• 제목/요약/키워드: Inoculation method

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Tuberculin에 관한 연구(硏究) - (2) 항원감작적혈구응집반응(抗原感作赤血球凝集反應)에 의한 결핵사균면역(結核死菌免疫) Guinea pig 혈제(血濟)의 적혈구응집(赤血球凝集) 항체가(抗體價) 소장(消長) (Studies on the Tuberculin - 2) Serological observation of hemagglutinating antibody in guinea pigs sensitized with heat killed tubercle bacilli)

  • 김정규
    • 대한미생물학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.41-48
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    • 1970
  • In order to assay one lot of the potency of tuberculin for intradermic use, four guinea pigs sensitized with heat killed M. tuberculosis were used by the method originally of the Agriculture Research Service Center(A. R. S.) and Bureau of Animal. Industry(B. A. I.) in the United. States of America in which guinea pigs were used on 21st day after sensitization. There is doubt whether the guinea pigs are sensitized or not. Therefore, this study has taken the method of Middle Brook-Dubos hemagglutination test, and observed the humoral hemagglutinating antibody in the blood. The results obtained are as follows. 1. The maximum titer of hemagglutinating antibody was demonstrated 30days after sensitizing the guinea pigs with killed tubercle bacilli. The maximum titer was continued for a period of 45 days and thereafter declined gradually. 2. The swelling and redness of the region of the sensitized guinea pigs was shown to be reached to the maximum size within 24 hours after intradermal inoculation with HCSM tuberculin and gradually reduced 96 hours after inoculation. The swelling and redness could not be detected by macro-observation after 14 days.

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반고상 A356 합금 슬러리의 미세조직에 따른 유동특성에 관한 연구 (Effects of Microstructure Morphology on Fluid Flow Characteristics of A356 Commercial Alloy in Semi-Solid Slurry)

  • 김재민;이승훈;홍준표
    • 한국주조공학회지
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    • 제25권6호
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    • pp.240-248
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    • 2005
  • The rheocasting characteristics are strongly influenced by the microstructural morphology such as particle size, form factor and contiguity. In this study, the effect of structural morphology on fluid flow characteristics of A356 semi-solid alloy was investigated with a vacuum suction fluidity test. Semi-solid metal slurry was made by the mechanical stirring, the liquidus casting, and H-NCM to be analysed. H-NCM could obtain uniform and fine globular microstructures of 0.9 form factor and 55 ${\mu}m$ particle size. Inoculation was found to be effective for reducing particle size, however, for H-NCM it should be avoided due to the cause of increasing contiguity. The fluidity test indicated that the non-stirring method had higher fluidity and smaller liquid segregation in the same solid faction of 0.4 than the stirring method, for smaller particle size and higher form factor. It was observed that liquid segregation decreased as the particle size is smaller and form factor is higher. The results of die-casting experiment were a good agreement with those of fluidity test.

느타리 팽나무버섯 재배에서 액체종균 배양 및 접종시스템 적용방법의 구명 (Production of Pleurotus ostreatus and Flammulina velutipes Using Liquid Spawn Inoculation System)

  • 홍성준;이원호;신범수;성재모
    • 한국균학회지
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    • 제31권1호
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    • pp.22-27
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    • 2003
  • 본 연구에서는 병 재배 버섯 안정생산을 위한 우량종균확보 방법으로서 액체종균을 활용하고자 하였으며 액체종균을 버섯재배에 효율적으로 사용할 수 있는 접종방식 및 접종장치를 개발하였다. 느타리 및 팽나무버섯의 대량 액체배양의 조건은 팽나무버섯은 접종량 $5{\sim}6%$, 배양기간 4일 일 때, 그리고 느타리버섯은 접종량 $5{\sim}6%$, 배양기간 5일에서 최대 균사생장을 확인 할 수가 있었다. 자동접종시스템을 이용하여 균사생장 및 자실체 생산에 대한 조사를 실시한 결과, 느타리버섯의 경우 자실체 생산에서는 접종량 6%, 즉 15ml 에서 수량이 높게 나타났다. 팽나무버섯은 접종량 $4{\sim}6%$, 즉 $10{\sim}15ml$에서 자실체 수량이 다른 조건에 비해 우수하게 나타났다. 액체종균 자동접종시스템을 이용하는 것이 고체종균 접종시스템보다 느타리버섯은 33.7%, 팽나무버섯은 32.8% 증수효과를 확인할 수 가 있었다. 작업성능의 평가를 위해 $4{\times}4$배열의 병 재배용 tray 75개를 이용하여 병의 뚜껑을 제대로 열고 닫지 못하는 경우, 분사가 안되는 경우 등의 오동작은 없었고 작업시간은 26분으로 단축되었다.

Bacillus subtilis와 Lactobacillus plantarum의 혼합배양이 청국장의 품질에 미치는 영향 (Effect of the Mixed Culture of Bacillus subtilis and Lactobacillus plantarum on the Quality of Cheonggukjang)

  • 주경은;오남순
    • 한국식품과학회지
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    • 제41권4호
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    • pp.399-404
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    • 2009
  • B. subtilis 균주와 L. plantarum 균주를 혼합배양하여 청국장을 제조할 때 나타나는 여러 가지 품질에 영향을 주는 인자들을 분석하고 평가하였다. B. subtilis 균주와 L. plantarum을 혼합배양할때 L. plantarum의 생육은 잘 되지 않는다. 따라서 혼합배양시 L. plantarum의 생육을 증가시키기 위하여 먼저 L. plantarum을 배양하고, 일정시간이 경과된 후에 B. subtilis를 접종하면 L. plantarum의 생균수가 $2{\times}10^7$ CFU/g에서 48시간 후에 $6{\times}10^8$ CFU/g까지 증가하였다. 혼합배양시 L. plantarum의 생육을 촉진시키는 또 다른 방법으로 B. subtilis의 초기 접종량을 $3.9{\times}10^2$CFU/g, L. plantarum의 접종량을 $2{\times}10^7$ CFU/g으로 조절하여 동시에 접종하였을 때 24시간 배양 후 B. subtilis의 생균수는 $9{\times}10^8$ CFU/g까지 증가하였으며 L. plantarum의 생균수도 $2{\times}10^7$ CFU/g에서 $6{\times}10^8$ CFU/g으로 증가하였다. 즉, 배양방법의 최적화를 통하여 B. subtilis균주와 L. plantarum 균주의 생육을 성공적으로 유도할 수 있었다. 본 연구의 결과로부터 L. plantarum의 생균수가 증가된 청국장의 아미노태 질소함량은 단일균주를 사용하여 제조한 청국장과 유사하였으며, 암모니아 불쾌취가 적었으며, 풍미와 전체적인 기호도에서 높은 점수를 얻었다. 이러한 결과를 바탕으로 청국장 제조시 L. plantarum 균주를 혼합배양함으로써 기존 청국장의 이취 개선과 품질향상에 기여할 것으로 생각된다.

효율적인 무 시들음병 저항성 검정법 개발 및 무 품종들의 병 저항성 평가 (Development of Effective Screening Method and Evaluation of Radish Cultivars for Resistance to Fusarium oxysporum f. sp. raphani)

  • 백송이;김진철;장경수;최용호;최경자
    • 식물병연구
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    • 제16권2호
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    • pp.148-152
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    • 2010
  • 무 시들음병에 대한 저항성 검정법을 확립하기 위하여 접종 방법, 침지 시간, 접종원 농도 등의 발병 조건에 따른 '송백무'(감수성)와 '토광무'(중도저항성)의 무 시들음병 발생을 조사하였다. 이병토 접종법, 관주 접종법과 뿌리 침지법 등의 접종 방법에 따른 무 시들음병 발생을 실험한 결과, 이병토 접종법과 관주 접종법에 의해서는 무시들음병이 발생하지 않았다. 뿌리 침지법의 경우, 뿌리 상처 처리구는 무상처 처리구보다 무 시들음병이 더 많이 발생하였으며, 무상처 처리구에서 두 품종의 무 시들음병 발생은 차이를 나타냈다. 뿌리를 포자현탁액에 침지하는 시간(1시간~24시간)에 따른 무 시들음병 발생은 모든 처리구에서 높은 병 발생을 보였으며, 접종 시간이 증가하여도 무 시들음병 발생은 증가하지 않았다. 그러나 포자현탁액의 포자 농도가 증가함에 따라 무 시들음병 발생은 증가하였다. 위의 결과를 이용하여 시판 무 41종 품종의 시들음병 저항성 정도를 검정하였다. 온실에서 14일 재배한 무의 뿌리를 $1.0{\times}10^7$ conidia/ml의 포자현탁액에 2시간 동안 침지하여 실험한 결과, 6종 품종(15%)은 저항성, 22종 품종(53%)은 중도저항성 그리고 13종 품종(32%)은 감수성을 보였다.

Improving Pneumovirus Isolation Using a Centrifugation and AZD1480 Combined Method

  • Lee, Hansaem;Woo, Hye-Min;Kim, Kisoon;Park, Sehee;Park, Man-Seong;Kim, Sung Soon;Kim, You-Jin
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제29권12호
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    • pp.2006-2013
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    • 2019
  • The isolation of respiratory viruses, especially from clinical specimens, often shows poor efficiency with classical cell culture methods. The lack of suitable methods to generate virus particles inhibits the development of diagnostic assays, treatments, and vaccines. We compared three inoculation methods, classical cell culture, the addition of a JAK2 inhibitor AZD1480, and centrifugation-enhanced inoculation (CEI), to replicate human respiratory syncytial virus (HRSV) and human metapneumovirus (HMPV). In addition, a combined method using AZD1480 treatment and CEI was used on throat swabs to verify that this method could increase virus isolation efficiency from human clinical specimens. Both CEI and AZD1480 treatment increased HRSV and HMPV genome replication. Also, the combined method using CEI and AZD1480 treatment enhanced virus proliferation synergistically. The combined method is particularly suited for the isolation of interferon-sensitive or slowly growing viruses from human clinical specimens.

박 덩굴쪼김병 저항성 검정조건 구명 (Determination of an Effective Method to Evaluate Resistance of Bottle Gourd Plant to Fusarium oxysporum f. sp. lagenaria)

  • 김상규;이옥진;이선이;김대영;허윤찬;안세웅;장윤아;문지혜
    • 생물환경조절학회지
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    • 제29권1호
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    • pp.96-102
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    • 2020
  • Fusarim oxysporum에 의한 덩굴쪼김병은 수박 재배에 큰 피해를 일으키는 중요한 병이다. 이 병을 방제하기 위해 덩굴 쪼김병 저항성 박 대목을 이용하는 것이 가장 좋은 방법이다. 본 연구는 박 덩굴쪼김병 저항성 자원을 선발할 수 있는 방법을 확립하기 위해 수행하였다. 효과적인 접종법을 개발하기 위해 접종 후 온도(15, 20, 25, 30℃), 접종 농도(1 × 105, 5 × 105, 1 × 106, and 5 × 106 conidia·mL-1), 접종 시기(파종 7, 10, 13, 16일 후)를 조사하였다. 박 덩굴쪼김병을 접종하였을 때 접종 후 배양 온도나 파종 후 접종 시기의 영향이 적었다. 그러나, 덩굴쪼김병에 저항성인 박의 경우 접종농도가 높을수록 발병이 심하게 나타났다. 따라서, 박 덩굴쪼김병에 대한 효과적인 접종법으로 파종 10일 된 유묘 뿌리를 1 × 105 - 1 × 106 conidia·mL-1 농도로 30분간 접종한 후 감염되지 않은 토양에 옮겨 심고 25℃에서 3주 동안 재배하는 것을 제안한다.

참깨발병 품종저항성 검정방법 연구 (An Evaluation Method for Sesame (Sesamum indicum L.) Resistance to Phytophthora nicotianae var. parasitica)

  • Seong Ho, Choi;Eui Kyoo, Cho;Young Am, Chae
    • 한국작물학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.173-180
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    • 1987
  • 본 시험은 참깨 발병(병원균 : Phytophthora nicotianae var. parasitica)에 대한 품종저항성 검정방법 확립을 위해 실시하였다. 공식작물의 묘령, 접종방법, 토양수분상태 및 접종원의 농도는 공시한 중도저항성계통 B-67, IS 103과 나병성계통 수원9호, 수원 2006 모두의 병진전속도와 발병심도에 영향을 주는 것으로 나타났다. 그러나, 파종후 20일된 유묘에 1 $m\ell$당 200개 포자상의 접종원을 폿트(8$\times$16.7$\times$7.2cm)당 10$m\ell$씩 토양표면에 접종한 후 저면관수로 토양수분을 포화상태로 유지하였을 때 계통간 저항성의 차이를 갈 볼 수 있었다. 묘령 70일의 성묘를 사용하였을 때는 토양접종을 하였을 때나 분무접종을 하였을 때 모두 계통간 저항성 차이를 잘 볼 수 있었다. 전술한 유묘검정방법에 의해 이병성계통인 수원2006는 이병주율로는 100%, 발병심도로는 최대치인 9.0을 보였다. 반면에 중도저항성계통인 B- 67은 이병수율로는 20%, 발병심도로는 1.7을 보였다. 발병심도는 0에서 9까지 지수화하여 나타내었다. 예를 들면, 발병심도 0은 병징이 없는 상태, 5는 지면부 줄기가 변색된 경우, 9는 잎마름증상과 함께 줄기변색이 지면부로 부터 10cm 이상인 경우이다. 품종간 저항성의 차이는 병총면적률로도 조사를 하였으며, 이 결과는 발병심도로 조사한 검정결과와 잘 일치하였다.

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콩균핵마름병균에 대한 병원성 검정법 확립 (Establishment of Pathogenicity Test Method for Macrophomina phaseolina Causing Soybean Charcoal Rot)

  • 안소현;김흥태
    • 식물병연구
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    • 제29권1호
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    • pp.1-10
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    • 2023
  • 콩 균핵마름병을 일으키는 Macrophomina phaseolina의 병원성 평가를 위하여 실험실과 온실 검정법을 확립하였다. 실험실 검정에서는 소립균핵과 균사를 접종원으로 사용하였다. 소립균핵을 접종원으로 사용한 실험실 검정에서 M. phaseolina NSW17-108과 HSM17-034의 발병도는 25℃보다 35℃에서 더 높았다. NSW17-108과 HSM17-034 중에서 참깨에서 분리된 HSM17-034의 발병도가 콩에서 분리된 NSW17-108보다 높았다. M. phaseolina의 균사를 접종원으로 사용한 경우, NSW17-108과 HSM17-034는 35℃에서의 발병도가 접종 5일 만에 80%를 상회하였다. HSM17-034는 25℃에서의 발병도가 접종 5일 후에 80%를 상회하였다. 온실의 병원성 검정에는 소립균핵이 형성된 이쑤시개 또는 potato dextrose agar 배지에서 수확한 소립균핵 자체를 접종원으로 사용하였다. 모든 온실 검정에서 M. phaseolina NSW17-10과 HSM17-034는 접종 방법에 따라 병원균을 접종하고 35-65일 후에 40-60%의 발병도를 보였다. 두 균주 중에서 HSM17-034의 병원성이 NSW17-108보다 강했으며, 이 결과는 실험실 검정 결과와 일치하였다. 본 연구에서 확립한 실험실 및 온실 검정법은 각 방법에 따라 장단점이 있기 때문에, 연구의 목적에 부합할 수 있는 시험법을 선택하여 사용하는 것이 필요하다.

96-well microplate를 이용한 Trichophyton Rubrum의 항진균제 감수성검사 (Antimycotic Susceptibility Testing of Trichophyton Rubrum by Microculture Method)

  • 이무웅;김종철;최종수;김기홍
    • Journal of Yeungnam Medical Science
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    • 제9권2호
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    • pp.396-406
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    • 1992
  • 저자들은 Granade와 Artis의 방법에 따라 96-well microplate와 24-well macroplate를 이 용하여 T. rubrum 9주를 대상으로 경구용 항진균제인 ketoconazole과 itraconazole에 대한 MIC를 측정하여 실제 임상사용 가능성을 알아보고 배양온도, 배양용기의 크기, 배지의 종류를 달리하여 MIC에 영향을 줄 수 있는 요소를 점검하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 96-well microplate를 사용하여 $25^{\circ}C$에서 배양시 균농도에 따른 판독시기의 차이는 높은 균농도(흡광도 2.0, 1.0)에서는 4일만에, 낮은 균농도(흡광도 0.5, 0.25)에서는 6-8일만에 판독할 수 있었고, MIC는 높은 균농도에서 높았으나 시간이 경과시 점차 차이가 줄어들었다. 2. $37^{\circ}C$$25^{\circ}C$에서 각각 배양시 배양온도에 따른 MIC의 차이는 96-well microplate를 사용하여 $37^{\circ}C$에서 배양시 ketoconazole에 대한 MIC는 0.006이하-$0.04{\mu}g/ml$, itraconazole에 대한 MIC는 0.006이하-$0.04{\mu}g/ml$였으며 $25^{\circ}C$에서의 ketoconazole에 대한 MIC는 0.08-$5.68{\mu}g/ml$, itraconazole에 대한 MIC는 0.006-$0.71{\mu}g/ml$$37^{\circ}C$에서의 MIC는 $25^{\circ}C$에서의 MIC에 비해 현저히 낮았다. 3. 24-well microplate와 96-well microplate에서 각각 배양시 배양용기의 크기에 따른 판독시기는 96-well microplate 액체배지에서는 4-6일로 24-well macroplate 액체배지에서의 8-12일에 비해 판독시기가 빨랐으나, MIC의 차이는 없었다. 4. 액체배지와 고체배지에서 배양시 배지종류에 따른 MIC의 차이는 액체배지를 함유한 24-well macroplate를 이용한 경우 ketoconazole에 대한 MIC는 0.006이하-$5.68{\mu}g/ml$, itraconazole에 대한 MIC는 0.006 이하-$0.36{\mu}g/ml$였고 고체배지에서는 ketoconazole에 대한 MIC는 0.006이하-$5.68{\mu}g/ml$, itraconazole에 대한 MIC는 0.006 이하-$5.68{\mu}g/ml$로 고체배지에서의 MIC가 다소 높게 측정되었다. 5. 이상의 결과를 종합하여 볼때 96-well microplate를 사용하여, 흡광도 1.0의 균농도로 접종하여, $25^{\circ}C$에서 배양 후 5-6일째 육안으로 판독하는 것이 항진균제 감수성 검사를 빠르고 간편하게 실시 할 수 있는 방법이다.

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