This experiment was conducted to determine correlation between in vitro protein fractions and in situ protein degradation rate with major dairy protein sources(soybean meal, corn gluten meal, cotton seed meal, kapok seed meal and perilla meal). Five protein fractions were obtained according to the Cornell Net Carbohydate and Protein System(CNCPS), and in situ protein degradation rates were determined by technique using nylon bags incubated for 0, 4, 8, 12 and 24hrs in the rumen of three Holstein steers. Fraction A was highest in kapok seed meal(14.6%) and lowest in corn gluten meal(0.6%) (P<0.05). The highest B1, B2 and B3 fractions were contained in soybean meal(8.27%), cotton seed meal(74%), and perilla meal(40%), respectively. Corn gluten meal was very high in fraction C. In situ protein degradation rate of soybean meal was 98%, highest among five protein sources, and corn gluten meal had the lowest rate at 28%. Correlation analysis showed that easily soluble fractions of both methods, in situ protein degradation rate and digestible protein fractions, and in situ protein degradation rate minus “a” and fraction B2+B3 were highly correlated. These results indicate that in vitro protein fractionation can be used in the estimation of in situ protein degradation.
Siuda, Waldemar;Kiersztyn, Bartosz;Chrost, Ryszard J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.6
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pp.897-904
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2007
The aim of this paper is to discuss the methodology of our investigation of the dynamics of protein degradation and the total in situ protealytic activity in meso/eutrophic, eutrophic, and hypereutrophic freshwater environments. Analysis of the kinetics and rates of enzymatic release of amino acids in water samples preserved with sodium azide allows determination of the concentrations of labile proteins $(C_{LAB})$, and their half-life time $(T_{1/2})$. Moreover, it gives more realistic information on resultant activity in situ $(V_{T1/2})$ of ecto- and extracellular proteases that are responsible for the biological degradation of these compounds. Although the results provided by the proposed method are general y well correlated with those obtained by classical procedures, they better characterize the dynamics of protein degradation processes, especially in eutrophic or hypereutrophic lakes. In these environments, processes of protein decomposition occur mainly on the particles and depend primarily on a metabolic activity of seston-attached bacteria. The method was tested in three lakes. The different degree of eutrophication of these lakes was clearly demonstrated by the measured real proteolytic pattern and confirmed by conventional trophic state determinants.
Background: The continuing growth of the ethanol industry has generated large amounts of various distillers grains co-products. These are characterized by a wide variation in chemical composition and ruminal degradability. Therefore, their precise formulation in the ruminant diet requires the systematic evaluation of their degradation profiles in the rumen. Methods: Three distillers grains plus soluble co-products (DDGS) namely, corn DDGS, high-protein corn DDGS (HP-DDGS), and wheat DDGS, were subjected to an in situ trial to determine the degradation kinetics of the dry matter (DM) and crude protein (CP). Soybean meal (SBM), a feed with highly degradable protein in the rumen, was included as the fourth feed. The four feeds were incubated in duplicate at each time point in the rumen of three ruminally cannulated Hanwoo cattle for 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24, and 48 h. Results: Wheat DDGS had the highest filterable and soluble A fraction of its DM (37.2 %), but the lowest degradable B (49.5 %; P < 0.001) and an undegradable C fraction (13.3 %; P < 0.001). The filterable and soluble A fraction of CP was greatest with wheat DDGS, intermediate with corn DDGS, and lowest with HP-DDGS and SBM; however, the undegradable C fraction of CP was the greatest with HP-DDGS (41.2 %), intermediate with corn DDGS (2.7 %), and lowest with wheat DDGS and SMB (average 4.3 %). The degradation rate of degradable B fraction ($%\;h^{-1}$) was ranked from highest to lowest as follows for 1) DM: SBM (13.3), wheat DDGS (9.1), and corn DDGS and HP-DDGS (average 5.2); 2) CP: SBM (17.6), wheat DDGS (11.6), and corn DDGS and HP-DDGS (average 4.4). The in situ effective degradability of CP, assuming a passage rate of $0.06h^{-1}$, was the highest (P < 0.001) for SBM (73.9 %) and wheat DDGS (71.2 %), intermediate for corn DDGS (42.5 %), and the lowest for HP-DDGS (28.6 %), which suggests that corn DDGS and HP-DDGS are a good source of undegraded intake protein for ruminants. Conclusions: This study provided a comparative estimate of ruminal DM and CP degradation characteristics for three DDGS co-products and SBM, which might be useful for their inclusion in the diet according to the ruminally undegraded to degraded intake protein ratio.
In situ and in vivo digestion trials were conducted to determine the degradation of dry matter (DM), crude protein (CP) and effective protein degtadability (EPD), and digestibility of nutrients of Hazelnut kernel oil meal (HKOM), and effects of HKOM on nitrogen (N) balance. In the in situ study, nylon bag were suspended in the rumen of 3 Karayaka rams to estimate protected protein. Protein sources were analyzed for pepsin soluble protein (PSP) using a Pepsin Digestion Method. In the digestion trials, 4 Karayaka rams (36 mo.) were used in a $4{\times}4$ Latin square to evaluate the digestibility of nutrients and N retention to measure effects of diets containing HKOM, soybean meal (SBM) corn gluten meal (CGM) and urea (U). The degradability of DM and CP, and PSP content of HKOM were lower (p>0.05) than that of SBM, but higher (p<0.001) than that of CGM. EPD of HKOM was higher (p<0.01) than that of SBM or CGM. The apparent digestion coefficients of organic matter and CP for HKOM were lower than for SBM, but higher than for CGM. N retention of HKOM was higher than that of SBM and lower than that of CGM (p>0.05). In conclusion, these data may indicate that the HKOM is a high digestible feed source with a value between SBM and CGM.
A study was conducted to evaluate the nutritive potential value of different aquatic plants: duckweed (Lemna trisulaca), duckweed (Lemna perpusila), azolla (Azolla pinnata) and water-hyacinth (Eichhornia crassipes) from Bangladesh. A wide variability in protein, mineral composition, gas production, microbial protein synthesis, rumen degradable nitrogen and in situ dry matter and crude protein degradability were recorded among species. Crude protein content ranged from 139 to 330 g/kg dry matter (DM). All species were relatively high in Ca, P, Na, content and very rich in K, Fe, Mg, Mn, Cu and Zn concentration. The rate of gas production was highest in azolla and lowest in water-hyacinth. A similar trend was observed with in situ DM degradability. Crude protein degradability was highest in duckweed. Microbial protein formation at 24 h incubation ranged from 38.6-47.2 mg and in vitro rumen degradable nitrogen between 31.5 and 48.4%. Based on the present findings it is concluded that aquatic species have potential as supplementary diet to livestock.
This experiment was conducted to determine RDP values of locally available feedstuffs that are commonly used in ruminant rations in Bangladesh. Four cattle were fistulated in the rumen for the in situ nylon bag studies. Seventeen different feedstuff sample (9 roughages and 8 concentrates) were evaluated in $4{\times}14cm$ nylon bags and incubated in the rumen for different periods of time (2, 6, 12, 24, 48 and 72 h). The variation in crude protein (CP) contents reflected on the average CP disappearance value throughout the rumen incubation. Soluble fraction (a), insoluble but degradable fraction (b) along with the rate of degradation also varied widely among the various feedstuffs. Under 2% of rumen outflow rate, the percentages of the calculated protein degradabilities of roughages were rice straw, 16.7; maize grass, 70.6; oat grass, 70.8; dhal grass, 71.1; sunhemp, 78.4; napier grass, 62.4; matikalai grass, 72.1; khesarikalai grass, 76.9 and daincha browse, 78.4, respectively. The results in the protein degradabilities (%) in 8% ruminal outflow rate of concentrates were wheat bran, 61.6; rice polish (red), 61.3; rice polish (auto), 30.9; mustard oil cake, 71.8; sesame oil cake, 74.2; coconut oil cake, 57.9; soybean meal, 49.2 and fish meal, 37.9, respectively.
In this research, recombinant human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4-immunoglobulin (hCTLA4Ig) was produced by transgenic rice cells. RAmy3D promoter was used for overcome the limitation of low expression level in transgenic plant cells, and the secretion of target protein was accomplished by signal peptide. However, the RAmy3D promoter system which can be induced only by sugar starvation causes the decrease of cell viability. As a result, cell death promotes the release of protease which degrades the target proteins. The protein stability and productivity can be significantly influenced by proteolysis activity. Therefore, development of new strategies are necessary for the in situ recovery of target proteins from cell culture media. In this study, in situ recovery was performed by various strategies. Direct addition of Protein A resin with nylon bag leads to cell death by increased shear stress and decrease in production of hCTLA4Ig by protease. Medium exchange through modified flask could recover hCTLA4Ig with high cell viability and low protease activity, on the other hand, the productivity was lower than that of control. When in situ recovery was conducted at day 7 after induction in air-lift bioreactor, 1.94-fold of hCTLA4Ig could be recovered compared to control culture without in situ recovery. Consequently, in situ recovery of hCTLA4Ig from transgenic rice cell culture could enhance productivity significantly and prevent degradation of target proteins effectively.
The effect of ammonia treatment and rice bran supplementation on the in situ rumen degradation of rice straw was determined using three Japanese Corriedale wethers fitted with permanent rumen cannula. About 4 g samples of diets containing 100% untreated rice straw (URS); 100% ammonia treated rice straw (ARS); 65% URS+30% rice bran (RB)+5% soybean meal (SBM) (T1); and 85% ARS+15% RB (T2) were incubated at 0, 4, 8, 16, 24, 48, 72, and 96 hours in the rumen of sheep to measure dry matter (DM), crude protein (CP) and neutral detergent fiber (NDF) degradability. The DM disappearance of ARS based diets were about 20% higher than that of URS based diets. Rice bran supplementation improved DM disappearance of URS but not on ammoniated straw. Degradation parameters showed that ammoniation increased rate (c) of straw degradation resulting to higher DM and fiber degradability but RB supplementation did not. ARS gave similar DM and CP solubility and effective rumen degradability (ED) with that of the supplemented groups indicating that ammoniation alone can give the same effect on rumen degradability of sheep receiving low quality roughage. All degradation parameters for NDF were consistently higher in ARS based-diets indicating improved fiber solubility. Rice bran supplementation did not affect degradation characteristics of the diets except on soluble DM and CP fraction (A) of URS but not on ARS.
The in situ nylon bag degradation and in vitro intestinal digestibility of dry matter (DM), and crude protein (CP) of mulberry (Morus alba) plant fractions was studied at four harvest stages, 3 (W3), 5 (W5), 7 (W7) and 9 (W9) weeks. Degradability of DM and CP of the whole plant and stem fractions declined significantly (p<0.01) with advancing plant maturity in the order W3>W5 and W7>W9 and W3>W5>W7>W9, respectively. The degradation of DM and CP of the leaf fraction was also influenced by plant maturity but no trend was observed. The degradation of DM and CP of the whole plant and leaves increased rapidly during the first 48 and 24 h of incubation, respectively, when maximum degradation was reached. In vitro intestinal digestibility of CP was more influenced by the residence time in the rumen than by plant maturity. This study showed that mulberry is suitable as a supplement, particularly to low-quality roughages, in providing a source of rapidly available nitrogen to the rumen microbes, hence improving the roughage degradability and intake.
To estimate undegraded intake protein (UIP) fraction in feeds and fodders, on the basis of their neutral detergent insoluble N content was studied. Samples of six feeds and forages were incubated in situ for a time equivalent to their mean retention time, estimated on the basis of their digestibility plus 10 h (to account for a lag in passage of particles from the rumen). The samples were incubated for 0, 25, 50, 75 and 100% of the estimated total mean retention time. UIP value of leguminous forages, obtained from the fractional rates of degradation and passage, were highly correlated with those estimated from samples incubated for 75% of total mean retention time, while incubating the non-leguminous forages and groundnut cake for this point over estimate the UIP fraction.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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