The capacities of bacterial DNA, extracted from Salmonella typhimurium, and lipopolysaccharide (LPS), extracted from Salmonella minnesota, to activate mouse peritoneal macrophages in vitro were compared. Activation was assessed by estimating e levels of 3 cytokines, IL-10, IL-12, and $IL-1{\beta}$, at time intervals of 3, 6, 9, and 24 h after addition of LPS and/or DNA to macrophage cultures. Cytokine levels in culture supernatants were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and cytokine mRNA levels were estimated based on band intensity in cultured cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results obtained demonstrated the ability of DNA and LPS to elicit increased production of all 3 cytokines as compared to controls. In the amount tested, LPS appeared to be a more potent inducer of IL-12, and $IL-1{\beta}$, whereas DNA induced higher levels of IL-10. DNA and LPS, used in combination, exhibited neither an additive nor a synergistic effect. Rather, an antagonist effect appeared to occur. RT-PCR results correlated well with ELISA.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.4
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pp.1101-1111
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2003
Our study shows that EC extract has inhibitory effect on pro-inflammatory cytokines such as TNF-α, IL-1, IL-6, iNOS and COX2 in hFLSs. IL-1β, IL-6, iNOS and COX2 mRNA expression is suppressed at a low dasage (1㎍/ml) of EC extract. TNF-α was also suppressed at higher dosages (10 ㎍/ml, 100㎍/ml). EC extract also inhibited TNF-α, IL-1β and IL-6 production in pro-inflammatory cytokine stimulated-hFLSs. Expecially IL-1β(p<0.05) production are suppressed significantly. On the other hand, EC extract did not show any cytotoxicity. Thses data suggest that EC extract has anti-inflammatory effect mostly by inhibiting IL-1β production, and thus could be used to prevent or treat some inflammatory disease such as RA. It remains to be known what are the major components responsible for anti-inflammatory effect and what is the main mechanism.
The aim of the present study is to investigate the anti-inflammatory effect of a Rice Bran Ethanol Extract (RBE). Inflammation, such as a bacterial infection in vivo metabolites, such as external stimuli or internal stimuli to the defense mechanisms of the biological tissue a variety of intracellular regulatory factors deulin inflammatory TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, IL-8, such as proinflammatory cytokines, prostagrandin, lysosomal enzyme, free radicals are involved in a variety of mediators. The present study was designed to determine the effect of the RBE on pro-inflammatory factors such as NO, iNOS expression and TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6 in lipopolysaccharide (LPS) - stimulated RAW264.7 macrophages cells. The cell toxicity was determined by MTS assay. To evaluate of anti-inflammatory effect of RBE, amount of NO was measured using the NO detection kit and the iNOS expression was measured by reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). And proinflammatory cytokines were measured by ELISA kit. As a result, the RBE reduced NO, iNOS expression and TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6 production without cytotoxicity. Our results suggest that the RBE may have an anti-inflammatory property through suppressing inflammatory mediator productions and appears to be useful as an anti-inflammatory material.
Endotoxemia induces production of inflammatory mediators and acute phase proteins, leading to multiorgan injury and systemic inflammation. Hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis activation and glucocorticoids (GCs) release modify endotoxemia-induced inflammatory responses. In the present study, we investigated whether pre-exposure of GCs influences endotoxin-induced production of inflammatory mediators in hepatocytes. Hepa1c1c-7 cells were pretreated with low concentrations of corticosterone for 24 h and then cultured without corticosterone in the presence or absence of LPS. Our results demonstrated that LPS alone significantly enhanced production of IL-6 and CRP but reduced vascular endothelial growth factor (VEGF) compared to controls. Combination of corticosterone pretreatment and LPS significantly upregulated production of IL-6, IL-$1{\beta}$, and VEGF but downregulated CRP compared to those in LPS alone. These findings suggest that in low concentration of corticosterone-preexposed hepatocytes, endotoxemia may induce upregulation of IL-6, IL-$1{\beta}$, VEGF and but downregulation of CRP.
Objectives : We investigated the synergistic effects of bee venom (BV) and natural killer (NK) cells on B16F10 melanoma cell apoptosis mediated by IL-4. Methods : We performed a cell viability assay to determine whether BV can enhance the inhibitory effect of NK-92MI cells on the growth of B16F10 melanoma cells, and western blot analysis to detect changes in the expression of IL-4, $IL-4R{\alpha}$, and other apoptosis-related proteins. EMSA was performed to observe the activity of STAT6. To confirm that the inhibitory effect of BV and NK cells was mediated by IL-4, the above tests were repeated after IL-4 silencing by siRNA (50 nM). Results : B16F10 melanoma cells co-cultured with NK-92MI cells and simultaneously treated by BV ($5{\mu}g/ml$) showed a higher degree of proliferation inhibition than when treated by BV ($5{\mu}g/ml$) alone or co-cultured with NK-92MI cells alone. Expression of IL-4, $IL-4R{\alpha}$, and that of other pro-apoptotic proteins was also enhanced after co-culture with NK-92MI cells and simultaneous treatment with BV ($5{\mu}g/ml$). Furthermore, the expression of anti-apoptotic bcl-2 decreased, and the activity of STAT6, as well as the expression of STAT6 and p-STAT6 were enhanced. IL-4 silencing siRNA (50 nM) in B16F10 cells, the effects of BV treatment and NK-92MI co-culture were reversed. Conclusion : These results suggest that BV could be an effective alternative therapy for malignant melanoma by enhancing the cytotoxic and apoptotic effect of NK cells through an IL-4-mediated pathway.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.26
no.6
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pp.902-907
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2012
The worldwide prevalence and severity of allergic diseases including atopic dermatitis and asthma has increased dramatically over the past decade, especially in developed countries. Mast cells are important effector cells in allergic reactions. The purpose of this study was undertaken to investigate the anti-allergic activities of the extract of Duchesnea chrysantha (DCE). DCE was prepared by extracting with 80% ethanol. In the present study, we investigate the effect of DCE on the production of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$, interleukin (IL)-$1{\beta}$, IL-6, IL-8, and histamine in the human mast cell line (HMC-1 cells) and on the scratching behavior in hairless mice. Various concentrations of DCE were treated before the activation of HMC-1 cells with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) plus calcium ionophore A23187. PMA plus A23187 significantly increased TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-8 production compared with media control. We also show that the increased cytokines such as TNF-${\alpha}$ IL-$1{\beta}$, IL-6, and IL-8 were significantly inhibited by DCE in a dose-dependent manner. Moreover, DCE inhibited the histamine release from HMC-1 cells stimulated by compound 48/80, which promotes histamine release. Futhermore, the administration of DCE reduced the scratching behavior induced by pruritogen (compound 48/80 or histamine) in hairless mice. These results suggest that DCE has a potential use as a medicinal plant for treatment against allergy-related disease.
We investigated the question of whether cholesterol catabolite can influence expression of inflammatory cytokines via Toll-like receptors (TLR) in monocytic cells. Treatment of THP-1 monocytic cells with 27-hydroxycholesterol (27OHChol) resulted in induction of gene transcription of TLR6 and elevated level of cell surface TLR6. Addition of FSL-1, a TLR6 agonist, to 27OHChol-treated cells resulted in transcription of the $IL-1{\alpha}$ gene and enhanced secretion of the corresponding gene product. However, cholesterol did not affect TLR6 expression, and addition of FSL-1 to cholesterol-treated cells did not induce expression of $IL-1{\alpha}$. Using pharmacological inhibitors, we investigated molecular mechanisms underlying the expression of TLR6 and $IL-1{\alpha}$. Treatment with Akt inhibitor IV or U0126 resulted in significantly attenuated expression of TLR6 and $IL-1{\alpha}$ induced by 27OHChol and 27OHChol plus FSL-1, respectively. In addition, treatment with LY294002, SB202190, or SP600125 resulted in significantly attenuated secretion of $IL-1{\alpha}$. These results indicate that 27OHChol can induce inflammation by augmentation of TLR6-mediated production of $IL-1{\alpha}$ in monocytic cells via multiple signaling pathways.
Objective : The purpose of this study is to observe the effect of Aqua-acupuncture with Stephania Tetrandra Solution (ST-AS) on arthritis. Methods : The author performde several experimental items : that isgene expression and secretion of IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$, MMP-2, production of ROS, paw thickness, DTH, weight of spleen, expression of CD4+, CD8+, CD19+ in the spleen, production of IL-6, TNF-${\alpha}$, examination of histology. Results : The obstain results are summarized as follows. 1. IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$ gene expression of hFLS were significantly inhibited in treatmentgroup, and gene expression of MMP-2 was not inhibited in treatmentgroup. 2. The secretion amount of IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$ were significantly inhibited in treatmentgroup. 3. Expression of P-38 MAP kinase and production of ROS were inhibited in treatmentgroup. 4. Treatmentgroup were significantly inhibited the incidence of arthritis, hind paw edema, the index of arthritis and DTH of CIA (collagen II-induced arthritis) mice. 5. Treatmentgroup were significantly decreased splenetic weight and the number of CD4+, CD8+, CD19+ activated cells and secretion aroout of IL-6, TNF-${\alpha}$ of CIA (collagen II-induced arthritis) mice.. 6. Treatmentgroup were expressed form of new bone, synoviumin, new margine in histology imperison to controlgroup. Conclusions : Taking all these observations into account, ST-AS injection is considered to be effective in treating arthritis and put to practical use in future arthritis clinic.
The immunomodulatory effect of Codonopsis lanceolata based on the production of cytokines and the activation of macrophage was studied. The mRNA expression of nitric oxide synthase (iNOS) was gradually induced after 24 hr treatment of Codonopsis lanceolata, and NO production was a maximum after 24 hr treatment with 1 mg/mL. RAW 264.7 cell on in vitro treatment with Codonopsis lanceolata induced mRNA of cytokines such as interleukin-1(IL-1)${\beta}$, interleukin-6(IL-6), tumor necrosis $factor(TNF)-{\alpha}\;and\;interferon(IFN)-{\gamma}$; $IL-1{\beta}$ and IL-6 mRNA were gradually induced up to 24 hr, $TNF-{\alpha}\;mRNA$ was regularly induced up to 24 hr, and $IFN-{\gamma}\;mRNA$ level was a maximum within 1 hr. These results suggest that Codonopsis lanceolata exerts as an effective immunomodulator and enhances antitumor activity of macrophages.
This study investigated the effects of Oligonol intake on cortisol, interleukin (IL)-$1{\beta}$, and IL-6 concentrations in the serum at rest and after physical exercise loading. Nineteen healthy sedentary male volunteers participated in this study. The physical characteristics of the subjects were: a mean height of $174.2{\pm}2.7$ cm, a mean weight of $74.8{\pm}3.6$ kg and a mean age of $22.8{\pm}1.3$ years. Each subject received 0.5 L water with Oligonol (100 mg/day) (n = 10) or a placebo (n = 9) daily for four weeks. The body composition, the white blood cell (WBC) and differential counts as well as the serum cortisol, IL-$1{\beta}$, and IL-6 concentrations were measured before and after Oligonol intake. The cortisol concentration and serum levels of IL-$1{\beta}$ and IL-6 after Oligonol intake were significantly decreased compared to before treatment (P < 0.01, respectively). In addition, the rate of increase of these factors after exercise was decreased compared to the placebo group. There was no change in the WBC and differential cell counts. These results suggest that oral Oligonol intake for four weeks had a significant effect on inhibition of inflammatory markers in healthy young men.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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