식물-미생물 상호작용에 관한 연구의 일부로 식물 병저항성 단백질로 간주되는 키틴분해효소(Chitinase, EC 3.2.1.14)의 식물 세포간액에의 분포와 유도를 몇가지 조건에서 연구하였다. 강낭콩과 대두의 잎에서 병원균, 상처, 에틸렌 등의 스트레스 조건에서 유도되는 endochitinase 가운데 강낭콩에서는 34 kD chitinase가, 대두에서는 30 kD와 36 kD chitinase가 뚜렷이 세포간극에 축적되었다. 스트레스 조건에서 시간이 경과함에 따라 이들의 세포간극에 축적되는 양은 많아졌다.
The aim of this study was to investigate the effect of resveratrol on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes. Anti-oxidative activity of resveratrol was measured by $\alpha,\alpha$-diphenyl-$\beta$-picrylhydrazyl assay and dichlorodihydrofluorescein diacetate oxidation assay. Gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes was assessed using the scrape loading/dye transfer technique. Western blots and reverse transcription-polymerase chain reaction were also analyzed for connexin 43 protein and mRNA expression, respectively. Resveratrol scavenged directly the stable $\alpha,\alpha$-diphenyl-$\beta$-picrylhydrazyl radical over a concentration range of 4 mg/ml ($78.2{\pm}2.7$% of control) to 500 mg/ml ($29.9{\pm}4.2$% of control) and decreased the intracellular reactive oxygen species induced by ultraviolet A (UVA) irradiation ($89.3{\pm}1.1$% of UVA group), ultraviolet B (UVB) irradiation ($70.9{\pm}1.7$% of UVB group) and 12-0-tet-radecanoylphorbol-13-acetate (TPA, $48.3{\pm}1.1$% of TPA group), respectively. UVA irradiation and TPA markedly reduced gap junctional intercellular communication, which was restored by resveratrol. There were no significant differences in the level of connexin 43 protein and mRNA expression among any of the experimental groups. Our data suggests that resveratrol has the protective effect on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocytes, and this protection is likely due to the scavenging of reactive oxygen species.
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.65-65
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2003
The aim of this study was to investigate the effect of resveratrol on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication (GJIC) in HaCaT keratinocyte. Anti-oxidative activity of resveratrol was measured by a,a-diphenyl-b-picrylhydrazyl (DPPH) assay and dichlorodihydrofluorescein diacetate oxidation assay. GJIC of HaCaT keratinocyte was assessed using the scrape loading/dye transfer technique. Western blots and reverse transcription-polymerase chain reaction were also analyzed for Connexin 43 protein and mRNA expression, respectively. Resveratrol scavenged directly the stable DPPH radical over a concentration range of 4 mg/$\mell$ (78.2 $\pm$ 2.7% of control) to 500 mg/$\mell$ (29.9 $\pm$ 4.2% of control) and prevent to increase the intracellular fluorescence induced by oxidative stress significantly. Ultraviolet A irradiation (UVA) and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate markedly reduced GJIC, which was restored by resveratrol. There were no significant differences in the level of Connexin 43 protein and mRNA expression among any of the experimental groups. Our data suggests that resveratrol has the protective effect on the oxidative stress-induced inhibition of gap junctional intercellular communication in HaCaT keratinocyte and this protection is likely due to the scavenging of reactive oxygen species.
Collective cell migration is a fundamental phenomenon observed in various biological processes such as development, wound healing, and cancer metastasis. During the collective migration, cells undergo changes in their phenotypes from those of stable to the migratory state via the process called epithelial-mesenchymal transition (EMT). Recent findings in biology and biochemistry have shown that EMT is closely related to the cancer invasion or metastasis, but not much of the correlations in kinematics and physical forces between the neighboring cells are known yet. In this study, we aim to understand the cell migration and stress distribution within the expanding cell cluster. We constructed the in vitro cell cluster on the hydrogel, employed traction force microscopy (TFM) and monolayer stress microscopy (MSM) to visualize the physical forces within the expanding cell monolayer. During the expansion, cells at the cluster edge exhibited enhanced motility and developed focal adhesions that are the essential features of EMT while cells at the core of the cluster maintained the epithelial characteristics. In the aspect of mechanical stress, the cluster edge had the highest traction force of ~90 Pa directed toward the cluster core, which means that cells at the edge actively pull the substrate to make the cluster expansion. The cluster core of the tightly confined cells by neighboring cells had a lower traction force value (~60 Pa) but the highest intercellular normal stress of ~800 Pa because of the accumulation of traction from the edge of the monolayer.
Cellular jamming phenomenon, defined as a kinetic arrest, is a commonly observed event in dense cell aggregates in epithelial tissues. Cells lose their motility when the density of the cell population becomes too high. Yet, not much is known about how the jamming occurs and how it influences individual cells in the population. In this study, we investigated the mechanisms during the formation of the jammed state by visualizing various dynamic components such as velocity, traction, and intercellular stress. The visualized properties exhibited interrelated features in similar time domains that can be categorized into specific stages, namely migrating, transitional and steady state. During the migrating stage, cells generated spatially correlated tractions and migrations at the collective migration step and lost these properties becoming a transitional stage. These stepwise analyses presented correlative components which are expected to adjust for explaining the detailed mechanisms of cellular jamming.
Harada, Takanori;Takeda, Makio;Kojima, Sayuri;Tomiyama, Naruto
Toxicological Research
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제32권1호
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pp.21-33
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2016
Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) is still used in certain areas of tropics and subtropics to control malaria and other insect-transmitted diseases. DDT and its metabolites have been extensively studied for their toxicity and carcinogenicity in animals and humans and shown to have an endocrine disrupting potential affecting reproductive system although the effects may vary among animal species in correlation with exposure levels. Epidemiologic studies revealed either positive or negative associations between exposure to DDT and tumor development, but there has been no clear evidence that DDT causes cancer in humans. In experimental animals, tumor induction by DDT has been shown in the liver, lung, and adrenals. The mechanisms of hepatic tumor development by DDT have been studied in rats and mice. DDT is known as a non-genotoxic hepatocarcinogen and has been shown to induce microsomal enzymes through activation of constitutive androstane receptor (CAR) and to inhibit gap junctional intercellular communication (GJIC) in the rodent liver. The results from our previously conducted 4-week and 2-year feeding studies of p,p'-DDT in F344 rats indicate that DDT may induce hepatocellular eosinophilic foci as a result of oxidative DNA damage and leads them to hepatic neoplasia in combination with its mitogenic activity and inhibitory effect on GJIC. Oxidative stress could be a key factor in hepatocarcinogenesis by DDT.
현대인들에게는 다양한 증상과 징후를 나타내는 스트레스성 질환이 증가되고 있는 추세에 있다. 이러한 스트레스 시에 구강 내에는 구강건조이나 구강작열감증후군, 구강점막질환, 구취 등이 호발 된다는 것은 이미 널리 알려진 사실이다. 이때 대부분의 환자에서 공통적으로 나타나는 현상은 타액선의 기능적 및 구조적 변화에 따른 타액성분의 변화이다. 이에 저자는 스트레스가 구강 내 타액선에 어떠한 영향을 미치며, 타액선으로부터 분비되는 ${\alpha}$-amylase에 어떠한 영향을 미치는지를 알아보고자 본 실험을 시행한 결과 다음과 같은 유의성 있는 결과를 얻었다. 1. 구속 스트레스에 의하여 타액선 조직은 선포세포가 공포화되며 변성되었고, 선포간극이 이개되었으며, 도관주위조직도 변성되었다. 2. 구속 3시간 후에는 선포세포가 위축되기 시작하였고, 구속 6시간 후에는 선포 간 이개현상이 관찰되었으며, 구속 72시간 후에는 도관 주위 조직도 변성되기 시작하였고, 점차 심화되어 구속 168시간 후에는 선포와 도관 주위조직이 모두 심하게 변성되었다. 3. 면역조직화학적 검사에서 구속 3시간 후에는 amylase의 발현이 부분적으로 불규칙하게 관찰되었으며, 구속 6시간 후에는 다소 감소되었고, 구속 12시간 후에는 amylase가 부분적으로 응집되었으며, 점차 감소되고 응집되어, 구속 48시간 후에는 전 타액선에 amylase의 응집현상이 심화되었고, 구속 168시간 후에는 amylase의 발현이 매우 감소되었다. 이상의 결과를 바탕으로 정서적인 스트레스를 받으면 타액선이 변성될 수 있으며, 타액선으로부터 분비되는 중요한 소화 효소인 amylase가 변화되어 소화 장애를 일으키거나 구강건강과 관계없이 구취발생에도 영향을 미칠 수 있다고 예측할 수 있어, 향후 amylase의 분비변화에 따른 지속적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.
식물이 가장 쉽게 노출되는 환경적 위험은 수분 스트레스이다. Abscisic acid (ABA)는 환경 스트레스에 적응하기 위해 식물에서 생성되는 식물 호르몬이다. 식물에서 기공의 가장 중요한 역할은 광합성 활성에 크게 영향을 주는 CO2를 흡수하여 슈크로스의 합성을 활발하게 유도하는 것이다. 또한 기공은 증산작용을 통해 H2O를 방출하는 통로이며, 식물의 뿌리가 토양에서 물과 무기 물질을 지속적으로 흡수할 수 있도록 수분퍼텐셜의 기울기를 형성하는 기능을 한다. 식물은 수분 스트레스 환경에 노출되면, 기공을 닫아 수분 손실을 최소화하는 메커니즘을 가진다. 환경에 따른 기공 닫힘 메커니즘들과 관련하여 가장 잘 밝혀진 가설은 수분 스트레스에 대한 기공 반응이다. 식물이 충분한 수분을 공급받은 상태일 때, 기공은 일주기 리듬에 따라 낮에는 열리고 밤에는 닫힌다. 또한 세포간극 안에 CO2 농도가 증가하면 기공이 닫힌다. 그러나 일주기 리듬과 세포간극 안의 CO2 농도 증가로 인한 기공 닫힘 메커니즘은 명확하게 알려져 있지 않다. 식물이 수분 스트레스에 놓이면, 공변세포 세포질의 ABA 농도 증가는 동일한 세포질 내에 Ca2+ 농도 증가를 유도하여 원형질막에서 탈분극이 발생한다. 그 결과, 액포막에 있는 외향성 K+-채널과 느린 음이온 채널들인 SLAC1, SLAH3가 활성화되어 K+, Cl-, 그리고 malate2-를 방출하여 기공이 닫히는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 논문은 수분 스트레스로 인한 기공 닫힘 메커니즘에 대하여 조사하였다.
Park, Jae-Hoon;Lee, Jung-Min;Kim, Eui-Joo;You, Young-Han
Journal of Ecology and Environment
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제46권3호
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pp.161-171
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2022
Background: Epilobium hirsutum L. is designated as an endangered plant in South Korea located in Asia, due to the destruction of its habitats through the development of wetlands. Therefore, in this study, in order to find a light condition suitable for the growth and ecophysiological responses of Epilobium hirsutum L., those of this plant under treatment with various light qualities in a smart farm were measured. Results: In order to examine the changes in the physiological and growth responses of Epilobium hirsutum L. according to the light qualities, the treatment with light qualities of the smart farm was carried out using the red light: blue light irradiation time ratios of 1:1, 1:1/2, and 1:1/5 and a red light: blue light: white light irradiation time ratio of 1:1:1. As a result, the ecophysiological responses (difference between leaf temperature and atmospheric temperature, transpiration rate, net photosynthetic rate, intercellular CO2 partial pressure, photosynthetic quantum efficiency) to light qualities appeared differently according to the treatments with light qualities. The increase in the blue light ratio increased the difference between the leaf temperature and the atmospheric temperature and the photosynthetic quantum efficiency and decreased the transpiration rate and the intercellular CO2 partial pressure. On the other hand, the white light treatment increased the transpiration rate and intercellular CO2 partial pressure and decreased the temperature difference between the leaf temperature and the ambient temperature and photosynthetic quantum efficiency. Conclusions: The light condition suitable for the propagation by the stolons, which are the propagules of Epilobium hirsutum L., in the smart farm, is red, blue and white mixed light with high net photosynthetic rates and low difference between leaf temperature and atmospheric temperature.
Background: This study aimed to investigate out the influence of drought stress on the physiological responses of Dendropanax morbifera seedlings. Methods and Results: Drought stress was induced by discontinuing water supply for 30 days. Under drought stress, photosynthetic activity was significantly reduced with decreasing soil water content (SWC), as revealed by the parameters such as Fv/Fm, maximum photosynthetic rate ($P_{N\;max}$), stomatal conductance ($g_s$), stomatal transpiration rate (E), and intercellular $CO_2$ concentration (Ci). However, water use efficiency (WUE) was increased by 2.5 times because of the decrease in $g_s$ to reduce transpiration. Particularly, E and $g_s$ were remarkably decreased when water was withheld for 21 days at 6.2% of SWC. Dendropanax morbifera leaves showed osmotic adjustment of -0.30 MPa at full turgor and -0.13 MPa at zero turgor. In contrast, the maximum bulk modulus of elasticity ($E_{max}$) did not change significantly. Thus, Dendropanax morbifera seedlings could tolerate drought stress via osmotic adjustment. Conclusions: Drought avoidance mechanisms of D. morbifera involve reduction in water loss from plants, through the control of stomatal transpiration, and reduction in cellular osmotic potential. Notably photosynthetic activity was remarkably reduced, to approximately 6% of the SWC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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