Post-translational modifications of the nucleocapsid protein of bovine coronavirus (Quebec strain) were investigated. Coronavirions were radiolabelled in vivo with inorganic $[^{32}P]$orthophosphate and analysed by SDS-PAGE, followed by autoradiography. A single polypeptide with a migration rate of 55 KDa was identified by metabolic phosphate labelling, demonstrating that the nucleocapsid protein of bovine coronavirus was a phosphoprotein. A gene encoding the nucleocapsid protein was inserted immediately downstream from the polyhedrin promoter of Autographa californica nuclear polyhedrosis baculovirus. Spodoptera frugiperda cells infected with this recombinant baculovirus synthesized a 55 KDa polypeptide, as demonstrated by immunoprecipitation with anti-nucleocapsid monoclonal antibody. The recombinant nucleocapsid protein synthesized in Spodoptera cells could also be labelled by $[^{32}P]$orthophosphate. Phosphoamino acid analysis showed that both serine and threonine residues were phosphorylated in authentic, as well as in recombinant nucleocapsid proteins, with a relative phosphorylation ratio of 7:3. Our studies demonstrated that the nucleocapsid protein of bovine coronavirus was a serine and threonine-phosphorylated protein and that Spodoptera insect cells were able to properly phosphorylate the relevant foreign proteins.
본 연구는 Aspergillus niger 폐포자를 이용하여 과산화수소를 함유한 폐액처리용 효소제조 공정개발에 그 목표가 있다. 본 카탈라제 (catalase) 생산 공정은 미세여과(0.2 $\mu\textrm{m}$ microfiltration)와 한외여과 (300 KDa, 50 KDa, ultrafiltration)의 순차적인 막 여과 방식을 통하여 효소액을 회수하는 것을 특징으로 한다. 초기 폐포자와 완충액의 희석비는 1 : 5였으며 막분리 공정의 수율은 90% 이상이었다. 얻어진 카탈라제 용액의 최적 온도는 4$0^{\circ}C$, 최적 PH는 5-8 영역이었다.
This study was undertaken to examine the protein content of GCF and serum from noraml population in order to standardize the sample loading on SDS/PAGE gels. The resulats were as follows ; 1. The protein concentration of serum was not different between normal group and diseased group. 2. In GCF, the bands of lower molecular weight than albumin were heavily stained, but in serum, the protein bands of higher molecalar weight were found. 3. The profile of protein in normal GCF was characterized by heavily staining bands at 77, 66, 55, 26 KDa corresponding to the positions of transferrin, albumin, heavy and light chains of Ig G. Also 47, 37 KDa nonplasma proteins were found.
The production of emulsion sausage generally contain nitrite as a curing agent for preservative effect and color as well as flavor development. This investigation describe a study on the inhibitory effect of chitosan against some spoilage bacteria and substitution effect of nitrite in sausages. Among of the chitosan, M.W. 120KDa of chitosan has shown an antimicrobial effect. When 0.2% of chitosan and half of normal nitrite content were added to sausage, effect of preservative quality was same that added to normal content of nitrite in sausages. Sausage added to 0.5% of chitosan has been a good storage property even though without nitrite. The growth of most of bacteria was inhibited 80% or more at 0.01~0.2% of chitosan. These results indicated that M.W. 120KDa of chitosan as a natural material could provide sausage protection and very reduced or substituted amount of nitrite against spoilage bacteria.
Compared to the specialist program, the advanced general dentistry program (AGD) is designed to guarantee that dentists dealing with primary care services possess overall dental care proficiency and contribute to offering better care to customers. This program is also believed to help resolve the imbalance among the number of candidates for specialization, which came to the authorities' attention throughout the implementation of the dental specialist program. KDA will continue to implement AGD while pushing for the establishment of the program by complementing it with adjustment measures and regulations provided the dental community agrees to such actions.
스트레스가 인체의 항상성에 영향을 미쳐 다양한 질병 및 동통을 일으킬 수 있다는 것은 선학들의 연구에 의해 증명되어 왔다. 특히 정서적으로 중요한 구강안면영역에는 스트레스와 관련된 질병 및 동통이 많이 존재하는데, 이에대한 병리적 기전은 아직 뚜렷하게 밝혀져 있지 않다. 이에 저자는 스트레스와 말초 및 중추신경과의 병리적 관계를 알아보고자, 구속스트레스하에서 구강안면영역의 감각과 운동에 중요한 역할을 하는 삼차신경의 집합체인 삼차신경절과 뇌간조직의 단백질 변화를 western blot을 통해 살펴보았다. 실험동물은 생후 8주된 Sprague-Dawley계 웅성 백서 (323-367 g/bw)를 대조군 3마리, 실험군 15마리로 배정하였고 실험군은 실험 전기간에 걸쳐 구속스트레스를 부여하였다. 실험동물의 삼차신경절과 뇌간은 희생 즉시 적출되었으며, western blot을 시행하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 삼차신경절의 모든 군에서 약 18 KDa의 단백질이 균일하게 나타났다. 2. 뇌간의 모든 군에서 약 18 KDa 단백질이 발현되었으며, 정상 대조군, 실험 즉일, 1일, 3일, 7일에서는 뚜렷한 변화가 없었으나 실험 5일군에서는 현저한 감소를 보였다. 구속스트레스에 의해 뇌간의 5일군에서 약 18 KDa의 특수한 단백질이 뚜렷이 감소된 후 7일 군에서 다시 증가되었던 것은 스트레스에 의한 뇌간세포의 반응으로 생각되며, 뇌간에서와 다르게 삼차신경절에서는 그 변화가 나타나지 않았던 것은 스트레스에 대한 조직의 반응 차이라고 생각된다. 따라서 이를 명확하게 확인하기 위해서는 향후 수종의 스트레스와 관련된 단백질 변화에 대한 추가적인 연구가 필요하리라 사료된다.
본 연구에서는 프로테오믹스 기술을 활용하여 칼슘함량이 증가된 새송이버섯과 일반 새송이 버섯에서 단백질 발현의 변화를 조사하였다. 또한 현저한 차이를 보이는 단백질들을 분리, 동정함으로써 새송이버섯 칼슘강화의 기작규명에 기초자료를 제공하고자 하였다. 새송이버섯의 단백질 패턴을 확인한 결과 15 Kda에서 100 Kda 사이에 존재하는 60% 정도의 spot은 산성 pI를 가지며 나머지 40% 정도의 spot은 염기성 영역에 나타났다. 100 Kda 이상에서는 polypeptide spot이 거의 나타나지 않았다. 그리고 9.0 이상의 pI에서도 spot은 거의 나타나지 않았다. 두 배 이상의 발현변화를 보이는 30여개의 spot들 중 10개의 spot에 대한 단백질동정을 할 수 있었다. 10개의 확인된 단백질은 8개의 단백질은 발현이 증가하는 것으로 나타났으며 2개의 단백질은 발현이 감소하는 것으로 나타났다. 동정된 단백질들의 기능을 고찰한 결과 새송이버섯의 칼슘강화기작을 규명하는데 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 기대된다.
황해서식 두족류 (class Cephalopoda)의 가용성 단백질에 대한 연구를 위해, 인천 및 목포 연근해에서 채집된 두족류 3목 5종의 (오징어목 : 참갑오징어 (Sepia esculenta) 및 쇠갑오징어 (Sepiella japonica), 살오징어목 : 한치꼴뚜기 (Loligo chinensis) 및 참꼴뚜기 (Loligo beka), 문어목 : 낙지 (Octopus minor)의 안구단백질, 근육단백질 및 간조직을 추출하여, 각종 전기영동 (Davis-PAGE 및 SDS-PAGE, Exponential gradient SDS-PAGE, 등전점 전기영동, 2차원 전기영동) 방법에 의한 단백질 분리 양상을 통해 두족류 종사이의 유전적 근연관계를 분석하였다. 시료의 안구 및 근육 단백질에 대한 exponential gradient SDS-PAGE 전기영동 결과 대략 분자량 35-50 KDa 사이에서 단백질 분리 양상의 차이를 볼 수 있었으며, 등전점 전기영동 방법(IEF)에 의해서는 pI값 7.5-8.5 사이에서 종간 특이성을 갖는 단백질 분리 양상을 볼 수 있었다. 특히 유의성이 있다고 판단된 시료의 안구 단백질을 2차원 전기영동 방법에 의해 분리 해 본 결과 대부분 분자량 30-50 KDa 사이에 분포하고 있어 exponential gradient SDS-PAGE 전기 영동에 의한 결과와 일치함을 알 수 있었다.
황해서식 참조기(Pseudosciaena polyactis)에 대한 계군을 분석하기 위한 연구의 일환으로 우선 황해의 목포 연근해에서 채집된 참조기의 난자와 근육으로부터 mt-DNA와 근육 actin을 추출하였다. 난자의 경우 mt-DNA를 추출한 뒤 제한효소로 처리하여 절편다형현상을 관찰하였으며 근육 actin의 경우 단백질 분해효소(Staphylococcus aureus $V_8$ protease)로 처리하여 N-terminal 절편의 다형현상을 각각 관찰하였다. Mt-DNA의 genome 크기는 약 $\16\pm0.2$ Kb였고 전체 절편수는 37개였으며 사용된 20개의 제한효소 중 8개의 제한효소만이 3개 정도의 절편을 보이므로써 유의성을 관찰할 수 있었다 한편 근육 actin을 Staphylococcus aureus $V_8$단백질 분해효소로 처리하였을 때 N-terminal 부위에서 26 KDa 및 16 KDa의 분자량을 갖는 특이절편을 관찰할 수 있었다.
Park, Hyun-Young;Lee, Soo-Ung;Chae, Seong-Wan;Huh, Sun;Yu, Jae-Ran;Kim, Jin;Hong, Sung-Tae
Parasites, Hosts and Diseases
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제37권2호
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pp.109-115
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1999
The present study observed the variation of antigenicity of Pneumocystis carinii and serum IgG antibody reastion to the antigens from different localtities in Korea. Antigens of rat P,carinii and sera of inhabitants were collected at Chunchon, Chungju, Kwangju and Seoul during 1995-1996. Enzyme-Linked Immunosorbent Assay and immunoblot were used for immune reaction. Absorbance of 1,294 human sera ranged between 0.01and 0.93. Sera from Chunchon showed higher absorbances than those from other areas. Immunoblotting revealed IgG antibody reactions to 116,100, and 45-55 kDa antigenic bands of rat P.carinii, but the frequencies of positive reaction to individual bands were variable by localities. Total 62.6% reacted to 100kDa band and 32.0% to 45-55 kDa bands. For the reaction to 116kda, the reaction rate was 60.0% of the sera showed the reaction to 116kda band while 37.7% reacted to 100kda, the reaction rate was 60.0% to 82.6% by localities. It is found that the reaction rates of the human sera to rat P.carinii antigen are variable according to the localities. Also, the high molecular antigen of 116kDa of rat P.carinii is the most frequent antigenic band reaction to human sera.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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