The effects of glycine on cell growth and L-omithine production were investigated in shake-flask and jar fermentor cultures of a citrulline auxotrophic mutant, Brevibacterium ketoglutamicum BK 1046. In the shake-flask culture, the optimal concentration of glycine for L-ornithine production was found to be 20 g/l. In the jar fermentor culture with the glycine at an initial concentration of 20 g/l, L-ornithine production increased by 28%, compared to that of the culture with no glycine added. 37 g/l of L-ornithine was produced when additional feeding of glycine (5 g/l) was made. This was a significant improvement in L-ornithine production compared to that (ca. 24 g/l) of the corresponding batch culture conducted without glycine. According to the stoichiometric analysis with the batch fermentation results, the experimental and theoretical L-ornithine yields based on the glucose consumption were 0.24 and 0.59, respectively. This indicates that the performance of L-ornithine fermentation can further be improved by the supplementation of glycine and the development of a mutant strain possessing a higher growth yield.
In the batch culture experiments, the addition of $MnSO_4$, was examined in flask culture, and then the optimal amounts of $MnSO_4$ was investigated in 2.5- L jar-fermenter. As a results, 0.005% $MnSO_4$ was found to enhance the ARA yield of 1.14- fold. Also the addition of $KH_2PO_4_4$ was investigated in 2.5-L jar-fermenter and the ARA yield was enhanced 1.20-fold. Fed batch culture study shown a relatively high productivity of cell mass (62.1 g/L) and ARA content (12.0 g/L) when 14% ammonia solution were alternatively used to control the pH and nitrogen source in the cultivation period.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.10
no.3
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pp.126-131
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2002
For the probiotic feed production from residual food waste, aerobic liquid fermentation was conducted by thermophilic bacteria. 11 Strains of bacteria were isolated from several soil sources and residual food waste. Screening was carried by shaking incubator for the separation of thermophilic strain at $55^{\circ}C$. The isolated strains were tested for enzyme activities such as ${\alpha}$-amylase and protease. 6 Bacterial strains were chosen and were adapted by repeated fermentation processes in food waste substrate. The viable cell count of them at final fermentation stages were shown as $3-7{\times}10^9/ml$ in 2L-jar fermenter. Among them B3, B6 showed higher enzyme activity. By the mixed fermentation of B3, B6 and Bacillus stearothermophilus, the highest viable cell count reached to $1.4{\times}10^{10}/ml$ in 8 hours.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.8
no.4
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pp.147-152
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2000
For the probiotic feed production from residual food waste by using the yeast Kluyveromyces marxianus, aerobic liquid fermentation was attempted at $35^{\circ}C$. After grinding finely, optimal fermentation conditions of the substrate was investigated in shaking incubator. By controlling water content yeast growth was studied at each different solid content of 5, 10 and 15% respectively. The most active growth of the yeast was shown at 10%. For the stimulation of the cell growth, mixed culture with Aspersillus oryzae was conducted in a 2 litre-jar fermenter. As the results, the yeast growth rate was increased, but the maximum viable cell count amounted was slightly higher as $3.5{\times}10^9/ml$ than single culture.
A bacterial strain Acinetobacter calcoaceticus was examined for its ability to degrade fats, oils and hydrocarbons, and tested for the possibility of application in wastewater treatment. All fats and oils tested were degraded by the strain. About 60% of hexadecane, 26% of fish oiL and 40-54% of vegetable oils were consumed respectively in shaking-flask culture. Saturated fatty acid compositions were about 55% in fish oil and 6-12% in vegetable oils. Increases in cell mass were accompanied with decreases in the concentrations of carbon sources. When jar fermentor in place of shaking-flask was used as a culturing vessel. above 80% of all carbon sources was consumed and yield of cell mass was improved to nearly 1.00. Synthetic wastewaters containing 3% of fat, oil, or hydrocarbon as a sale ca,bon source were treated sequentially with A. calcoaceticus first and then exposed to activated sludge. The concentrations of carbon sources were decreased below 0.06% through the process, and the concentrations of suspended solids were lower than 53 mglml. The data imply the potential use of A. calcoaceticus in wastewater treatment.
Kim, Kyu Bong;Suh, Soo Kyung;Lee, Bo Kyung;Kim, Byung Kyu;Kim, Jae Hee;Han, Eui Sik;Park, Chang Won;Kim, Jong Won;Kim, Kwang Jin;Lee, Sun Hee
Biomolecules & Therapeutics
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v.11
no.4
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pp.214-223
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2003
Methamphetamine (METH) and 3,4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA) have become popular recreational drugs of abuse in many countries. Although the neurotoxic damage caused by METH and MDMA is characterized by degeneration of the dopaminergic and serotonergic systems in brain, the molecular and cellular mechanisms remain to be clarified. Therefore, the purposes of this study were to confirm the capability of METH and MDMA to induce apoptosis and to clarify the action of its molecular mechanism by using serotonergic JAR cells and dopaminergic SK-N-SH cells. METH and MDMA were dose-dependently cytotoxic to human serotonergic JAR cells and dopaminergic SK-N-SH cells. The morphological change of apoptosis was found in Giemsa staining and TUNEL and further verified in DNA fragmentation analysis. Immunoblotting analysis revealed proteolytic cleavage of caspase-3 and -9 and change of bcl-2 and bax proteins. These results suggest that METH and MDMA may induce caspase-dependent apoptosis via the mitochondrial cell death pathway and METH and MDMA-induced neurotoxicity may happen to broadly and independently of both dopaminergic and serotonergic systems.
The research has been carried out to optimize a recombinant S. cerevisine fermentation process for the production of an anticoagulant hirudin. The structural gene coding for hirudin was combined with the GAL10 promoter for controlled expression, the MFal signal sequence for hirudin secretion, and the GAL7 terminator for transcriptional termination. Growth medium composition and environmental conditions were optimized for maximizing cell growth and final hirudin concentration. The optimized conditions included yeast extract 40g/$\ell$, casamino acid 5g/$\ell$, g1ucose 20g/$\ell$, galactose 30g/$\ell$, DO 50% and temperature $30^{\circ}C$. These conditions yielded the specific cell growth rate of $0.13hr^{-1}$, the final cell density of 30g cell/$\ell$ and the final hirudin concentration of 64mg/$\ell$ in the batch fermentation with a 2.5$\ell$ jar fermentor.
In order to maximize the cell growth and the biosurfactant production by the Pseudomonas aeruginosa BYK-2(KCTC 18012P), in the fed-batch fermentation processes were performed varying the feeding medium concentrations and the feeding rate. Feel-batch culture was performed with the optimal agitation speed of 200rpm and the aeration rate of 0.67vvm in a 7L Jar fermentor containing 3L of modified medium and 2.0-2.5%(v/v) fish oil as a carbon source. Addition of fish oil(2.5mL/l00mL modified medium), when fish oil was depleted, the cell and biosurfactant concentration were 6.1g/L and 22.7g/L, respectively.
Batch culture of mutant derived from Pichia ciferrii ATCC 14091 was investigated for producing the intracellular tetraacetylphytosphingosine (TAPS). Composite experimental design was used to optimize the composition of the culture medium for maximizing the productivity of TAPS. In this experiment, various culture parameters were investigated that were the effects of temperature, the initial culture pH, the carbon-to-nitrogen ratio, the concentration of trace elements, and the concentration of cofactors. The optimal temperature for cell growth and TAPS synthesis appeared to be %25^{\circ}C$. An initial pH value of 7.5 gave the best results. Under the best condition, the maximum TAPS concentration indicated 7.2 g/L and its productivity was 0.06 g/L-hr in a 2.5 L jar
Development of placenta is a complex process that is critical for the pregnancy and controlled by many factors including cytokines, hormones, growth factors and apoptotic molecules. Recently, it has been shown that progranulin (PGRN) functions in growth of embryo and trophectoderm as well as cell migration. To initiate understanding the role of PGRN in human placental development, we investigated the expression of PGRN mRNA and protein in early and late gestation human placentas, term cytotrophoblast cells and two choriocarcinoma cell lines, JEG-3 and Jar. Reverse transcriptase polymerase chain reaction identified mRNAs derived from the PGRN gene in all samples. Immunoblot analysis showed that PGRN proteins are present in early and late gestation human placentas with decreasing levels over gestation and that PGRN proteins are present in normal and transformed trophoblast cells. Immunohistochemical analysis using paraformaldehyde-fixed tissue sections taken from early and late stages of pregnancy showed that PGRN proteins are present in cytotrophoblast cells, syncytiotrophoblast and extravillous cytotrophoblast cells and that expression pattern of PGRN differed according to the stage of cell differentiation. The results of this study are consistent with the hypothesis that PGRN proteins have critical roles in placental development and suggest that PGRN may function in trophoblast cell growth and differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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