Jung, Yu Jin;Nogoy, Franz Marielle;Cho, Yong-Gu;Kang, Kwon Kyoo
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.186-195
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2015
Anthranilate synthase (AS) is a key enzyme in the biosynthesis of tryptophan (Trp), which is the precursor of bioactive metabolites like indole-3-acetic acid and other indole alkaloids. Alpha anthranilate synthase 2 (OsASA2) plays a critical role in the feedback inhibition of tryptophan biosynthesis. In this study, two vectors with single (F124V) and double (S126F/L530D) point mutations of the OsASA2 gene for feedback-insensitive ${\alpha}$ subunit of rice anthranilate synthase were constructed and transformed into wildtype Dongjinbyeo by Agrobacterium-mediated transformation. Transgenic single and double mutant lines were selected as a single copy using TaqMan PCR utilized nos gene probe. To select intergenic lines, the flanking sequence of RB or LB was digested with a BfaI enzyme. Four intergenic lines were selected using a flanking sequence tagged (FST) analysis. Expression in rice (Oryza sativa L.) of the transgenes resulted in the accumulation of tryptophan (Trp), indole-3-acetonitrile (IAN), and indole-3-acetic acid (IAA) in leaves and tryptophan content as a free amino acid in seeds also increased up to 30 times relative to the wildtype. Two homozygous event lines, S-TG1 and D-TG1, were selected for characterization of agronomic traits and metabolite profiling of seeds. Differentially expressed genes (DEGs), related to ion transfer and nutrient supply, were upregulated and DEGs related to co-enzymes that work as functional genes were down regulated. These results suggest that two homozygous event lines may prove effective for the breeding of crops with an increased level of free tryptophan content.
Kim, Sun-Young;Kim, Il-Gu;Choi, Seung-Man;Lee, Sang-Min
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.38
no.4
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pp.271-276
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2012
In this study, the dispersion ability of powder in low viscosity solubilization system that depends on variety and amount of additives and powders was investigated. A PMMA powder shows outstanding dispersion ability because of its repulsive force of partially charged chain and low density of porous structure. A sample, which contains salts, showed better dispersion tendency than a sample without any additives. The dispersion ability was quantity of salts dependent. Furthermore, a sample with divalent ion salts, like $MgSO_4$, showed better dispersion tendency than that of monovalent ion salts, like NaCl or KCl. The reason for the better dispersion tendency was due to the existence of ionized salts around the powders which significantly improves repulsive force between powders and consequently reduces powder aggregation. The sample with chelating agent, like EDTA as an additive, had improved dispersion ability. EDTA chelates and blocks metal cation therefore anion's character is maximized and repulsive force between powders is improved. As a result, salts and EDTA help to improve the powder dispersion ability and the stability of product.
To elucidate enzymatic properties of ${\alpha}-galactosidase$ (EC 3, 2, 1, 22) from germinated soybean, changes in the enzyme activities and oligosaccharide contents during germination of soybean were determined. ${\alpha}-Galactosidase$ from germinated soybean was purified by ammonium sulfate fractionation, ion exchange chromatography and gel filtration. Their chemical and enzymatic properties was investigated. ${\alpha}-galactosidase$ activity of sobeam was maximized when it was germinated at $25^{\circ}C$ for 120 hour. Raffinose and stachyose in soybean were decomposed completely after 96 hours and 120 hours of germination, respectively. Soybean ${\alpha}-galactosidase$ was purified by 6.6 fold by ammonium sulfate fractionation, ion exchange chromatography on DEAE-Cellulose and Sephadex A-50, and gel filtration on Sephadex G-150. Its specific activity was 825 Units/mg protein and the yield was 2.5% of the total activity of crude extracts. The purified ${\alpha}-galactosidase$ of soybean was found to be homogeneous by polyacrylamide gel electrophoresis and by HPLC. Isoelectric point of soybean ${\alpha}-galactosidase$ was determined analytical isoelectric focusing to be pH 4.8. The soybean ${\alpha}-galactosidase$ was monomeric and its molecular weight was estimated to be 30,000 by SDS-PAGE. The optimal temperature and pH for the soybeam ${\alpha}-galactosidase$ activity were $40^{\circ}C$ and pH 6.0 and 75% of its activity was lost by heating at $60^{\circ}C$ for 10 min. The enzyme was appeared to have higher affinity to raffinose than to stachyose. The Km value of soybean enzyme was 5.3 mM for ${\rho}-nitrophenyl-{\alpha}-D-galactopyranoside$ and the activation energy on PNPG was calculated to be 13.02 Kcal per mole.
$Amino-{\beta}-lactam$ antibiotics are absorbed by the dipeptide transporter in the small intestine. These uptakes are coupled to a proton influx. The inward proton gradient is partly induced by the $Na^+/H^+$ exchanger and calcium ion is involved in control of this antiport. Interaction between ampicillin which is one of the $Amino-{\beta}-lactam$ antibiotics and nifedipine which is one of calcium channel blocking agents was studied in rats in vivo and with rabbit jejunum mounted on the Sweetana/Grass diffusion cells in vitro. Bioavailability of ampicillin was increased significantly when nifedipine was co-administered orally in rats. There were no differences in the distribution phase and the elimination phase when ampicillin was given either alone or with nifedipine intravenously. Conditions for in vitro experiments were determined. The lift rate of $O_2/CO_2$ gas was controlled to 3 bubbles/sec and ampicillin was stable in the Kreb's buffer at pH 6.0. Absorption of ampicillin was the greatest when the completely-stripped serosal membrane was used. Transport of ampicillin from mucosal to serosal side in the rabbit jejunum was enhanced by 32% in the presence of nifedipine (p=0.059). Above results suggest that nifedipine might increase the plasma level of ampicillin via the improved absorption in the intestine rather than the reduction in the elimination or/and alteration in the distribution.
We have performed a study on the electrochemical characteristics and nuclear ($^7Li$) magnetic resonance of $V_2O_5$ xerogels that have been synthesized by the sol-gel reaction of $V_2O_5$ powder with hydrogen peroxide. NMR measurements revealed that chemical shift of $Li^+$ ions varied as lithium ions were inserted into $V_2O_5$ xerogel and that several different sites for $Li^+$ ions existed in the $V_2O_5$ xerogel structure. The electrochemical properties of the xerogel electrodes did not depend much upon the concentration of $V_2O_5$ and HCl that were used for the synthesis of $V_2O_5$ gels. The specific capacity of $V_2O_5$ xerogels were about 140 mAh/g, similar to that of the xerogels prepared by the ion exchange method.
Seo, Young-Rok;Han, Sung-Sik;Yu, Yong-Man;Lee, Jun-Jae;Ryu, Jae-Chun
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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1996.12a
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pp.70-70
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1996
The cytotoxicological effect of Bt 1-endotoxin, well-known as a bioinsecticide, was investigated on ion channel of insect cell lines. This study attempted to evaluted the specificity by simple experiment to measure the cell swelling using lepidopteran cell lines in isotonic solution containing only one cation. Cell swelling was stimulated in KCI-sucrose isotonic solution as well as TC-100 media containg in solubilized crystal 5-endotoxin. It suggested that the cell swelling by Bt toxin have a relation to K+ channel. The cell swelling may be due to the stimulation K+ influx and simultaneously the penetration of H2O induced by Bt toxin, because the stimulation of swelling was observed with the solubilized toxin in KCI-sucrose isotonic solution, but not in sucrose isotonic solution. Moreover the specific K+ channel blocker, such as 4-arnjnopyrimidine(4-AP) and ouabain, showed the significant effect on the cell swelling induced by Bt toxin. The increasement of the cell swelling induced by 4-AP suggested to be caused by the block of K+ efflux through K+ leak channels. The inhibition of cell swelling by ouabain, which is the well-known inhibitor of Na+, K+-ATPase, suggested to be due to decreasement of K+ influx following diminishment of Na+, K+-ATPase activities.
Black pine barks from the southern region of Korea were extracted using pressurized hot water and the water soluble extracts were then separated in a stepwise fashion using a variety of solvents, column chromatography (CC), thin layer chromatography (TLC), and high pressure liquid chromatography (HPLC). The antioxidant activities of each fraction and the active compounds were determined based on the radical scavenging activities of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), reductive potential of ferric ion, and total phenol contents. A DPPH test showed that the half maximal effective concentration ($EC_{50}$ value : $6.59{\pm}0.31\;{\mu}g/mL$) of the ethyl acetate fraction (ca. 0.67%) was almost the same as that of the control compounds and inversely proportional to the value of the total phenol contents. The cell viability of the water extracts was confirmed by methyl thiazol-2-yl-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) with enzyme linked immune sorbent assay (ELISA). Catechin, epicatechin, quercetin and ferulic acid were isolated from the ethyl acetate fraction as active compounds and identified by nuclear magnetic resonance. The antioxidant activity as value of DPPH of each of the separated compounds was lower than the ethyl acetate fraction, and ferulic acid was the lowest among these compounds.
Some nickel(II) complexes have been derived from the condensation of isonitrosobenzoylacetone and diamine(ethylenediamine and propylenediamine) in the presence of metal ion. It is suggested that an isonitroso group(=N-O) of the ligand coordinates to metal through nitrogen atom to form a five-membered ring while other =N-O coordinates to metal through oxygen atom to form a six-membered ring in Ni(IBN)$_2$-en ((IBA)$_2$-en = N,N'-propylenebis(isonitrosobenzoylacetone imino)). But both isonitroso groups of the ligand coordinate to metal through nitrogen atoms to form five-membered rings in Ni(IBA)$_2$-pn ((IBA)$_2$-pn = N,N'-propylenebis(isonitrosobenzoylacetone imino)).
The effects of enzyme combination, pH, acid washing and enzyme treatment sequence were investigated in the hydrolysis of soy protein. Comparing Alcalase vs. Neutrase/Alcalase, it appeared that Neutrase/Alcalase was more efficient than Alcalase alone, as the highest degree of hydrolysis (DH) was seen in Neutrase/Alcalase. A surprisingly high DH (more than 60%) was observed with Flavourzyme in the second hydrolysis. The separation of insolubles from the first hydrolysis had little effect on the second hydrolysis. When the washing water from the first hydrolysis was reused in the next hydrolysis, the DH and protein recovery were increased. The addition of calcium ion showed not so much positive effects by the stabilization of Neutrase on the Protein hydrolysis. The use of carbohydrase and repeated acid washing gave positive effects on DH. The simultaneous treatment using endoprotease and exoprotease with pH adjustment improved DH significantly.
Bacteriological examination of spring water in Jeju City was conducted. A total of 21 spring water samples were collected from January to April, 2010. During the study period, the range of temperature was 0.6 to $15.4^{\circ}C$, and the results of the analyses showed that hydrogen ion concentrations (pH) for spring water were 0.43 to 7.9. Salinity levels for the samples averaged from 3.0 to 1.64%, and levels of water-dissolved oxygen were 1.85 to 6.06 mg/l. The range of total coliforms in spring water samples at 21 stations located in the designated spring water were <1.8->1,600 MPN/100 ml. Furthermore, the range of geometric means of total coliforms was 9.9-151.6 MPN/100 ml, while the range of fecal coliforms in spring water samples at 21 stations located in the designated spring water area was <1.8->1,600 MPN/100 ml. Finally, the range of geometric mean of fecal coliforms was 3.1-151.6 MPN/100 ml. The level of microbial contamination was examined in 21 samples for indications of bacterial contamination such as heterotrophic bacteria, Escherichia coli O157:H7, Salmonella spp., Vibrio parahaemolyticus, Staphylococcus aureus, and Shigella spp. were frequently detected in the spring water. Salmonella spp., Shigella spp., Vibrio parahaemolyticus, and S. aureus were detected in the range of $0-0.5{\times}10^1$, $0-0.1{\times}10^1$, $0-0.1{\times}10^1$, and $0-0.3{\times}10^1$ CFU/ml, respectively, while E. coli O157:H7 was not detected in the examined spring water samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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