The chicken meat has been reported as one of the food causing allergic reactions predominantly to Korean. At present, several in vitro tests for immunoglobulinG (IgG)-mediated as well as IgE-mediated food allergy are available. 13 clinically chicken meat-allergic patients were investigated together with 4control subjects for identification of chicken meat-specific reactivity by ELISA. Also, protein profile and IgE, IgGtotal and IgG4-reacting allergens were detected by means of sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electro-phoresis (SDS-PAGE)and immunoblotting. Chicken meat extracts were prepared as raw, heated, heat and simulated gastric fluid (SGF) treated samples to characterize the stability of allergen to physicochemical treatment. SDS-PAGE revealed 9~200 kDa bands. And in immunoblotting 7 sera were identified most major bands between 10 and 78 kDa. In case of IgE, six proteins (17, 26, 35, 40, 78 kDa) were predominant in heat-treated extract, and the one (35 kDa) was present in SGF-treated preparations. In case of IgG$_{total}$ and IgG4, most of them showed a patters simmilar to IgE. There were significant differences (P<0.05) in IgE, IgG$_{total}$ , IgG4 Abs to chicken meat between the allergic and control subjects in ELISA. In addition, the concentration of IgG4Abs in the challenge-positive subjects was significantly higher than that of control subjects. It is considered that the specific IgE response to chicken meat was rarely prevalent to Koreans. However, the specific IgG4 response play an important role in the development of allergic symptoms.
Background IgG-mediated anaphylaxis occurs after infusion of certain monoclonal antibody-based therapeutics. New in vitro tests are urgently needed to diagnose such reactions. We investigated whether allergens trigger neutrophil oxidative burst (OB) and if neutrophil OB occurs due to allergen-specific IgG (sIgG). Methods Neutrophil OB was measured by dihydrorhodamine 123 flow cytometry using a leukocyte suspension spiked with a very small patch of the allergen crude extract, Dermatophagoides farinae (Der f). The mean fluorescence intensity ratio of stimulated to unstimulated samples was calculated as the neutrophil oxidative index (NOI). Results The Der f-specific NOI (Der f-sNOI) showed a time-dependent increase after Der f extract addition. At 15 min activation, higher Der f-sIgG levels were associated with lower Der f-sNOI values in 31 subjects (P<0.05). This inverse relationship occurs due to the initial blocking effect of free Der f-sIgG. Additionally, neutrophil OB was nearly absent (Der f-sNOI of -1) in two cases: a subject with undetectable Der f-sIgG levels and washed leukocyte suspensions deprived of Der f-sIgG. Conclusion Allergens can trigger neutrophil OB via preexisting allergen-sIgG. Neutrophil OB can be easily measured in a leukocyte suspension spiked with the allergen. This assay can be used to diagnose IgG-mediated anaphylaxis.
Atopic dermatitis is one of the most common skin disease in children and a characteristic chronically recurrent form of dermatitis with a hereditary tendency, affecting infants and may extend to the childhood or th the adult age. Environmental factors, stress, and foodstuffs such as milk, egg may cause atopic dermatitis. Nc/Nga mice were used as an animal model for human atopic dermatitis. The divided by 4group such as normal group, BMAC group, FK506 group, MR group for this study raised in conventional conditions. To investigate effect of Chamomile German on atopic dermatitis in NC/Nga mice, the serum IgE and IgG1 level were measured while the severity degree of the skin lesion was examined by the naked eyes of two volunteers who were unaware of the treatment status. The results were the followings. 1. The score on the severity degree of skin dermatitis in FK 506 and MR group was lower than that in control group. 2. The serum IgE level in control group was higher 25% than that in normal group. 3. The serum level of IgE in FK506 and MR group compares to control group was decreased. 4. The serum IgG1 level was decreased more than 3.5 times in FK506 compared to control group while MR group had significantly less the serum IgG1 than control group. From the above results, treatment of Chamomile German oil had the effect on atopic dermatitis in NC/Nga mice. If scientific researches on aroma oil are performed in various way, aroma oil will be used to cure skin dermatitis as a alternative therapy in the future.
Salmonella gallinarum로 면역화된 산란계로부터 생산된 계란 난황 중에 들어 있는 anti-S, gallinarum specific IgY를 분리하여 IgY의 효능을 살펴보았다. 또한 면역화 여부, specific IgY 농도별 및 균수별에 따른 항균력을 현미경적 관찰 및 탁도 측정, pH 변화로 검토하였다. 전체 IgY 중 anti-S. gallinarum IgY의 특이항체의 비율은 23%로 나타났다. 또한 anti-S, gallinarum IgY와 Salmonella유사 균주의 항원에 대한 IgY의 선택성을 조사한 결과 생산된 IgY는 S, gallinarum 에만 선택성을 갖는 것으로 나타났다. S, gallinarum 배양액에 anti-S. gallinarum specific IgY 0.3%를 첨가한 처리구는 상등액과 침전물에서 S, gallinarum가 응집되는 현상을 보였다. 그러나 면역을 하지 않은 닭에서 생산된 계란으로부터 추출한 IgY와 대조구에서는 응집 반응이 일어나지 않았다. Anti-S, gallinarum IgY를 첨가한 처리구가 대조구보다 S. gallinarum균들이 응집되는 정도에 있어서 확실한 효과를 나타내었다. 현미경 관찰시 균체들의 응집현상은 IgY 0.2% 이상 첨가시에 나타났으며, pH와 탁도에 있어서는 IgY 0.1% 이상 첨가구에서 S. gallinarum 성장 억제의 탁월한 효과를 볼 수 있었다. $10^5CFU/mL$에 Anti-S, gallinarum IgY 0.3%를 첨가한 처리구는 $10^3CFU/mL$와 거의 동일한 탁도를 나타내어 IgY에 의한 성장 억제를 확인할 수 있었다. 현미경적 관찰에서 IgY 첨가량이 증가할수록 더 큰 균괴를 형성하는 것을 볼 수 있었다. 위의 결과들을 통해 S. gallinarum로 면역화된 닭으로부터 생산된 계란에서 추출된 IgY를 사용하면 가금티푸스를 예방하는데 이용될 수 있을 가능성을 보여주었다.
Edwardsiella tarda로 면역한 닭의 난황항체 (IgY) 정제 방법을 비교하였다. Anti-E. tarda IgY의 정제는 PEG법, chloroform-PEG법, ammonium sulfate법과 정제 kit를 사용한 4가지 다른 방법으로 실시하였다. 정제된 IgY는 64 kDa의 heavy chain과 27 kDa의 light chain을 나타내었다. E. tarda로 면역된 IgY는 면역되지 않은 대조 IgY 보다 높은 ELISA가와 응집항체가를 나타내었으며, 정제된 IgY는 western blotting에서 anti-E. tarda 토끼혈청과 유사한 E.tarda 단백질을 인식하였다. PEG법과 ammonium sulfate법에 의해 정제된 IgY는 응집항체가가 1:512, chloroform-PEG법과 정제 kit에 의해 정제된 IgY는 1:128을 나타내었으며, PEG법이 IgY를 정제하기 위한 가장 빠른 방법이었다. 이 연구의 결과로 PEG법이 IgY의 생물학적 활성을 유지함과 더불어 신속하고 효과적인 정제방법임을 알 수 있었다.
The effects of cortisol on proliferation and apoptosis of tilapia surface immunoglobulin positive ($sIg^+$) lymphocytes isolated from different tissues were investigated. $sIg^+$ lymphocytes from the tilapia head kidney (HK) and spleen showed a higher proliferation and lower intracellular calcium ($Ca^{2+}{_i}$) level to Ig-crosslinking compared with peripheral blood $sIg^+$ lymphocytes. Peripheral blood $sIg^+$ lymphocytes stimulated with lipopolysaccharide (LPS) showed high levels of apoptosis in the presence of cortisol. HK and to a lesser extent spleen $sIg^+$ lymphocytes, although less sensitive than their equivalent in peripheral blood, showed cortisol-induced apoptosis irrespective of LPS stimulation of control levels. Compared to plasma values measured during stress conditions, proliferation regardless of LPS stimulation was apparently suppressed by cortisol that is effective in inducing a significant increase in apoptosis in all three different cell populations of $sIg^+$ cells, suggesting the immunoregulatory effect of cortisol in both LPS stimulated and non-stimulated conditions. Different sensitivity of $sIg^+$ cells to the cortisol, in regard to developmental stage and activity, could be related in inhibiting excessive and continuing depletion of $sIg^+$ lymphocytes.
IgA 신병증은 메산지움에 면역글로불린 A가 침착되는 질환으로 소아 연령에서 혈뇨의 흔한 원인 질환이며, 급성 감염후 사구체신염은 IgA 신병증 다음으로 소아 연령에서 흔한 혈뇨의 원인이다. IgA 신병증과 급성 감염후 사구체신염의 병태생리학적 기전은 아직 명확하게 밝혀지지 않고 있다. 그러므로 이 질환들 간의 병태생리학적 연관관계, 즉 연쇄상구균 감염이 IgA 신병증의 유발 혹은 악화 인자가 될 수 있는지, 또는 임상양상과 예후에도 어떤 영향을 미칠 수 있는지에 대해서는 더욱 알려진 것이 없다. 저자들은 임상적 및 병리학적 소견으로 IgA 신병증에 병발한 급성 연쇄상구균 감염후 사구체 신염으로 진단할 수 있는 증례 2례를 경험하였기에 문헌 고찰과 함께 보고하는 바이다.
Spirometra erinacei의 유충인 sparganum(metacercoid)에 감염되었을 때 호산성백혈구의 증가와 IgE 항체역가가 증가된다는 보고가 있다. 이 기생충에 감염되었을 때 IgG 항체와 IgE 항체를 유도하는 충체의 항원성분의 소재를 면역세포조직화학적 방법으로 충체의 성체와 유충에서 비교하였고, 또한 충체의 추출물을 SDS-PSGE와 EITB를 이용하여 IgG와 IgE 항체 유도 항원성분의 면역적 특성도 추구하였다. IgG와 IgE 항체 유도성분은 성체와 유충의 근층에서 공통적으로 분포되어 있었고, IgG 항원성분은 근층 뿐만 아니라 외피층과 유조직층에서도 반응이 나타났으며, 성체의 수태편절에서는 자궁 내에 있는 충난의 표면에서도 반응이 나타났다. 충체의 외피층에서 항원성분을 면역황금 표지법으로 관찰한 결과, 충체의 외피층(tegument)에서 IgG 항원성분의 분포밀도가 IgE 항원성분의 밀도보다 컸다. 충체의 추출물 중 IgG, IgE 유도 항원성 단백질의 면역학적 특성을 비교하였다. 성체의 추출물의 43개 분회 중 21개 분획이 IgG 항원성분으로서 반응하였고, IgE 항원성분으로는 21개 분획에서 반응하였다. 이들 중 11개 분획 (410, 304, 268, 174, 162, 116, 92, 86, 72, 60, and 59 kDa)에서 IgG와 IgE가 교차반응하였으며, 유충의 추출물의 36개 분획 중 IgG 항원성분으로 22개의 분획에서 반응이 나타났고, IgE 항원성분으로는 13개의 분획에서 반응하였으며, 이들 중 5개 분획(204, 116, 92, 79, and 59 kDa)에서 IgG와 IgE가 서로 교차반응하였다.
알레르기 환자의 증가로 인하여 알러겐을 찾는 것은 중요하다. MAST는 알러겐 특이 IgE항체를 측정하는 간단한 방법이다. 본 연구에서는 알레르기 환자에서 알러겐 특이 IgE 항체, 총 IgE, 호산구수와의 관련성을 평가하고자 하였다. 연구 결과 총 IgE 양성률은 흡입형 패널에서 96.97%, 식품형 패널에서 98.06%였다. 알러겐 특이 IgE 항체의 양성률은 흡입형 패널에서 집먼지 51.52%, 북아메리카 집먼지 진드기 45.46%, 고양이 31.99% 였으며, 식품형 패널에서 각각 55.34%, 42.72%, 34.96%였다. 혈청 총 IgE는 알레르기와 관련이 있었으나, 알레르기가 항상 호산구증가와 관련이 있는 것은 아니었다.
Kim, Jin-Sub;Cho, Sungae;Joo, Kyoung-Hwan;Lee, Joon-Sang;Conrad, Daniel H.;Cho, Sung-Weon
IMMUNE NETWORK
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제2권4호
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pp.195-201
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2002
Background: IgE is closely related to the development of allergies. However, the poor relationship between the specific IgE level and the severity of allergic diseases suggests the possibility of functionally different IgE isoforms. With this in mind, rat basophilic leukemia (RBL)-2H3 activation was analyzed with each type of rat IgE for two parameters, exocytosis and IL-4 mRNA production. RBL-2H3 has been well documented in the rat mucosal mast cell line. Methods: RBL-2H3 cells sensitized with each kind of rat IgE was activated by cross-linking FcRI with B5 (monoclonal anti-rat IgE mouse IgG antibodies). The RBL-2H3 exocytosis was measured by analyzing the ${\beta}$-hexosaminidase level, and the level of IL-4 mRNA synthesis was analyzed using semiquantitative RT-PCR. Rat IgE, which was produced by a parasite infection (REP), was prepared using either Paragonimus westermani metacercariae (REP-PW) or Anisakis simplex third stage larvae (REP-AS). A rat IgE prototype of IR162 was prepared by a peritoneal injection of immunocytoma. Results: The level of exocytosis showed a linear relationship with the rat IgE concentration when REP-PW or REP-AS was applied. However, it exhibited a biphasic response with IR162. In addition, the time course of heating at $56^{\circ}C$ illustrated the similarity between REP-PW and REP-AS, which differed from that of IR162. In contrast, the level of IL-4 mRNA synthesis in the RBL-2H3 cells with IR162 was comparable to that of either REP-PW or REP-AS. Conclusion: These results suggest that functionally different rat IgE isoforms exists in RBL-2H3 exocytosis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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