Objectives : The present study was designed to investigate whether Ostericum koreanum (OK) could regulate lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory response in vitro and in vivo. Methods : To evaluate of anti-inflammatory effect of OK, we examined Nitric oxide (NO), proinflammatory cytokines production in LPS-stimulated RAW264.7 cells. Furthermore, we checked molecular mechanism especially in the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and the degradation of inhibitory kappa B a ($Ik-B{\alpha}$) using western blot and also investigated survival of mice in LPS-mediated endotoxin shock. Results : 1. Extract from OK itself have weak cytotoxic effect on RAW264.7 cells. Extract from OK inhibited LPS-induced NO, tumor necrosis $factor-{\alpha}$ ($TNF-{\alpha}$), interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-6 and IL-10 production in RAW264.7 cells. 2. OK inhibited the phosphorylation of MAPKs, such as p38, extracelluar signal-regulated kinase (ERK1/2) and c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) and also the degradation of $I{\kappa}-B{\alpha}$ in the LPS-stimulated RAW264.7 cells 3. OK did not inhibit LPS-induced endotoxin shock. Conclusions : OK down-regulated LPS-induced NO and cytokines production through suppressing activation of MAPKs and degradation of $I{\kappa}-B{\alpha}$. Our results suggested that OK may be a beneficial drug against inflammatory diseases.
Objectives : The purpose of this paper was to investigate the anti-inflammatory effects of extract from Teucrium veronicoides (TV) on the RAW 264.7 cells. Methods : To evaluate of anti-inflammatory of TV, we examined the cytokine productions on lipopolysacchride (LPS)-induced RAW 264.7 cells and also inhibitory mechanisms using Western blot. Furthermore, We examined LPS-induced endotoxin shock. Results : 1. Extract from TV itself does not have any cytotoxic effect. 2. Extract from TV reduced LPS-induced Nitric oxide (NO),interleukin (IL)-1b, IL-6 and IL-10, tumor necrosis factor-a (TNF-a) production in RAW 264.7 cells. 3. TV inhibited the activation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) such as p38, extracelluar signal-regulated kinase (ERK 1/2) and c-Jun NH2-terminal kinase (JNK) and also the degradation of inhibitory kappa B a (Ik-Ba) in the LPS-stimulated RAW 264.7 cells. 3. TV slightly increased the duration of survival after LPS-induced endotoxin shock. Conclusions : TV down-regulated LPS-induced NO and cytokines production, which could provide a clinical basis for anti-inflammatory properties of TV.
Objectives : This study was to investigate the suppression effects of Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) on the monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis in rats. Methods : Arthritis was induced by injection of monosodium iodoacetate(0.5 mg) into the both knee joints of rats. Arthritic rats were divided into control(n=8) and treated(n=8) group. Control group was taken distilled water for 20 days. Treated group was taken extracts of Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) by oraly for same duration. Normal group(n=8) was injected with normal saline and was taken distilled water for 20 days. Macroscopic examination and histopathological study on articular cartilage of knee joint were operated at 20 days after injection. Proteoglycan(PG) content of articular cartilages of knee joint was represented by safranine O staining, was measured at 20 days after injection. Tumor necrosis $factor-{\alpha}(TNF-{\alpha})$, $interleukin-1{\beta}(IL-1{\beta})$, in synovial fluid were measured with enzyme-linked immuno sorbent assay(ELISA) kit at 20 days after injection. Immunohistochemical staining of cyclo-oxygenase-2(COX-2), inducible nitric oxide synthase(iNOS) in knee joints were observed at 20 days after injection. Results : 1. Lymphocytes in peripheral blood the treated group was significantly decreased compared with the control group. 2. PG content in articular cartilage of the treated group was significantly increased compared with the control group. 3. Histopathologically, osteoarthritic scores of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 4. $TNF-{\alpha}$ content in synovial fluid of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 5. COX-2 revelation index in chondrocytes and synovial membrane of the treated group was significantly decreased compared with the control group. 6. Matrix metalloproteinase-3(MMP-3) revelation index in chondrocytes and synovial membrane of the treated group was significantly decreased compared with the control group. Conclusions : On the basis of these results, we concluded that Sopunghwalhyeol-tang(Shufenghuoxie-tang) has inhibiting effects on the $TNF-{\alpha}$, COX-2 and MMP-3 secretion of chondrocytes and synovial membrane in Monosodium Iodoacetate-induced osteoarthritis model of rats.
Wished to examine closely effect that SoPungDoJeokTang-KaMi (SPDJTK) medicines used to atopy dermatitis disease patient get in atopy eruption control experimentally. SPDJTK medicines controlled $CD4^+/IFN-\gamma$, and $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ revelation that an experiment that motive allergy immune reponse because an in vitro experiment stimulates T cells of a NC/Nga mouse same time by anti-CD40/rmIL-4, and interleukin-$1{\beta}$, IL-6, TNF-$\alpha$, and TGF-$\beta$ mRNA outturn that bear in T and B cells decreased remarkably by SPDJTK medicines. Intracellular staining of splenocytes anti-CD40/rmIL-4 plus rmIL-4 stimulated as described in a, assessed after 24 h, SPDJTK exerts a mainly immunosuppressive effect that acts at least partially through suppression of the transcription factor GATA3 expression in $CD4^+$ T cells. Atopic dermatitis (AD) usually develops in patients with an individual or family history of allergic diseases, and is characterized by chronic relapsing inflammation seen specially in childhood, association with IgE hyperproduction and precipitation by environmental factors. However, the exact etiology of AD has been unclear. To further explore the pathogenesis and treatment of AD, a suitable animal model is required. We found that skin lesions, which were clinically and histologically very similar to human AD, mite antigen-induced dermatitis on the face, neck, ears and dorsal skin of inbred NC/Nga mice. Result that Th1 cell and Th2 cell observe to be shifted by cytokine expression with $CD4^+/CD25^+/foxp3^+$ Treg cells induction by SPDJTK medicines could know that SPDJTK medicines can use usefully in allergy autoimmnune diease.
The principal objective of this study was to compare the effects of whole and hydrolyzed cells (bifidobacteria) treated with gastrointestinal digestive enzymes on the activation of cloned macrophages. Seven different strains of Bifidobacterium obtained from swine, chickens, and rats, were digested with pepsin followed by pancreatin and the precipitate (insoluble fraction) and supernatant (soluble fraction) obtained via centrifugation. The RAW 264.7 murine macrophages were incubated with either whole cells, the precipitate, or supernatant at various concentrations. Pronounced increases in the levels of nitric oxide (NO), interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-6, IL-12, and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ were observed in the whole cells and precipitates, but these effects were less profound in the supernatants. The precipitates also evidenced a slight, but significant, inductive activity for NO and all tested cytokines, with the exception of $(TNF)-{\alpha}$ in the macrophage model as compared with the whole cells. By way of contrast, $(TNF)-{\alpha}$ production when cultured with whole cells (100 ng/ml) resulted in marked increases as compared with what was observed with the precipitates. The results of this study indicated, for the first time, that digested Bifidobacterium sp. can induce the production of NO and several cytokines in RAW 264.7 murine macrophage cells. In the current study, it was demonstrated that Bifidobacterium strains treated with digestive enzymes, as compared with whole cells, are capable of stimulating the induction of macrophage mediators, which reflects that they may be able to modulate the gastrointestinal immune functions of the host.
This experimental study was carried out to evaluate the effects of Kimchi intake of Cordyceps sinensis extract (CDSE) supplementation on cytokine-induction and immune response in mice. To study in experiments using male Balb/c mice fed Kimchi and Kimchi of CDSE supplementation (addition of 2% of total Kimchi weight) containing fed experimental diet during 2 weeks. Experimental mice were fed control diet or diet containing freeze-dried Kimchi at the level of 5%(w/w) or 5% freeze-dried Kimchi with 2% CDSE supplementation. The main ingredient of Kimchi was Korean cabbage and fermentation was carried out at $4^{\circ}C$ for three weeks. Freeze-dried 2% CDSE supplementation was added to Kimchi at the beginning of fennentation. In order to investigate the effect of Kimchi intake of CDSE supplementation (5%Kimchi-2%CDSE), the following was performed; body weight, food intake, hematological parameter, serum level of mouse interleukin-4 (mIL-4) and mouse $interferon-{\gamma}$$(mIFN-{\gamma})$, and, the percentage of CD3+/CD4+, CD3+/CD8+, B220+ in splenic cells. The results of final body weight, and food diet intake of two Kimchi groups were lower than those of the control group (not supplemented experimental diet). The hematology change obtained from the level of WBC (white blood cell) and platelet were not affected by feeding different dietary regiments, but the level of RBC (red blood cells) HB (hemoglobin), and spleen weight of two Kimchi groups were increased significantly than those of the control group. The serum level of IL-4 and $IFN-{\gamma}$ of two Kimchi groups were increased significantly than those of the control group, also enhanced the percentages of the CD3+/CD4+ and CD3+/CD8+ by 5% freeze-dried Kimchi, and 5%Kimchi-2%CDSE group were 43.9 and 60.1%, and 96.0 and 174% than those of the control group, respectively. From these results, it can be concluded that Kimchi itself has an immuno-stimulatory effect and Kimchi contaning 2% CDSE supplementation has the more pronounced effect in vivo system.
Ryu, Junghyun;Kim, Minjeong;Ahn, Jin Seop;Ahn, Kwang Sung;Shim, Hosup
한국수정란이식학회지
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제31권1호
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pp.1-7
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2016
Xenotransplantation involves multiple steps of immune rejection. The present study was designed to produce nuclear transfer embryos, prior to the production of transgenic pigs, using fibroblasts carrying transgenes human complement regulatory protein hCD59 and interleukin-18 binding protein (hIL-18BP) to reduce hyperacute rejection (HAR) and cellular rejection in pig-to-human xenotransplantation. In addition to the hCD59-mediated reduction of HAR, hIL-18BP may prevent cellular rejection by inhibiting the activation of natural killer cells, activated T-cell proliferation, and induction of $IFN-{\gamma}$. Transgene construct including hCD59 and ILI-18BP was introduced into miniature pig fetal fibroblasts. After antibiotic selection of double transgenic fibroblasts, integration of the transgene was screened by PCR, and the transgene expression was confirmed by RT-PCR. Treatment of human serum did not affect the survival of double-transgenic fibroblasts, whereas the treatment significantly reduced the survival of non-transgenic fibroblasts (p<0.01), suggesting alleviation of HAR. Among 337 reconstituted oocytes produced by nuclear transfer using the double transgenic fibroblasts, 28 (15.3%) developed to the blastocyst stage. Analysis of individual embryos indicated that 53.6% (15/28) of embryos contained the transgene. The result of the present study demonstrates the resistance of hCD59 and IL-18BP double-transgenic fibroblasts against HAR, and the usefulness of the transgenic approach may be predicted by RT-PCR and cytolytic assessment prior to actual production of transgenic pigs. Further study on the transfer of these embryos to surrogates may produce transgenic clone miniature pigs expressing hCD59 and hIL-18BP for xenotransplantation.
Avascular necrosis of the femoral head (ANFH) is commonly observed in patients treated with excessive glucocorticoid (GC). Single administration of lipopolysaccharide (LPS) has shown to induce immune stimulatory factors. However, the effect of repeated administration of LPS on GC-induced ANFH has not been studied. Thus, the purpose of this study was (i) to examine the cytokine profile induced by repeated LPS administrations and (ii) to test the effect of repeated LPS treatments on GC-induced ANFH. A mouse necrosis model of ANFH was designed by chronic GC administration with co-treatment of LPS. Mice body weights in the LPS/prednisolone (PDN) co-treated group were lower than that of the untreated control group, but spleen weights were greater than the control group. The levels of IL-6, $TNF{\alpha}$, and IL-33 in the liver and spleen of the LPS/PDN group were lower than the untreated control group, whereas $TNF{\alpha}$ level in the femoral head of the LPS/PDN group increased. Collectively, the effect of repeated LPS on the pathogenesis of GC-induced ANFH was associated with the $TNF{\alpha}$ level in the femoral head, but the pathogenesis did not correspond to cytokine levels in immune tissues.
Saprolegniasis is one of the most devastating oomycete diseases in freshwater fish which is caused by species in the genus Saprolegnia including Saprolegnia parasitica. In this study, we isolated the strain of S. parasitica from diseased rainbow trout in Korea. Morphological and molecular based identification confirmed that isolated oomycete belongs to the member of S. parasitica, supported by its typical features including cotton-like mycelium, zoospores and phylogenetic analysis with internal transcribed spacer region. Pathogenicity of isolated S. parasitica was developed in embryo, juvenile, and adult zebrafish as a disease model. Host-pathogen interaction in adult zebrafish was investigated at transcriptional level. Upon infection with S. parasitica, pathogen/antigen recognition and signaling (TLR2, TLR4b, TLR5b, NOD1, and major histocompatibility complex class I), pro/anti-inflammatory cytokines (interleukin $[IL]-1{\beta}$, tumor necrosis factor ${\alpha}$, IL-6, IL-8, interferon ${\gamma}$, IL-12, and IL-10), matrix metalloproteinase (MMP9 and MMP13), cell surface molecules ($CD8^+$ and $CD4^+$) and antioxidant enzymes (superoxide dismutase, catalase) related genes were differentially modulated at 3- and 12-hr post infection. As an anti-Saprolegnia agent, plant based lawsone was applied to investigate on the susceptibility of S. parasitica showing the minimum inhibitory concentration and percentage inhibition of radial growth as $200{\mu}g/mL$ and 31.8%, respectively. Moreover, natural lawsone changed the membrane permeability of S. parasitica mycelium and caused irreversible damage and disintegration to the cellular membranes of S. parasitica. Transcriptional responses of the genes of S. parasitica mycelium exposed to lawsone were altered, indicating that lawsone could be a potential anti-S. parasitica agent for controlling S. parasitica infection.
본 연구는 고사리 및 취나물과 같은 산채가 첨가된 된장 및 일반 된장의 면역 활성을 비교하기 위하여 선천면역계의 대표적인 세포인 대식세포와 적응면역계에서 중추적인 역할을 수행하는 비장세포에 각각 산채첨가 된장 추출물(WPDJ) 및 일반 된장(DJ) 추출물을 처리하여 각각의 면역세포의 세포증식률과 사이토카인 분비능에 미치는 영향에 관하여 측정하여 보았다. 대식세포 및 비장세포에 WPDJ 및 DJ를 125, 250 및 $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리하였을 때 두 추출물 모두 대식세포 및 비장세포에 대한 세포독성을 유발하지 않았으며, 농도 의존적으로 세포증식률을 증가시키는 것으로 관찰되었다. 대식세포의 사이토카인의 분비능에 관하여 알아본 결과 WPDJ 처리구에서 더 높게 증가하는 것으로 관찰되었다. 또한 마우스 비장에서 유리된 비장세포에 WPDJ 및 DJ를 125, 250 및 $500{\mu}g/mL$의 농도로 처리하였을 때 Th1 type의 사이토카인인 IL-2와 IFN-${\gamma}$의 분비능은 유의적으로 증가한 반면, 알레르기를 유도하는 것으로 알려진 Th2 type의 사이토카인인 IL-4의 생성에는 영향을 미치지 않는 것으로 관찰되었다. 따라서 산채를 첨가하여 제조한 된장은 일반 된장보다 면역 활성을 더 높게 증가시키는 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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