Objectives: Gallic acid (GA) is the major component of tannin which could be easily founded in various natural materials such as green tea, red tea, grape juice, and Corni Fructus. The purpose of this study is to investigate the effect of Gallic acid (GA) on production of interleukin (IL) in mouse macrophage Raw 264.7 cells stimulated by lipopolysaccharide (LPS). Methods: Productions of interleukins were measured by High-throughput Multiplex Bead based Assay with Bio-plex Suspension Array System based on $xMAP^{(R)}$ (multi-analyte profiling beads) technology. Firstly, cell culture supernatant was obtained after treatment with LPS and GA for 24 hour. Then, it was incubated with the antibody-conjugated beads for 30 minutes. And detection antibody was added and incubated for 30 minutes. And Strepavidin-conjugated Phycoerythrin (SAPE) was added. After incubation for 30 minutes, the level of SAPE fluorescence was analyzed on Bio-plex Suspension Array System and concentration of interleukin was determined. Results: The results of the experiment are as follows. 1. GA significantly inhibited the production of IL-3, IL-10, IL-12p40, and IL-17 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells at the concentration of 25, 50, 100, 200 uM (p<0.05). 2. GA significantly inhibited the production of IL-6 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells at the concentration of 50, 100, 200 uM (p<0.05). 3. GA diminished the production of some cytokine such as IL-4, IL-5, and IL-13 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells. 4. GA did not show the inhibitory effect on the production of IL-$1{\alpha}$ and IL-9 in LPS-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells. Conclusions: These results suggest that GA has anti-inflammatory activity related with its inhibitory effects on the production of interleukins such as IL-3, IL-10, IL-12p40, IL-17, and IL-6 in LPS-induced macrophages.
This study investigated the effects of Oligonol intake on cortisol, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6 concentrations in the serum at rest and after physical exercise loading. Nineteen healthy sedentary male volunteers participated in this study. The physical characteristics of the subjects were: a mean height of $174.2{\pm}2.7$ cm, a mean weight of $74.8{\pm}3.6$ kg and a mean age of $22.8{\pm}1.3$ years. Each subject received 0.5 L water with Oligonol (100 mg/day) (n = 10) or a placebo (n = 9) daily for four weeks. The body composition, the white blood cell (WBC) and differential counts as well as the serum cortisol, IL-$1{\beta}$, and IL-6 concentrations were measured before and after Oligonol intake. The cortisol concentration and serum levels of IL-$1{\beta}$ and IL-6 after Oligonol intake were significantly decreased compared to before treatment (P < 0.01, respectively). In addition, the rate of increase of these factors after exercise was decreased compared to the placebo group. There was no change in the WBC and differential cell counts. These results suggest that oral Oligonol intake for four weeks had a significant effect on inhibition of inflammatory markers in healthy young men.
Yangdan-tang (YD) is recorded as a treatment to treat exterior-related fever illness in the Korean medicine. In this study, we examined the anti-inflammatory effects of YD, using YD water extract and lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW 264.7 cells. First of all, we measured the amount of nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2), the products of inflammatory metabolism. Also, we measured enzymes such as inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2), as well as cytokines such as tumor necrosis factor alpha (TNF-α), interleukin 6 (IL-6), interleukin 1 alpha (IL-1α), and interleukin 1 beta (IL-1β). YD suppressed the production of NO and PGE2 in a dose dependent manner and reduced the amount of protein and the mRNA expression of iNOS and COX-2. Also, YD reduced the mRNA expression of TNF-α, IL-6, IL-1α and IL-1β. In conclusion, YD decreased production of LPS-induced inflammatory factor, which could be a clinical basic subject for inflammatory diseases.
목적 : Interleukin-6는 광범위한 영역의 조직과 세포의 성장과 분화에 영향을 미치는 다기능 사이토카인으로 사구체 메산지움 세포의 성장도 관여하는 것으로 알려져 있다. 메산지움 세포의 증식과 IgA의 침착을 특징으로 하는 IgA 신병증에서 IL-6가 메산지움 세포의 성장 인자임이 입증되었고 요중 IL-6치가 메산지움 증식의 정도나 예후 판정에 유용한 것으로 알려져 있다. HSP 신염은 병리조직학적으로나 임상적으로 IgA 신병증과 유사해 HSP 신염에서도 IL-6가 병리 기전에 관여할 것이 예상되므로 HSP 신염 환아에서 IL-6의 의의에 대해 알아보고자 하였다. 방법 : 대상 환아는 연세대학교 의과대학 영동 세브란스 병원 소아과에 입원한 HSP 환아 30명과 HSP 신염환아 18명 및 정상 대조군 10명으로 혈청 및 요중 IL-6치를 ELISA 방법으로 측정하였다. 결 과 : HSP 환아, HSP 신염 환아 및 정상 대조군의 혈청 IL-6치는 각각 $36.03{\pm}87.56pg/ml,\;32.68{\pm}71.59pg/ml,\;3.17{\pm}3.78pg/ml$로 HSP 환아와 HSP 신염 환아에서 정상 대조군에 비해 유의하게 증가되어 있었으며 (p<0.05), 요중 IL-6치는 HSP 신염 환아에서 $62.23{\pm}73.53pg/ml$로 HSP 환아($9.05{\pm}8.35pg/ml$)와 정상 대조군($5.83{\pm}5.62pg/ml$)에 비해 의미있게 증가된 소견을 보였다.(p<0.05). HSP 신염 환아에서 24시간 요단백량과 요중 IL-6치는 24시간 요단백량이 증가할수록 요중 IL-6치가 통계학적으로 유의하게 중가하였으나며(y=51.923x-45.091, $R^2=0.6185$, p=0.0014), 혈청 IL-6치와 요중 IL-6치간에는 유의한 상관 관계는 없었다. 결론 : IL-6는 IgA 신병증에서와 마찬가지로 HSP 신염에서 메산지움 증식에 연관이 있는 것으로 사료되며 경과나 예후 판정에 유용한 보조 지표가 될 수 있는 지에 대한 추후 관찰이 요할 것으로 사료된다.
Purpose: We aimed to investigate the associations between polymorphisms of interleukin-1A (IL-1A), IL-1B, and IL-1 receptor antagonist (IL-1RN) and prostate cancer (PCa) risk. Materials and Methods: A comprehensive search for articles of MEDLINE and EMBASE databases and bibliographies of retrieved articles published up to August 3, 2014 was performed. Methodological quality assessment of the trials was based on a standard quality scoring system. The meta-analysis was performed using STATA 12.0. Results: We included 9 studies (1 study for IL-1A, 5 studies for IL-1B, and 3 studies for IL-1RN), and significant association was found between polymorphisms of IL-1B-511 (rs16944) as well as IL-1B-31 (rs1143627) and PCa risk. IL-1B-511 (rs16944) polymorphism was significantly associated with PCa risk in homozygote and recessive models, as well as allele contrast (TT vs CC: OR, 0.74; 95%CI, 0.58-0.94; P=0.012; TT vs TC+CC; OR, 0.79; 95%CI, 0.63-0.98; P=0.033; T vs C: OR, 0.86; 95%CI, 0.77-0.96; P=0.008). The association between IL-1B-31 (rs1143627) polymorphism and PCa risk was weakly significant under a heterozygote model (OR, 1.35; 95%CI, 1.00-1.80; P=0.047). Conclusions: Sequence variants in IL-1B-511 (rs16944) and IL-1B-31 (rs1143627) are significantly associated with PCa risk, which provides additional novel evidence that proinflammatory cytokines and inflammation play an important role in the etiology of PCa.
Although interleukin-11 (IL-11) has been reported to be elevated in hypoxic tumors and has been associated with a poor prognosis in various cancers, little is known about its precise role in promoting metastasis in hypoxic tumors. In the present study, the molecular mechanism underlying the effects of IL-11 on MDA-MB-231 breast cancer cells migration and invasion in relation to metastasis under hypoxic conditions has been defined. Inhibition of IL-11 expression or function using small interfering RNA (siRNA) or a neutralizing antibody attenuated hypoxic MDA-MB-231 breast cancer cell migration and invasion through down-regulation of matrix metalloproteinases (MMPs) and activation of epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) related gene expression. In addition, hypoxia-induced IL-11 increased STAT3 phosphorylation and STAT3 knockdown suppressed hypoxic MDA-MB-231 breast cancer cell invasion due to reduced MMP levels and reprogrammed EMT-related gene expression. These results suggest that one of the hypoxic metastasis pathways and the regulation of this pathway could be a potential target for novel cancer therapeutics.
본 연구에서는 키토산이 마우스에서 Th1과 Th2 사이토카인의 생성에 미치는 효과를 보기 위하여 키토산에 의한 IL-2 생성의 변화, 키토산에 의한 IFN-$\gamma$ 생성의 변화, 그리고 키토산에 의한 IL-4 생성의 변화, 키토산에 의한 IL-10 생성의 변화를 시험관내에서 시험하였다. 또한 LPS, Con A, PHA-P와 같은 세포자극물과 키토산이 함께 작용되었을 때 상기 사이토카인의 생성의 변화를 관찰하였다. 키토산을 비장세포에 노출시켰을 때 Th1 사이토카인인 IL-2와 IFN-$\gamma$의 생성이 크게 증가하였지만 고농도의 키토산에 의해서는 오히려 대조군에 비하여 감소하였다. LPS와 같은 세균독소, Con A와 같은 세포자극물을 비장세포에 노출시켰을 때 IL-2와 IFN-$\gamma$의 생성은 큰 상승을 나타냈으며 LPS의 경우 키토산에 의해서 IL-2와 IFN-$\gamma$의 생성이 증폭되었다. 키토산을 비장세포에 노출시켰을 때 Th2 사이토카인인 IL-4와 IL-10의 생성은 큰 증가를 보이지 않았다. LPS와 같은 세균독소에 의한 IL-4와 IL-10의 상승이 키토산에 의해서 억제되었다. 따라서 이러한 결과들로 부터 키토산이 LPS와 같은 세균독소가 존재하는 가운데 Th1 사이토카인을 증가시키고 Th2 사이토카인을 감소시킴에 따른 면역반응 환경이 이루어질 가능성이 높다 하겠다. 앞으로 키토산에 대한 더 많은 자료의 축적이 이루어지게 되면 임상에서 Th1/Th2 면역반응의 균형을 유지하는데 이용될 가능성도 있다 하겠다.
Objectives : To investigate the anti-inflammatory effects of Prunella vulgaris pharmacopuncture in lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory rat model. Methods : Sprague-Dawley rats were divided into 5 groups; normal control (n=8), LPS control (n=8), LPS+Prunella vulgaris pharmacopuncture at CV4 (CV4, n=8), LPS+Prunella vulgaris pharmacopuncture at ST36 (ST36, n=8), and LPS+Prunella vulgaris pharmacopuncture at CV12 (CV12, n=8). Pharmacopuncture was given every two days for 4 weeks followed by inflammation induction by peritoneal LPS injection (5mg/kg). Proinflammatory cytokines including interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$), interleukin-10 (IL-10), thiobarbituric acid reactive substance (TBARS) from blood and liver tissue were compared before and 5 hrs after inflammation induction. Results : In CV4 and CV12 groups, plasma IL-$1{\beta}$, IL-6 and TNF-$\alpha$ levels increased by LPS injection, significantly decreased 5 hrs after injection (p<0.05). For CV12 group, plasma IL-10 concentration significantly increased (p<0.05). Liver IL-$1{\beta}$ and IL-6 levles significantly decreased in CV4 and CV12 groups (P<0.05), while normal and LPS control groups were not significantly different in TNF-$\alpha$ and IL-10 levels. Plasma TBARS concentration was significantly decreased in CV12 group, while there was no significant difference among LPS control and pharmacopuncture groups for liver TBARS concentration. Conclusions : Based on the present findings, Prunella vulgaris pharmacopuncture at CV12 may have a potentially preventive anti-inflammatory effect in an LPS-induced inflammatory rat model.
Objective: The presence of the various cytokines in human peritoneal fluid has been evaluated incompletely. Changes in cytokine levels may be related to activation of peritoneal macrophage and T-lymphocyte, development of endometriosis, and infertility. This study assesses peritoneal fluid levels of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), interleukin-10 (IL-10) and tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) in infertile women with endometriosis and normal women without endometriosis. Design: Prospective and case-control study in university hospital. Materials and Methods: Cytokine levels in peritoneal fluid obtained during laparotomy or laparoscopy from 21 patients in infertile patients with endometriosis and 24 controls undergoing laparotomy or laparoscopy with no evidence of pelvic endometriosis were determined by enzyme-linked immunosorbent assay. Results: The mean levels of interleukin-6 in infertile patients with endometriosis and controls were $72.7{\pm}23.7$ pg/ml and $18.5{\pm}9.7$ pg/ml respectively (p=0.02). Similarly, the mean levels of interleukin-8 in infertile patients with endometriosis was significantly higher than that of controls ($445.0{\pm}89.6$, vs $45.1{\pm}48.4$, p=0.04). The mean concentration of interleukin-10 in infertile patients with endometriosis was significantly lower than that of controls ($1.09{\pm}0.04$ vs $2.19{\pm}0.03$, p=0.03). The level of tumor necrosis factor-${\alpha}$ was not significantly different between the two study groups. Conclusions: Increased IL-6 and IL-8 and decreased IL-10 levels in the peritoneal fluid may be related to pathogenesis in the endometriosis and infertility, suggesting that partially contribute to the disturbed immune regulation observed in infertili women with endometriosis.
Interleukin-2 (IL-2) is a vital cytokine secreted by activated T lymphocytes, and plays an important role in the regulation of cellular functions and immunity of animals. In this study, the recombinant duck IL-2 (rduIL-2) was secretory expressed in Pichia pastoris (P. pastoris). The recombinant P. pastoris strain was cultured in shake flasks and then scaled up in a 5.0-l bioreactor. The result showed that the maximal fresh-cell-weight of 594.1 g/l and the maximal $OD_{600}$ of 408 were achieved in the bioreactor. The rduIL-2 was purified by two steps of purification procedures, and approximately 311 mg of rduIL-2/L fermentation supernatant was obtained. SDS-PAGE showed that the purified rduIL-2 constituted a homogeneous band of ~16 kDa or ~14 kDa corresponding to the glycosylated or non-glycosylated duIL-2 protein in size, respectively. The bioactivity of rduIL-2 was determined by lymphocyte proliferation assay. The result indicated that the rduIL-2 greatly promoted the proliferation of ConA-stimulated lymphocytes in vitro. The P. pastoris expression system described here could provide promising, inexpensive, and large-scale production of the rduIL-2, which lays the foundation for development of novel immunoadjuvants to enhance both the immunity of ducks against various infectious pathogens and vaccine efficacy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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