephalosporin, amoxicillin/clavulanic acid, ampicillin, oxytetracycline, but resistant to ciprofloxacin. All the selected strains except BL strain were resistant to colistin and streptomycin, and BD14, BD16, K34 strains were resistant to gentamicin.
Kim, Hak-Jun;Shin, Hee-Jae;Kim, Hyun-Woo;Kang, Sung-Ho;Kim, Young-Tae
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.28
no.12
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pp.2303-2309
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2007
Expressed protein ligation (EPL) technique, joining recombinantly expressed proteins to polypeptides, has been widely adopted for addressing various biological questions and for drug discovery. However, joining two recombinant proteins together is sometimes difficult when proteins are expressed insoluble and unrefoldable, because ligation-active proteins via intein-fusion are obtainable when they are folded correctly. We overcame this limitation coexpressing target protein with additional methionine aminopeptidase (MAP) which enhances removal of the initiation methionine of recombinantly expressed protein. Our approach demonstrated that two domains of 46 kDa 5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate (EPSP) synthase, a target of herbicide glyphosate, were successfully joined by native chemical ligation, although its C-terminal domain was expressed as an inclusion body. The intein-fused N-terminal fragment of EPSP synthase (EPSPSN, residues 1-237) was expressed and the ligation-active thioester tagged N-terminal fragment (EPSPSN-thioester) was purified using a chitin affinity chromatography and mercapto-ethanesulphonate (MESNA) as intein thiolysis reagent. Its Cterminal fragment (EPSPSC, residues Met237-238CYS-427), expressed as an inclusion body, was prepared from an additional MAP-expressing strain. Protein ligation was initiated by mixing ~1 mM of EPSPSN-thioester with ~2 mM of EPSPSCCYS (residues 238CYS-427). Also we found that addition of 2% thiophenol increased the ligation efficiency via thiol exchange. The ligation efficiency was ~85%. The ligated full-length EPSP synthase was dissolved in 6 M GdHCl and refolded. Circular dichroism (CD) and enzyme activity assay of the purified protein showed that the ligated enzyme has distinct secondary structure and ~115% specific activity compared to those of wild-type EPSP synthase. This work demonstrates rare example of EPL between two recombinantly expressed proteins and also provides hands-on protein engineering protocol for large proteins.
To investgate growth effect of tomato by Bacillus sp. WRD-1 isolated from soil, the Bacillus sp. WRD-1 cultures were treated into tomato cultivated soil with different dilutions (1:100, 1:300, and 1:500) and autoclaved Bacillus cultures as control. Growth and yeild of tomato enhanced in treatments of the Bacillus cultures compared to control. The populations of native bacteria and actinomyces were increased twice in field treated with Bacillus sp. WRD-1 cultures, but the number of mold was decreased. Since the Bacillus sp. WRD-1 promoted growth of tomato and affected population dynamics of microorganism in field, this strain is prominent candidate as a microbial biocide to improve soil potential.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.02a
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pp.428-429
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2011
Recently, we performed ab initio total energy calculation and tight-binding molecular dynamics (TBMD) simulation to study structures and the reconstruction of native defects in graphene. In the previous study, we predicted by TBMD simulation that a double vacancy in graphene is reconstructed into a 555-777 composed of triple pentagons and triple heptagons [1]. The structural change from pentagon-octagon-pentagon (5-8-5) to 555-777 has been confirmed by recent experiments [2,3] and the detail of the reconstruction process is carefully studied by ab initio calculation. Pentagon-heptagon (5-7) pairs are also found to play an important role in the reconstruction of vacancy in graphene and single wall carbon nanotube [4]. In the TBMD simulation of graphene nanoribbon (GNR), we found the evaporation of carbon atoms from both the zigzag and armchair edges is preceded by the formation of heptagon rings, which serve as a gateway for carbon atoms to escape. In the simulation for a GNR armchair-zigzag-armchair junction, carbon atoms are evaporated row-by-row from the outermost row of the zigzag edge [5], which is in excellent agreement with recent experiments [2, 6]. We also present the recent results on the formation and development of dislocation in graphene. It is found that the coalescence of 5-7 pairs with vacancy defects develops dislocation in graphene and induces the separation of two 5-7 pairs. Our TBMD simulations also show that adatoms are ejected and evaporated from graphene surface due to large strain around 5-7 pairs. It is observed that an adatom wanders on the graphene surface and helps non-hexagonal rings change into stable hexagonal rings before its evaporation.
Human epidermal growth factor (hEGF) can stimulate the division of various cell types and has potential clinical applications. Since the protein contains three intra-molecular disulfide bonds, the high expression of active hEGF in Escherichia coli has not been well researched, We fused the hEGF gene with a small ubiquitin-related modifier gene (SUMO) by synthesizing an artificial SUMO-hEGF fusion gene that was highly expressed in E. coli (DE3) strain. The optimal expression level of the soluble fusion protein, SUMO-hEGF with IPTG (Isopropyl-${\beta}$-D-Thiogalactopyranoside), was up to 38.9% of the total cellular protein. The fusion protein was purified by Ni-NTA affinity chromatography and cleaved by a SUMO-specific protease to obtain the native hEGF, which was further purified by Ni-NTA affinity chromatography. The result of the reverse-phase HPLC showed that the purity of the recombinant cleaved hEGF was greater than 98%.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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