• 대한의생명과학회지
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• 제5권2호
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• pp.155-165
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• 1999

호르텐스극구흡충을 흰쥐에게 경구 감염시키고 4주 후에 성충을 획득하여 고정, 포매 및 절편하여 조직항원 분포 부위를 관찰하였다. 호르텐스극구흡충의 항체는 호르텐스극구흡충 피낭유충을 흰쥐에게 경구 감염시키고 4주 후에 채혈한 혈청과 호르텐스극구흡충 조항원을 면역증강제와 함께 흰쥐에게 근육 주사하여 채혈한 혈청을 이용하였으며, 이 혈청을 반응시켜서 호르텐스극구흡충 조직내의 항원성 분포를 규명하였다. 한편, 면역황금표식법에 의한 미세조직의 항원성 반응 여부는 조직에 표지된 황금입자로 판정하였다. 그 결과 충체 조직에서 황금입자와 강하게 반응하는 미세조직은 표피층의 표지합포체, 난황세포의 구성물질, 유연조직의 분비과립 그리고 배설낭의 구성물질 등에서 반응이 강하게 나타났다. 이상의 결과를 볼 때 호르텐스극구흡충의 항원은 생식세포와 소화분비 및 소화관계통에서 분비 유래되는 것으로 분석되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권1호
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• pp.31-42
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• 1991

폐흡충(Paragonimus westermani)에 감염된 숙주에 대해 항체 생성을 유도하는 물질이 분포하고 있는 부위를 화인하기 위하여 대조군의 IgG와 폐홉충에 감염된 실험 개의 특이 IgG를 폐흡충 유약성충 조직에 반응시키고 면역황금표식법을 이용하여 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 대조군의 IgG를 반응시킨 유약성충 표피층은 표피세포에서 분비되는 물질이 포함된 표피 합포체로 구성되어 기저층과 분명하게 구별되었으며 근육층도 잘 발달되어 있었다. 난황세포는 크기가 다양한 분비과립 등을 포함하고 있었으며 특히 조면소포체가 발달되어 있었다. 맹관의 막구조물은 잘 발달되었으며 장상피 합포체도 잘 발달되어 있었다. 한펀, 폐흡충에 감염된 실험동물의 특이 항체로 반응시킨 유약성충 표피충의 표피 합포체와 표피세포의 세포질에 황금입자의 매우 특이적인 표식가 관찰되었고 난황세포에서는 분필과립에 황금 입자가 높은 밀도로 관찰되었다. 그리고 맹관 상피 합포체는 미약하게 황금 표지가 되었고 맹관 막구조물과 맹관 내강에도 특이하게 황금 표지가 관찰되었지만 표피 합포체와 표피세포보다 밀도가 낮게 관찰되었다. 이상의 결과로 폐홉충에 감염된 실험 개는 폐흡충의 표피 합포체와 표피세포에서 생성된 물질과 난황세포에서 생성된 물질에 의하여 면역항체가 형성되며 일부는 맹관 내용물에 의해 약간의 면역항체가 유도되는 것으로 생각되었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제33권4호
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• pp.365-376
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• 1995

일록춘폐흡충(Poragonimus iloktsuenensis)의 표피층, 장상피층 및 난황선의 조직항원 성을 발육단계별로, 면역황금표지법(immunogoldlabelingmethod)으로 관찰하였다. 일록춘폐흡충 으로 감염건 횐쥐(Sprague-Dawley)로 부터, 감염후 2주 3주, 4주, 5주 및 33주에 적출한 충체를 항원으로 사용하였고, 감염 후 10주의 흰쥐혈청을 항체로 사용하였다 조직항원성은 조직에 표지된 황금입자로 판정하였다. 표피층은 유약충으로부터 성충에 이르는 발육과정중 전반적으로 황금입자 표지가 많지 않았고 충체가 성숙되어감에 따라서 황금입자 표지가 다소 드물어지는 경향이 있었으나, 충체 개체별 항원 강도에 차이가 많았다. 장상피층과 난황선은 충체의 발육단계에 관계없이 많은 수의 황금입자가 표지되어 강한 항원성을 나타내었다. 이 실험의 결과, 일록춘폐흡충의 표피층 장강피층, 및 난황선은 중요한 조직항원 부위로 보이나, 표피층은 항원성이 낮은 편이고, 발육단계 및 개체별로 항인강도에 차이가 있었다. 장상피층 및 난황선도 개체별로 황금입자 표지강포에 다소의 차이는 있었으나 충체의 발육단계에 관계없이 계속해서 강한 항원성이 유지되는 조직부위로 보인다.

• 한국전자현미경학회:학술대회논문집
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• 한국현미경학회 2000년도 제31차 춘계학술대회
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• pp.23-24
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• 2000

• Journal of Plant Biology
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• 제37권4호
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• pp.435-439
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• 1994

채종 후 성숙한 인삼 종자 배유에서 cellulase의 국재를 rabbit anti-cellulase와 protein A-gold를 사용한 면역세포화학적 방법을 이용하여 확인하였다. Cellulase의 immunogold particle이 전자밀도가 높은 단백질체와 배유세포벽 주변부에 나타났다. 또한 금입자가 세포벽에 균일하게 분포하였고, 제형층에 접한 분해과정 중의 배유세포벽을 따라 나타났다. 그러나 세포벽의 섬유성 물질과 배유세포의 분해물질로 구성된 제형층에서는 금입자가 관찰되지 않았다.

• Animal cells and systems
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• 제9권2호
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• pp.65-73
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• 2005

In this study, we found that sperm ball of Urechis unicinctus consisted of a somatic cell and spermatogenic cells. After separation from the sperm ball, individual spermatid floated freely in the coelomic fluid and differentiated into a mature sperm. Because of many nuclear vacuoles, spermatid nucleus was observed to be heterogeneous. Later, the spermatid nucleus condensed into the homogeneous round nucleus of the mature sperm. Perinuclear microtubules could be seen but did not seem to be organized into manchette microtubules. To understand the nature of nuclear condensation during spermiogenesis, the sperm and spermatids (spermiogenic cells) were treated with FITC-phalloidin, or anti-actin-FITC, or labeled with antiactin immunogold particles (AAIP; 10 nm) followed by transmission electron microscopy or confocal laser scanning microscopy. The anti-actin-FITC and FITC-phalloidin reactions occurred distinctly in the nuclei of both spermiogenic cells. FITC-phalloidin reacted more intensely with acrosomes. The AAIP were incorporated mainly into nuclei of both cells sometimes showing local distribution in the nucleus. Nuclear vacuoles of spermatids disappeared progressively with condensation of the nucleus, as the number of incorporated $AAIP/{\mu}m^2$ increased. These results suggest that nuclear actin microfilaments might be closely related to nuclear condensation.

• 한국동물위생학회지
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• 제20권4호
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• pp.331-338
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• 1997

The purpose of this study was to establish early diagnosis for bovine virus diarrhea-mucosal disease(BVD-MD) Two Holstein among 22 breeding cows were shown ulcer in the mouth and watery diarrhea. Diarrheal feces and ulcerous lesion of the mouth from 2 cows were sampled for detection of viral antigen. BVD virus was isolated by inoculation of the samples to MDBK cells, and the cytopathic effects were observed in cultured MDBK cells which inoculated with virus isolates from the feces. Viral antigens were detected in the feces and ulceruous lesion by immunogold staining. The serum neutralization titers were shown 1 : 64 or greater in 8 blood samples by using BVD virus (NADL strain). By the RT-PCR, using reverse primer 5'-ACTCCATGTGCCATGTACAG-3', forward primer 5'-ACTCCATGTGCCATGTACAG-3', 285 base pair band specific to BVD virus was detected. In conclusions, the results of above tests which executed using the diarrheal feces and ulcerous lesion of the mouth and the isolates were conformed as BVD virus.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제1권2호
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• pp.187-191
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• 1998

Chemotherapy can not be applied for the control of fish viral diseases because viruses depend on host machinery for their replication. Although new control strategies including vaccination are under development, avoidance of virus introduction by rapid and correct diagnosis is the best way of fish viral disease control. Although observation of virus particles with an electron microscope is an easy method for virus detection, it take a few days for the sample preparation. In order to shorten the sample preparation time, microwave radiation was applied in the procedure. With this method, 15 seconds was enough for fixation of virus infected fish samples or cultured cells inoculated with infectious hematopoietic necrosis virus, which takes 2-4 hours with routine methods. Also four minutes was enough for polymerization of embedding resin which takes 24-48 hours with routine methods. Samples prepared with microwave were good enough for direct electron microscopic observation and immunogold labeling assay.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제24권1호
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• pp.68-74
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• 1996

Present work was undertaken to investigate the origin of milled wood lignin(MWL) in the wood cell wall using immunocytochemical techniques, which can provide the information on the localization of specific antigens(MWL in the present study) to be examined. Spruce MWL dissolved in DMSO and emulsified with Freund adjuvant was injected directly into the mouse spleen. The animals were boostered at two-week intervals after the initial immunization. Blood samples were purified in standard procedures. The characteristics of antibodies against MWL were tested by indirect ELISA. Visualization of MWL was carried out using conventional indirect immunogold-labelling methods on the ultrathin sections of spruce wood. Immuno-TEM observations showed that the immunogold probes were selectively attached to secondary cell walls of spruce wood. The most intense labelling was frequently observed in the S2 layer. In contrast, gold labelling in the lignin-rich regions, such as middle lamella and cell corner was not found. The immuno-TEM provides an indication that spruce MWL originates from the S2 layer.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제28권1호
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• pp.11-24
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• 1990

간흡충의 항원성 부위를 규명하기 위하여 간흡충 충체로부터 분리한 체액을 실험 토끼에 주사하여 면역시킨 IgG와 간흡충에 감염된 실험 토끼의 IgG를 간흡충 조직 항원에 반응시키고 면역황금 표식법을 이용하여 전자현미경으로 관찰한 바 그 결과는 다음과 같다. 간흡충의 조직세포 사이의 구성물인 세포간질과 맹관의 내용물, 그리고 맹관 막 구조물은 충체에 감염된 IgG와 체액 항원에 면역된 IgG 모두에서 항원-항체 반응이 관찰되었지만 체액 항원으로 면역된 IgG에서 다소 강한 반응이 나타났다. 표피의 기저층과 난황선의 난황 물질은 충체에 감염된 IgG에서는 반응이 나타나지 않았으나 체액 항원에 면역된 IgG에서는 강한 반응이 나타나 이들을 구 성하는 물질은 체액 반응 IgG에 대한 특이 항원으로 생각되었다. 배설관의 내용물과 막 구조물은 충체에 감염된 IgG에 대한 반응이 특이하였으나 체액 항원에 면역된 IgG에 대한 반응은 매우 미 약 하여 항원성에 차이점이 있는 것으로 생각되었다. 수정낭의 정자세포 간질은 충체 감염 IgG에 반응 하고 정자세포의 두부는 체액 항원으로 면역된 IgG에 반응하여 매우 상이한 항원성이 나타났다. 이상의 결과로 보아 충체의 세포간질과 맹관 구성물은 충체 감염시와 체액 항원에 면역된 IgG에 대하여 반응의 정도 차이는 있으나 항원성으로 관찰되는 것은 동일하였다. 그러나 수정낭의 세포간질과 배설낭의 구성물질은 충체에 감염된 IgG에 대한 특이 항원이며 수정낭 내의 정자들의 두부와 난황을 구성하는 물질은 체액 면역 IgG에 대한 특이 항원인 것으로 생각된다.