This study was carried out to investigate in vitro/in vivo development of vitrified-thawed immature mouse oocytes. Immature mouse oocytes were vitrified with EFS40 (40% ethylene glycol, 18% ficoll and 0.5 M sucrose). Thawed oocytes were matured for 16 hr in vitro. Matured oocytes with the first polar body were fertilized with the concentration of 1~2$\times$10$^{6}$$m\ell$ of epididymal sperm. After fertilization, cleavage ($\geq$ 2-cell) and in vitro/in vivo development rates were examined. $\pi$ Ie results were summarized as follows: in vitro maturation rate of immature mouse oocytes in vitrified-thawed group was similar to that in exposed group (67.5%) and control (66.3%), but cleavage rate of vitrified-thawed oocytes (64.9 %) and blastocyst formation rate (59.0%) were significantly different compared to those of exposed group (83.7 and 74.7%) and control (90.7 and 83.7%) (p<0.05). However, when the blastocysts derived from immature mouse oocytes vitrified-thawed were transferred to pseudopregnant mouse, total implantation (31.3%) was slightly lower than that in control (40.8%), but live fetus formation rate (66.7%)was slightly higher than that in control (58.1%), there was not significantly different. Therefore, when the blastocyts produced in vitro were transferred into recipients, although the development in vitro of oocytes vitrified-thawed was decreased, live fetus formation rate was similar to that of control group. The present results indicate that immature mouse oocytes can be frozen successfully by vitrification with EFS40.
Objectives: To evaluate the effect of acupuncture as an adjunct treatment to increase the success rate of in vitro fertilisation (IVF). Methods: A review of the English and Korean literature was conducted to identify studies on acupuncture as an adjunct treatment to IVF. The main outcome measures were the biochemical pregnancy rate (BPR), the implantation rate (IR), the clinical pregnancy rate (CPR), the miscarriage rate (MR), the on-going pregnancy rate (OPR) and the live birth rate (LBR). Results: Nine meta-analyses of 11 systematic reviews (SRs) were included in this review. In four SRs, the overall IVF outcomes regardless of the procedural steps were documented; two of these SRs reported a significant effect on the CPR. One SR reported that acupuncture at the time of controlled ovarian hyperstimulation had a significant effect on the BPR. Seven SRs reported that acupuncture had no significant impact on transvaginal oocyte retrieval (TVOR). In eight SRs, significant impacts on the CPR, LIBR and OPR were reported when acupuncture was performed around the time of embryo transfer (ET). The results of repeated acupuncture after ET were included in two SRs, which included the same primary studies. The results of the SRs showed that acupuncture had a positive effect on the CPR. Conclusions: When the complete IVF procedure is analysed, there is conflicting evidence in that some reviews have found that acupuncture leads to an increased CPR but others have not. In addition, the reviews presented no evidence to suggest that acupuncture has any specific risks.
Lee, Dayong;Han, Soo Jin;Kim, Seul Ki;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.45
no.4
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pp.183-188
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2018
Objective: The purpose of this retrospective study was to evaluate the appropriateness of various follicle-stimulating hormone (FSH) starting doses in expected normal responders based on the nomogram developed by La Marca et al. Methods: A total of 117 first in vitro fertilization cycles performed from 2011 to 2017 were selected. All women were expected normal responders and used a recombinant FSH and flexible gonadotropin-releasing hormone antagonist protocol. The FSH starting dose was empirically determined (150, 225, or 300 IU). The FSH starting dose indicated by La Marca's nomogram was determined using female age and serum $anti-M{\ddot{u}}llerian$ hormone or basal FSH levels. If the administered dose was exactly the same as the proposed dose, the cycle was assigned to the concordant group (34 cycles). If not, it was assigned to the discordant group (83 cycles). Optimal ovarian response was defined as a total of 8-14 oocytes, hypo-response as < 8 oocytes, and hyper-response as > 14 oocytes. Results: Between the concordant and discordant group, ovarian response (optimal, 32.4% vs. 27.7%; hypo-response, 55.9% vs. 54.2%; and hyper-response, 11.8% vs. 18.1%) and the number of total or mature oocytes were similar. Ovarian hyperstimulation syndrome was rare in both groups (0% vs. 1.2%). The implantation rate, clinical pregnancy rate, miscarriage rate, and live birth rate were all similar. Conclusion: The use of the proposed FSH starting dose determined using La Marca's nomogram did not enhance the optimal ovarian response rate or pregnancy rate in expected normal responders. Individualization of the FSH starting dose by La Marca's nomogram appears to have no distinct advantages over empiric choice of the dose in expected normal responders.
Purpose: This study investigated the accuracy of free-hand implant surgery performed by an experienced operator compared to static guided implant surgery performed by an inexperienced operator on an anterior maxillary dental model arch. Methods: A maxillary dental model with missing teeth (No. 11, 22, and 23) was used for this in vitro study. An intraoral scan was performed on the model, with the resulting digital impression exported as a stereolithography file. Next, a cone-beam computed tomography (CBCT) scan was performed, with the resulting image exported as a Digital Imaging and Communications in Medicine file. Both files were imported into the RealGUIDE 5.0 dental implant planning software. Active Bio implants were selected to place into the model. A single stereolithographic 3-dimensional surgical guide was printed for all cases. Ten clinicians, divided into 2 groups, placed a total of 60 implants in 20 acrylic resin maxillary models. Due to the small sample size, the Mann-Whitney test was used to analyze mean values in the 2 groups. Statistical analyses were performed using SAS version 9.4. Results: The accuracy of implant placement using a surgical guide was significantly higher than that of free-hand implantation. The mean difference between the planned and actual implant positions at the apex was 0.68 mm for the experienced group using the free-hand technique and 0.14 mm for the non-experienced group using the surgical guide technique (P=0.019). At the top of the implant, the mean difference was 1.04 mm for the experienced group using the free-hand technique and 0.52 mm for the non-experienced group using the surgical guide technique (P=0.044). Conclusions: The data from this study will provide valuable insights for future studies, since in vitro studies should be conducted extensively in advance of retrospective or prospective studies to avoid burdening patients unnecessarily.
These experiments were carried out to develop new techniques identifying XX-bearing embryos prior to implantation by immunological method. Antiserum to histocompatibility-Y(H-Y) antigen was prepared in adult SD(sprague-dawley) female rat by repeated immunization of newbone testis supernatant from males of the same strain. ELISA test was used to identify the H-Y antibody of antiserum. Total 124 mouse embryos (8-cell stage) were treated with H-Y antiserum and complement in BSA free Ho, pp. and Pitt's medium and cultured under the gas phase of 5% CO2 in air at 37$^{\circ}C$ for 24 to 48 hrs. The morphological characteristics of embryos treated were observed under the phase-contrast micro scope. The results obtained in these experiments were summarized as follows: 1. Optimal Density of H-Y antibody were a, pp.ared to be 0.27-0.47 by ELISA test. 2. Of total 124 embryos treated with H-Y antiserum and complement 69(55.6%) embryos developed to blastocyst and 55(44.4%) destroyed or arrested.
Since the blastocyst is broken and spreads out on a flat plastic culture dish (two dimensional culture) during in vitro development, it has been difficult to study the implantation process. It also has been difficult to analyse the interactions between endometrial epithelial and stromal cells because of the lack of a long-term in vitro model which can stimulate in vivo characteristics, as these cells eventually fail to proliferate or cease to express differentiated functions. Recently nontransformed cell lines, CUE-P and CUS-V2, derived from rat endometrial epithelium and stroma were reported. In this study, morphology of CUE-P and CUS-V2 was examined and oxytocin gene expression by CUE-P cells was demonstrated by RT-PCR. The CUE-P cells have a cuboidal morphology and CUS-V2 cells resemble fibroblast and exhibit a spindle-like morphology. In RT-PCR, same size of PCR products of oxytocin gene at hypothalamus, uterus and CUE-P cells were demonstrated. These results showed three dimensional culture system could be made by using the new cell lines.
Park, Joon-Hyun;Kim, Ji-Soo;Sonn, Sung-Keun;Rhee, Kun-Soo
Animal cells and systems
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v.10
no.1
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pp.41-47
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2006
Development of the mammalian pre-implantation embryos has unique features, such as a slow and unsynchronized cell division, compaction, and eventual formation of blastocysts with inner cell mass and trophectoderm. In order to have a clue on molecular mechanisms that reside in mouse early development, we suppressed expression of early embryo-specific genes with RNAi and observed their development in vitro. We observed developmental defects in embryos microinjected with dsRNAs for Oct4 or Nanog among the tested genes. Careful examinations revealed that development of the most of the Oct4- or Nanog-suppressed embryos were arrested at the morula stage. These results suggest that the Oct4 and Nanog activities are also required for embryogenesis earlier than the blastocyst stage.
A novel bioabsorbable suture material, poly(glycolide-caprolactone) (PGLCL) monofilament, was prepared by spinning of the PGLCL copolymer. The physical properties, strength retention, biocompatibility, and organism resolvability of the PGLCL monofilament were investigated. The results showed that the knot pull strength of the monofilament was higher than that stated in European Pharmacopoeia. The in vivo retention strength following implantation was 64%, 23%, 7%, and 0% after one, two, three, and four weeks, respectively. Mortality, clinical signs, validation, and sterility tests indicated that all items had passed. Organism resolvability tests showed that the PGLCL monofilament, as a suture, was absorbed within 91 days.
Vertebrates regenerate tissues in three ways: proliferation of cells that maintain some or all of their differentiated structure and function, redifferentiation of mature cells followed by proliferation and redifferentiation into the same cell type or transdetermination to another cell type, and activation of restricted lineage stem cells, which have the ability to transdetermine to different lineages under the appropriate conditions. The behavior of the cells during regeneration is regulated by growth factors and extracellular matrix molecules. Some non-regenerating tissues are now known to harbor stem cells which, though they form scar tissue in vivo, are capable of producing new tissue-specific cells in vitro, suggesting that the injury environment inhibits latent regenerative capacity. Regenerative medicine seeks to restore tissues via transplantation of stem cell derivatives, implantation of bioartificial tissues, or stimulation of regeneration in vivo. These approaches have been partly successful, but several research issues must be addressed before regenerative medicine becomes a clinical reality.
Polar body was usually used as a determinant of oocyte's maturation. Polar body morphology could reflect the embryo quality and implantation competence. This review only focuses on morphology of the first polar body and embryo developmental rate in the presence or absence of polar body. However, it is very difficult to describe whether polar body has any effects on embryo development in vitro or in vivo. Further intensive research is needed to determine its function on embryo development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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