Avian influenza (AIV) outbreaks can induce fatal human pulmonary infections in addition to economic losses to the poultry industry. In this study, we aimed to develop a rapid and sensitive point-of-care AIV test using loop-mediated isothermal amplification (LAMP) technology. We designed three sets of reverse transcription LAMP (RT-LAMP) primers targeting the matrix (M) and hemagglutinin (HA) genes of the H5 and H9 subtypes. RT-LAMP targeting the universal M gene was designed to screen for the presence of AIV and RT-LAMP assays targeting H5-HA and H9-HA were designed to discriminate between the H5 and H9 subtypes. All three RT-LAMP assays showed specific amplification results without nonspecific reactions. In terms of sensitivity, the detection limits of our RT-LAMP assays were 100 to 1,000 RNA copies per reaction, which were 10 times more sensitive than the detection limits of the reference reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) (1,000 to 10,000 RNA copies per reaction). The reaction time of our RT-LAMP assays was less than 30 min, which was approximately four times quicker than that of conventional RT-PCR. Altogether, these assays successfully detected the existence of AIV and discriminated between the H5 or H9 subtypes with higher sensitivity and less time than the conventional RT-PCR assay.
Dharmayanti, Ni Luh Putu Indi;Hewajuli, Dyah Ayu;Ratnawati, Atik;Hartawan, Risza
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.4
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pp.56.1-56.13
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2020
Background: The live bird market (LBM) plays an important role in the dynamic evolution of the avian influenza H5N1 virus. Objectives: The main objective of this study was to monitor the genetic diversity of the H5N1 viruses in LBMs in Indonesia. Methods: Therefore, the disease surveillance was conducted in the area of Banten, West Java, Central Java, East Java, and Jakarta Province, Indonesia from 2014 to 2019. Subsequently, the genetic characterization of the H5N1 viruses was performed by sequencing all 8 segments of the viral genome. Results: As a result, the H5N1 viruses were detected in most of LBMs in both bird' cloacal and environmental samples, in which about 35% of all samples were positive for influenza A and, subsequently, about 52% of these samples were positive for H5 subtyping. Based on the genetic analyses of 14 viruses isolated from LBMs, genetic diversities of the H5N1 viruses were identified including clades 2.1.3 and 2.3.2 as typical predominant groups as well as reassortant viruses between these 2 clades. Conclusions: As a consequence, zoonotic transmission to humans in the market could be occurred from the exposure of infected birds and/or contaminated environments. Moreover, new virus variants could emerge from the LBM environment. Therefore, improving pandemic preparedness raised great concerns related to the zoonotic aspect of new influenza variants because of its high adaptivity and efficiency for human infection.
Antimicrobial resistance and emerging infectious diseases, including avian influenza, Ebola virus disease, and Zika virus disease have significantly affected humankind in recent years. In the premodern era, no distinction was made between animal and human medicine. However, as medical science developed, the gap between human and animal science grew deeper. Cooperation among human, animal, and environmental sciences to combat emerging public health threats has become an important issue under the One Health Initiative. Herein, we presented the history of One Health, reviewed current public health threats, and suggested opportunities for the field of public health through better understanding of the One Health paradigm.
Journal of the korean veterinary medical association
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v.7
no.1
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pp.1-3
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1963
Fazekas observed that fowl or human erythrocytes treated with a modifying dose of potassium pe-riodate remained agglutinable by influenza virus tut the adsorbed virus did not elute spontaneously. In this study, chicken erythrocytes treated with the high d
Retroviral and lentiviral vectors are mostly pseudotyped and often purified and concentrated via ultracentrifugation. In this study, we quantified and compared the stabilities of retroviral [murine leukemia virus (MLV)-based] and lentiviral [human immunodeficiency virus (HIV)-1-based] vectors pseudotyped with relatively mechanically stable envelope proteins, vesicular stomatitis virus glycoproteins (VSVGs), and the influenza virus WSN strain envelope proteins against ultracentrifugation. Lentiviral genomic and functional particles were more stable than the corresponding retroviral particles against ultracentrifugation when pseudotyped with VSVGs. However, both retroviral and lentiviral particles were unstable when pseudotyped with the influenza virus WSN strain envelope proteins. Therefore, the stabilities of pseudotyped retroviral and lentiviral vectors against ultracentrifugation process are a function of not only the type of envelope proteins, but also the type of viral internal core (MLV or HIV-1 core). In addition, the fraction of functional viral particles among genomic viral particles greatly varied at times during packaging, depending on the type of envelope proteins used for pseudotyping and the viral internal core.
Meyer J. Friedman;Haram Lee;Young-Chan Kwon;Soohwan Oh
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.32
no.12
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pp.1515-1526
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2022
Eukaryotic chromatin is highly organized in the 3D nuclear space and dynamically regulated in response to environmental stimuli. This genomic organization is arranged in a hierarchical fashion to support various cellular functions, including transcriptional regulation of gene expression. Like other host cellular mechanisms, viral pathogens utilize and modulate host chromatin architecture and its regulatory machinery to control features of their life cycle, such as lytic versus latent status. Combined with previous research focusing on individual loci, recent global genomic studies employing conformational assays coupled with high-throughput sequencing technology have informed models for host and, in some cases, viral 3D chromosomal structure re-organization during infection and the contribution of these alterations to virus-mediated diseases. Here, we review recent discoveries and progress in host and viral chromatin structural dynamics during infection, focusing on a subset of DNA (human herpesviruses and HPV) as well as RNA (HIV, influenza virus and SARS-CoV-2) viruses. An understanding of how host and viral genomic structure affect gene expression in both contexts and ultimately viral pathogenesis can facilitate the development of novel therapeutic strategies.
Adenovirus (ADV) and human bocavirus (hBoV) cause acute respiratory tract infections, and are often associated with increased rates of hospitalization and death, particularly in infants and young children. The aim of this study was to analyze the clinical features and molecular phylogeny of ADV and hBoV isolated in Busan, from January 2011 to November 2013. In total, 3,230 specimens (throat swabs) were collected from patients with influenza-like illnesses and acute respiratory tract infections. Multiplex real-time RT-PCR was performed to detect eight respiratory viru [rhinovirus, adenovirus, respiratory syncytial virus, human coronavirus, human metapneumovirus, human bocavirus, parainfluenza virus and influenza virus] and detected 1,485(46.0%) cases. Among 1,485 positive specimens, 257(8.0%) cases were ADV and 68(2.1%) cases of hBoV. A significant clinical feature of ADV is fever and headache whereas hBoV is wheezing. Serotypic distributions of isolated ADV and hBoV were analyzed by sequencing of hexon and VP1/VP2 gene, respectively. ADV was identified seven different serotypes(1~6, 8), revealing a high similarity among the isolates (>97%). The predominant types of ADV were type 1 in 2011, type 3 and 4 in 2012, type 3 in 2013, respectively. ADV type 3 was major causative type during outbreaks in 2013. All of the hBoV was identified as hBoV type 1.
Viruses are the most common cause of lower respiratory tract infections (LRTIs) in infants and young children and are a major public health problem in this age group. Viruses were identified in 54.9-70.4% of hospitalized infants and children with LRTIs in Korea. The viral pathogens identified included respiratory syncytial virus (RSV) A and RSV B, influenza (Inf) A, Inf B, parainfluenza (PIV)1, PIV2, human bocavirus (hBoV), human rhinovirus (hRV), adenovirus (ADV), human metapneumovirus (hMPV), human coronavirus (hCoV)-OC 43, hCoV-229E, hCoV-NL63, hCoV-HKU1, and human enterovirus (hEV). Coinfections with ${\geq}$2 viruses were observed in 11.5-22.8% of children. The occurrence of LRTIs was the highest in the first year of life. The specific viruses are frequently associated with specific clinical syndromes of LRTIs. LRTIs caused by RSV were predominant among younger infants. hRV accounted for a larger proportion of LRTIs in young infants than ADV and hBoV. hMPV was frequently detected in children >24 months old. The number of hMPV infections peaked between February and May, whereas hRV was detected throughout the year. Thus far, hCoV is a less common respiratory pathogen in cases of ALRI and URI in Korean children.
Respiratory viruses are one of the most infectious agent in human. Six different respiratory tract viruses were detected from Busan while working on the preventive surveillance in 1997-2000. The isolation rate from suspected specimens were 8.4%. Influenza virus A, B type, parainfluenza virus, adenovirus, mumps virus, and measles virus were examined from throat swabs, serum, and secretions of patients. Influenza A/Sydney/05/97(H3N2)-like, A/Johanesburg/33/94(H3N2)-like, A/Beijing/262/95(H1N1)-like and Influenza B/Beijing/262/95-like, B/Harbin/07/94-like, B/Guangdong/08/93-like were found. Adenovirus serotype 1, 2, 3 and 5 were detected, antibody of mumps both IgM and IgG were shown and outbreaks of measles were confirmed. Different antigenic types of influenza virus were detected every year, one outbreak of parainfluenza in 1999, mumps outbreak in 1999 and 2000, and incidence of measles in 2000 were noticeable. Monthly outbreaks were November through following March with influenza virus, January through June with adenovirus, February through May and December with mumps, April through August and November, December with measles, respectively. The size of isolated viruses were 130 nm with influenza virus B type, non-enveloped, icosahedron with 70 nm with adenovirus, 170 nm with mumps virus and 180 nm with parainfluenza virus in diameter, respectively.
In this study, we described a paper-based neuraminidase assay sensor (PNAS) which can be applied to detect the infection by influenza viruses. The PNAS was designed and manufactured to quantitatively identify the levels of neuraminidase in the sample, which is based on colorimetric analysis using the X-Neu5Ac substrate. The limit of detection of the PNAS was determined as 0.004 U/mL of neuraminidase. According to the amount of neuraminidase in human serum, the PNAS could monitor the enzyme activity with a good linearity ($R^2$ > 0.99). In addition, the initial performance of the PNAS has been maintained up to 70 days in the $4^{\circ}C$. Finally, we demonstrated whether the Michaelis-Menten kinetics is applied to the PNAS, which can show the reliability of the enzyme reactions. The kinetic studies indicated that the PNAS provides the good condition for enzyme reactions ($K_m=8.327{\times}10^{-3}M$), but they were performed on paper chip nonetheless. The paper-based neuraminidase assay sensor may be useful in a wide range of rapid and safe detection of influenza virus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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