• 제목/요약/키워드: Immunoelectrophoresis

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SDS-PAGE, Crossed Immunoelectrophoresis 및 Immunoblotting을 이용한 Leptospira interrogans 혈청형간 항원 비교 (Comparison of soluble antigens from Leptospira interrogans serovars by SDS-PAGE, Crossed Immunoelectrophoresis and Immunoblotting)

  • 백영옥;마점술
    • 대한수의학회지
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    • 제32권2호
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    • pp.195-205
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    • 1992
  • The soluble antigen profiles and antigenic specificities of Leptospira interrogans serovars icterhaemorrhagiae, canicola, pomona and hardjo were examined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, crossed immunoeletrophoresis and immunoblotting. The profiles of protein, glycoprotein and fraction containing N-acetylglucosamine of 4 serovars were compared. The protein profiles of 4 serovars were very similar except the range of 14,400 to 30,000 daltons. Molecular weight of glycoprotein of L, pomona was lower than other serovars. L canicola showed extra N-acetylglucosamine bands having molecular weight of 82,000 and 90,000 daltons. In crossed immunoelectrophoresis, a close antigenic relationship was found between L icterohaemorrhagiae and L canicola. In immunoblottings conducted with soluble antigens and rabbit antisera of 4 serovars, Leptospira interrogans serovars possessed cross-reactive antigens and serovar-specific antigens. The molecular weights of serovar-specific antigens were 45,000, 82,000 and 90,000, 31,000 and 24,000 daltons in L icterohaemorrhagiae, L canicola, L pomona, and L hardjo, respectively.

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폐염균 다당류 정제 방법의 개발 및 한국형 폐염균의 수집

  • 임관기;김수남;강연현;이동권
    • 한국응용약물학회:학술대회논문집
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    • 한국응용약물학회 1993년도 제2회 신약개발 연구발표회 초록집
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    • pp.144-144
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    • 1993
  • 한국에서 유행하는 페염균 type을 결정하기 위한 기초 실험을 수행하여 서울대병원과 서울중앙병원의 환자로부터 분리한 88개의 폐염균주를 담즙산에 의한 용해도 및 Optochin에 대한 민감성 등을 측정하고 폐염균의 type을 결정하기 위해서 Double diffusion, Countercurrent immunoelectrophoresis, Rocket immunoelectrophoresis 방법 등으로 폐염균 항혈청과 반응하였다. 또한 ATCC로부터 구입한 폐염균주를 이용하여 배지조성의 변화에 따른 폐염균 생장을 측정하기 위해 CAT broth, Brain Heart Infusion broth, Defined Media에서 3가지 type의 균주(Type I, III, IV)를 접종하고 37$^{\circ}C$에서 배양하면서 1시간마다 550nm에서 흡광도를 측정하였다. 3가지 type (Type I, III, IV)의 폐염균주로부터 협막다당류를 phenol Iysis 추출법으로 폐염균 Capsule 다당류의 분리하여 Total Sugar 함량, Uronic acid 함량, 0-Acetyl 함량, 단백질 함량, 핵산 함량, 분자량분포 Countr-current immunoelectrophoresis 등을 실시하여 폐염균 백신 규격에 부합되는지 확인하였다. 수집한 88개의 폐염균주가 모두 담즙산에 의해 용해되고 6mm Optochin disc를 사용하였을때 성장 저지원이 모두 14mm 이상으로 나타나 감수성이 있어서 폐염균임을 확인하였으며 폐염균의 type 결정에 필요한 방법을 설정하였다. 배지조성에 따른 폐염균의 생장을 측정한 결과 CAT broth 에서는 Type I만이 잘 배양되었고 Type III, IV는 늦게 배양되었으나, Brain Heart Infusion broth에서는 3가지 Type이 모두 잘 배양되었고, Defined Media 에서는 Type I만이 성장되었을 뿐 나머지 두 Type은 배양되지 않았다. 본 실험방법으로 분리된 폐염균 다당류는 폐염균 백신 규격중의 6가지 항목에서 적합하였으며 Statens(Denmark)로부터 구입한 항체와 뚜렷한 침강선을 나타내었다.

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해양 천연물에서 분리한 면역기능 조정제 렉틴 MLA의 림프구 자극분열효과 및 면역화학적 특성 (Lymphocytes Mitogenic and Immunochemical Characteristics of the Immunomodulating Lectins, MLA, from Marine Natural Products)

  • 전경희;김장환;정시련
    • 약학회지
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    • 제39권3호
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    • pp.252-259
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    • 1995
  • Isolation, purification and characterization of biophysicochemical properties of the three new lectins, MLA-I, MLA-II, MLA-III from the hemolymph of Meretrix lusoria have been reported previously. A series of immunochemical studies were investigated in this work. The three lectins were revealed as having partial identity each other by immunodiffusim and immunoelectrophoresis. These results suggest that MLA lectins are isolectins having similar biophysicochemical properties. Particularly, MLA-I proved to be a potent mitogen for murine splenic as well as human peripheral lymphocytes, and the optimum mitogenic dose were 62.5 and 1.95 $\mu\textrm{g}$/ml, respectively.

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한국산 설치류의 계통분류학적 연구 : VII . 7종의 형청단백질의 면역학적 분석 (Systematic Studies on Korean Rodents : VII.Immunological Analyses of Serum Proteins of Seven Species)

  • 박능수;이성순;고흥선
    • Animal Systematics, Evolution and Diversity
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    • 제6권2호
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    • pp.165-172
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    • 1990
  • 한국에 서식하고 있는 설치류 7종(7아종)의 혈청단백질을 immunoprecipitin, immunodiffusion 및 immunoelectrophoresis 분석을 하였다. 각 종의 혈청단백질은 서로 달랐으며, 종간의 차이도 크게 나타났다. 즉 serological correspon-dence의 변이에 있어서, 집쥐(쥐 아목)는 99.6인데 다람쥐(다람쥐 아목)는 2.7이었다. 그리고 쥐 아목내의 쥐 과에 속하는 6종(6아종)중에서는 대륙밭쥐(갈밭쥐 아과)가 8.2로 가장 낮았다.

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한국산 참나무속 식물의 화분단백질분석에 의한 분류학적 연구 (Taxonomic Studies on Korean Oaks-Quercus- by Pollen Protein Analysis)

  • 이유성;조무연
    • Journal of Plant Biology
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    • 제24권4호
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    • pp.217-231
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    • 1981
  • 본 연구는 화분단백질을 대상으로 Quercus속 기본종간의 grouping 확인과 그들간의 유사도를 혈청학적 방법으로 결정하고, rocket immunoelectrophoresis의 기술적 가치와 계통분류학적 가치를 논의하였다. 전반적인 정량적, 정성적 data로 보아 Quercus속이 Fagus속과는 멀리 분리되고, Quercus 속내에서는 Cyclobalanopsis 아속이 Lepidobalanus 아속으로부러 뚜렷하게 분리된다. 그러나 Cyclobalanopsis아속이 독립된 속계급까지의 승격은 보증되지 못한다. Lepidobalanus아속에 속하는 종들로 생산된 면역혈청은 같은 아속내의 종들과의 반응에서 강하게 나타났다. 특히 Q. aliena, Q. donarium, Q. serrata는 혈청학적 유사도에 있어서 상호일동으로 나타났다. Q. acutissima는 상기한 종들로부터 약간 멀어진 것 같고, 잡종인 Q. acutissima$\times$variabilis와는 거의 동일성을 나타냈다. 본 계통분류학적 연구에 이용된 rocket immunoelectrophoresis는 새로운 기술로서 그 가치가 증명되었다. 단백질 유사성의 정도를 얻기 위하여 이 기술이 응용되었는데, 모든 rocket height의 총 합계로 결정되었다

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다발성 척추골절을 동반한 비분비형 다발성 골수종 1례 - 증례보고 - (Nonsecretory Multiple Myeloma with Multiple Spine Fracture - Case Report -)

  • 허용석;박관호;지문표;김재오;김정철
    • Journal of Korean Neurosurgical Society
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    • 제30권12호
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    • pp.1435-1438
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    • 2001
  • A case of nonsecretory multiple myeloma in a 66 year-old-woman is reported. At first, she complained severe neck pain and radiologic finding showed C2 pathologic fracture. She complained severe low back pain 4 month later and L1 compression fracture was found. The lumbar MRI showed a 1.4cm-sized round enhancing lesion in the body of T12. Bone marrow aspiration biopsy at L1 spine showed a few polymorphous and small nests of mononuclear cell. L1 lamina bone biopsy showed many abnormal plasma cells. Pathologic diagnosis was multiple myeloma. However, plasma electrophoresis and protein immunoelectrophoresis of serum and urine of patient were normal. So, it is a nonecretory multiple myeloma case and the incidence of nonsecretory multiple myeloma is known to about 1% of all multiple myeloma.

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Purification of Vitellogenin and Egg Yolk Protein, and Changes of Vitellogenin Concentration during the Ovulation Period in Elkhorn Sculpin, Alcichthys alcicornis

  • CHOI Cheol Young;CHANG Young Jin;TAKEMURA Akihiro
    • 한국수산과학회지
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    • 제28권6호
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    • pp.753-760
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    • 1995
  • This study was conducted to determine the serum vitellogenin (VTG) concentration changes during the ovulation period in elkhorn sculpin, Alcichthys alcicornis. The results of sepacryl S-300 showed that the molecular weight of VTG could be 380,000. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis may indicate that the purified VTG consists of three subunits with molecular weights of 180,000, 118,000 and 85,000, respectively. Yolk protein purified from the egg extracts was eluted on an equilibrated sephacryl S-300 column, and its molecular weight was estimated 250,000. The precipitation lines of the female serum against the antiserum of the egg extracts were fused completely by immunoelectrophoresis and immunodiffusion analysis. VTG was detected in the serum, and hepatocytes from males injected with $17\beta-estradiol\;(E_2).$ Furthermore, VTG was immunochemically similar to yolk proteins. The concentration of VTG was high before ovulation $(9.80\pm0.81-11.02\pm0.09 mg/ml),$ and then decreased rapidly after ovulation $(less\;than\;6.19\pm0.59 mg/ml).$ This study suggested that VTG was synthesized in the liver by the action of $E_2$ and released to blood, and then incorporated into oocytes.

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면역학적 전기영동에 의한 층층나무속과 그 근연군의 계통학적 추가연구 (Further Systematic Studies on Cornus and Relatives by Immunoelectrophoresis)

  • Lee, Yoo-Sung
    • Journal of Plant Biology
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    • 제28권2호
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    • pp.95-104
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    • 1985
  • 층층나무속(Cornus) 식물 수종과 그 근연군의 계통학적 유연관계를 밝히기 위하여 종자단백질을 이중면역확산법, 사전포화처리법, 방사상면역확산법, 면역학적 전기영동법 등으로 분석함으로 혈청학적추가자료를 얻었다. Cornus florida 면역혈청을 사용한 침전반응에서 C. drummondi와 C. stolonifera는 혈청학적 유사도가 매우 높았고, C. amomum과 C. recemosa는 다음으로 높았다. Cornus와의 근연군에 해당하는 분류군 중에서 Nyssa(Nyssaceae)가 가장 가까운 근연성을 나타냈고, Corokia (Cornaceae 또는 Saxifragaceae)와 Griselinia는 매우 낮은 근연성을 보여서 Cornaceae에의 소속을 지지하고 있지 않다. 그러나 그들의 독립된 과로서 구분하기 위해서는 많은 다른 분류학적 증거가 필요할 것으로 본다. 면역학적 전기영동법과 사전포화처리법의 조합된 기술은 비교적 정교한 종자단백질 분석이 가능했다.

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황해산 두족류의 가용성 단백질에 대한 연구(II) (Soluble Proteins Analysis of Class Cephalopoda in the Yellow Sea(II))

  • 허회권;황규린
    • 한국양식학회지
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    • 제10권4호
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    • pp.425-433
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    • 1997
  • 황해산 두족류 6종(참갑오징어, Sepia esculenta ; 쇠갑오징어, Sepiella japonica : 한치꼴뚜기, Loligo chinensis : 살오징어, Todarodes pacificus : 참꼴뚜기, Loligo beka : 낙지, Octopus minor)의 안구단백질을 추출하여 항원-항체 교차반응을 실시하였다. 쇠갑오징어, 살오징어와 낙지의 안구단백질로 항혈청(antiserum)을 제작하였으며 갑오징어목, 살오징어목 및 낙지목에 속하는 두족류 6종의 안구단백질을 항원(antigen)으로 사용하였다. 갑오징어목 속하는 쇠갑오징어 및 참갑오징어에서 항원-항체 반응 양상이 매우 뚜렷하였으며 종간 비교에 기준이 될 수 있고 또한 유의성있는 침강선을 볼 수 있었다. 또한 gel filtration chromatography 방법으로 살오징어의 안구단백질을 분획하여 crystallin을 분리하였으며, 주 분획을 SDS-PAGE 전기영동 방법으로 분자량을 추정해 본 결과 약 20-35 KDa 였다.

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인유(人乳) 및 우유(牛乳)로부터 Secretory Immunoglobulin A의 분리(分離) 및 면역화학적(免疫化學的) 특성(特性)에 관(關)한 연구(硏究) (Studies on the Isolation and Immunochemical Properties of SIgA from Human and Bovine Milk)

  • 이조윤;김종우
    • 농업과학연구
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    • 제22권1호
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    • pp.82-95
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    • 1995
  • 본(本) 연구(硏究)는 한국인(韓國人) 산모(産母)로 부터 수집한 초유(初乳) 및 Holstein종(種)으로 부터 수집한 초유(初乳) 중에 존재하는 Secretory immunoglobulin A의 분리방법(分離方法)을 검토하고 분리(分離)된 분획들의 면역화학적(免疫化學的) 특성을 비교 검토하여 향후 인공영양(人工營養)에 대한 시험(試驗) 자료를 얻고자 하였으며 그 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 인유(人乳) 초유(初乳) 중의 SIgA는 Sephadex G-200과 Sepharose 6B를 통한 gel-filtration 만으로도 순수한 상태로 분리(分離) 정제할 수 있었으나, 우유(牛乳) 초유(初乳) 중의 SIgA는 gel-filtration을 반복하는 방법(方法)으로는 순수한 상태로 분리(分離) 및 정제할 수 없었으며, gel-filtration으로 얻어진 SIgA rich fraction을 모아서 DEAE를 실시한 결과(結果) 또한 마찬가지로 SIgA를 순수한 상태로 분리(分離)할 수는 없었다. 2. 인유(人乳) 초유(初乳)로 부터 gel-filtration을 통하여 분리(分離)한 분획들을 Immunoelectrophoresis 및 Double immunodiffusion 방법(方法)으로 면역화학적(免疫化學的) 특성을 살펴본 결과(結果), 첫번째 peak의 분획에서 IgM이 존재하고 있음을 확인할수 있었으며 두번째 peak의 분획에서 SIgA가 순수한 상태로 존재하고 있음을 확인할수 있었다. 반면에 우유(牛乳) 초유(初乳)로 부터 gel filtration 및 DEAE를 통하여 분리(分離)한 분획들을 같은 방법(方法)으로 면역화학적(免疫化學的) 특성을 살펴본 결과(結果), SIgA rich fraction 중에는 IgG가 다량(多量)으로 혼재(混在)되어 있음을 확인할 수 있었다. 3. 우유(牛乳) 초유(初乳)에서 분리(分離)한 SIgA rich fraction의 Fragment를 SDS-PAGE로 분자량을 측정해 본 결과(結果), Secretory component가 77,000-80,000, Heavy chain이 50,000-60,000, Light chain이 25,000-27,000 dalton으로 나타났으며 J-chain은 Light chain과 중복되어 분자량 측정이 어려웠다. 이와같은 결과(結果)는 인유(人乳) 초유(初乳) 중에 존재하는 SIgA Fragment 분자량과 유사한 결과(結果)를 보여주었다.

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