본 연구는 조기발병형 치주염의 서로 다른 4가지 표현형에 있어서 Porphyromonas gingivalis(Pg) 381과 Actinobacillus actinomycetemcomitans(Aa) Y4에 대한 상승된 IgG subclass의 양상을 평가하기 위해 시행하였다. Subform I(distinctive localized juvenile periodontitis pattern)에서 3명 subform II(post juvenile periodontitis pattern)에서 19명, subform III (localized but rapidly progressing pattern)에서 15명, subform IV(distinctive rapidly progressing periodontitis pattern)에서 15명의 환자를 조사하여 Pg에 대한 그들의 total IgG level과 각각의 IgG subclass level 및 Aa에 대한 IgG level을 검사했다. Pg에 대한 total IgG level은 subform II와 IV보다 subform I과 III에서 훨씬 높게 나타났다. IgG3 level이 subform I과 IV사이에서 현저한 차이가 있다는 점을 제외하고는, 다른 IgG subclass level에서 subform 사이에 아무런 차이가 없었다. Pg에 대한 IgG subclass는 single class 혹은 다양한 group에서 상승되어 나타났으며, IgG1+2+4가 가장 흔하게 발견되었고, 다음으로 IgG4 단독, IgG2 단독, IgG2+4, IgG2+3+4의 순으로 발견되었다. IgG2와 IgG4가 빈번히 상승되어 발견되었는데, 특히 severe form(subform III & IV)에서 그러했다. 뿐만 아니라, IgG level은 subform II, III, IV와 일치하여 점차적으로 증가하였고, 반면에 IgG1/IgG4 ratio는 그와 일치하여 감소되었다. 이러한 ratio의 감소는 단백질성의 오래된 항원의 과부하로 인해 immunoglobulin gene의 전환을 가능하게 한다는 것을 나타내고 있다. Aa에 대한 IgG2 level은 다른 유형보다 subform I에서 상당히 높았다. Pg에 대한 IgG2 levels이 subform I의 국소 부위에서 발생하는 disease activity와 밀접한 관련이 있으며, Aa의 경우에는 이러한 관련성이 나타나지 않았다. Pg에 대한 IgG2 level은 18-25세에서 훨씬 높은 동시에 26-35세에서는 감소했으며 결국 30대 후반에서는 더 높은 수치로 되돌아갔다. 이러한 결과는 Pg에 대한 IgG2 및 IgG responsiveness (single 혹은 combined)가 EOP의 severe form의 발달에 중요하게 작용하며 IgG2 levels은 IgG1/IgG4 ratio와 더불어 EOP의 localized type이 generalized type으로 계속 진행하는 것을 조절하는 역할을 하는 것으로 보인다는 것을 강하게 시사하였다.
Yang Joo Kang;Deuk-Su Kim;Seyoung Kim;Young-Jin Seo;Kisung Ko
BMB Reports
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제56권7호
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pp.392-397
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2023
In this study, recombinant Fc-fused Prostate acid phosphatase (PAP) proteins were produced in transgenic plants. PAP was fused to immunoglobulin (Ig) A and M Fc domain (PAP-IgA Fc and PAP-IgM Fc), which were tagged to the ER retention sequence KDEL to generate PAP-IgA FcK and PAP-IgM FcK. Agrobacterium-mediated transformation was performed to produce transgenic tobacco plants expressing four recombinant proteins. Genomic PCR and RT-PCR analyses confirmed the transgene insertion and mRNA transcription of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK in tobacco plant leaves. Western blot confirmed the expression of PAP-IgA Fc, PAP-IgM Fc, PAP-IgA FcK, and PAP-IgM FcK proteins. SEC-HPLC and Bio-TEM analyses were performed to confirm the size and shape of the plant-derived recombinant PAP-Fc fusion proteins. In mice experiments, the plant-derived IgA and IgM Fc fused proteins induced production of total IgGs including IgG1 against PAP. This result suggests that IgA and IgM Fc fusion can be applied to produce recombinant PAP proteins as a prostate cancer vaccine in plant expression system.
목 적 : 소아 신증후군에서 알부민을 비롯한 단백들과 IgG 치의 감소가 관찰된다. 신증후군에서 관찰되는 IgG 감소에서 IgG 아군간에 차이가 있는 지와 B형 간염 및 홍역 항체의 양성률이 대조군과 차이가 있는지를 알아보았다. 방 법 : 가톨릭대학교 대전성모병원 소아과에 신증후군으로 입원하였던 21명과 같은 연령대의 건강한 환아 25명을 대상으로, 혈청에서 IgG, IgM, IgA, IgE 및 IgG subclasses(IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4), B형 간염 표면 항체(anti-hepatitis B suface IgG, anti-HBs IgG) 및 항홍역 IgG 항체(anti-measles IgG)를 측정하였다. 결 과 : 신증후군 환아들의 평균 연령 $6.9{\pm}3.0$세로, 면역글로불린 평균값은 IgG $390{\pm}187\;mg/dL$, IgG1 $287{\pm}120\;mg/dL$를 보였다. 대조군의 평균 연령은 $7.5{\pm}3.4$세로, IgG $1,025{\pm}284\;mg/dL$, IgG1 $785{\pm}19\;mg/dL$이었다. IgE 값에서 250 IU/mL 이상을 보인 경우는 신증후군에서 11명(52.4$\%$), 대조군에서 7명(28$\%$)이 있었다(.P=0.01). 신증후군 환아에서 IgG 및 IgG 아군 모두에서 유의한 감소를 보였으며(P<0.001), IgM 값은 증가($251{\pm}183\;mg/dL\;vs.\;153{\pm}55\;mg/dL$, P=0.02)를 보였으나 IgA 값은 차이를 보이지 않았다. 한편 Anti-HBs의 양성률은 신증후군 환아군에서 42.9$\%$(21명 중 9명), 대조군에서 52$\%$ (13/25명)를, 항홍역 항체 양성률은 각각 76$\%$ (16/21명)와 92$\%$ (23/25명)를 보였으나 통계학적으로 두 군간에 차이는 없었다. 결 론 : 소아 신증후군 환아에서 IgG 및 모든 IgG 아군의 감소를 보였다. 예방접종에 의한 B형 간염 및 홍역 항체 양성률의 감소가 관찰되었으나 통계학적인 차이는 보이지 않았다. IgG 감소의 기전에 대한 후속 연구가 필요할 것으로 보인다.
Background: Anti-IgE mAb which binds circulating but not receptor-bound IgE has been shown to be effective in treatment for asthma and other allergic diseases. However, the mechanisms by which anti-IgE mAb influences the pathophysiological responses are remained to be illustrated. This study was undertaken to examine the therapeutic efficacy of non-anaphylactogenic anti-mouse IgE mAb using murine models of IgE-induced systemic fatal anaphylaxis. Methods: Active systemic anaphylaxis was induced by either penicillin V(Pen V) or OVA and passive systemic anaphylaxis was induced by either anaphylactogenic anti-mouse IgE or a mixture of anti-chicken gamma globulin (CGG) IgG1 mAb and CGG. The binding of the Fc portion of anti-IgE to CHO-stable cell line expressing mouse Fc ${\gamma}$ RIIb was examined using flow cytometry. Fc fragments of anti-IgE mAb were prepared using papain digestion. The expression of phosphatases in lungs were assessed by Western blotting and immunohistochemistry. Results: Anti-IgE mAb prevented IgE- and IgG-induced active and passive systemic fatal reactions. In both types of anaphylaxis, anti-IgE mAb suppressed antigen-specific IgE responses, but not those of IgG. Anti-IgE mAb neither prevented anaphylaxis nor suppressed the IgE response in Fc ${\gamma}$ RIIb-deficient mice. The Fc portion of anti-IgE mAb was bound to murine Fc ${\gamma}$ RIIb gene-transfected CHO cells and inhibited systemic anaphylaxis. Anti-IgE mAb blocked the anaphylaxis-induced downregulation of Fc ${\gamma}$ RIIb-associated phosphatases such as src homology 2 domain-containing inositol 5-phosphatase (SHIP) and phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten (PTEN). Conclusion: Anti-IgE mAb prevented anaphylaxis by delivering nonspecific inhibitory signals through the inhibitory IgG receptor, Fc ${\gamma}$ RIIb, rather than targeting IgE.
호르텐스극구흡충 피낭유충을 흰쥐 및 마우스에 경구 감염시킨 후 실험동물의 혈청 및 장액에 대한 IgA 및 IgE 항체가 변화 추이를 ELISA방법으로 비교 분석하였다. 감염 흰쥐에서 혈청의 경우 IgA와 IgE항체가를 대조군과 비교해 볼 때 유의한 차이를 나타내지 않았다. 그러나 장액의 IgA항체가는 감염 후부터 계속 증가하여 8주에서 최고치 (0.47$\pm$0.11)를 나타냈다. 감염 흰쥐에서 충체 회수율은 8주까지 계속 충체 수가 감소하는 경향을 보였는데 특히, 장액의 IgA 항체가 성적이 최고치를 나타낸 기간에 유의한 감소 성적을 나타냈다 감염 마우스 혈청에서의 IgA항체가는 감염 기간동안 계속적으로 증가하여 감염 8주에서 최고치 (0.45$\pm$0.01)를 보였으며, IgE의 경우는 감염 후부터 7주까지 증가하여 7주에서 그 최고치 (0.23$\pm$0.02)를 보였으나 그 이후 다시 감소되었다. 장액의 경우 IgA 항체가는 감염 후부터 증가하여 8주에서 최고치 (0.14$\pm$0.01)를 보였으며, 이는 혈청 IgA의 항체가 변화와 유사한 경향을 보였다. 감염 마우스의 충체 회수율은 감염 후부터 계속적으로 감소하였으며 7주와 8주에서 유의한 감소를 보였는데 (p<0.05)이것은 장액에서의 IgA와 IgE, 혈청에서의 IgA의 항체가 최고치를 나타낸 기간과 일치하였다. 이상의 결과에서 호르텐스극구흡충 감염 마우스에 있어서, IgA 및 IgE 항체가의 유무는 충체의 배출(expulsion)에 일부 연관되어 있음을 알 수 있었다.
동물 혈청 중의 IgG (Immunoglobulin G)에 해당되는 난황에 포함된 면역 단백질 IgY (Immunoglobulin Yolk)는 식품 단백질로 장내 면역 물질로 중요하다. IgY를 정제하기 위해 신선란의 노른자에 카리지난이나 아라빅검을 전처리 물질로 사용하였다. 전처리 후 FPLC (Fast Protein Liquid chromatography)의 DEAE (Diethylaminoethyl) Sepharose 칼럼에서 이온교환법에 의해 불순물을 제거하여 IgY를 얻고, GF HPLC (Gel Filtration High Performance Liquid Chromatography)로 IgY의 분자량을 측정하고 표준 IgY와 비교하여 IgY 단백질을 동정하였다. GF HPLC에서 IgY의 다양성을 발견하였고 IgY 단백질 군의 다양성을 IE HPLC (Ion Exchange High Performance Liquid Chromatography)에서 AX, CX, SCX 칼럼을 사용하여 pH, NaCl 농도를 바꾸어 조사하였다. AX를 사용하여 0.5M NaCl, pH=8 조건에서 3개의 IgY 피크를 분리하였고, SCX를 이용했을 때 0.5M NaCl, pH=5 조건에서도 3개의 IgY 피크를 분리할 수 있었다.
21명의 간흡충 감염환자 및 15명의 건강인으로부터 혈청을 수집하여 혈청내 IgE와 간흡충에 대한 특이 IgE 항체를 RIST와 RAST법을 이용하여 측정하였다. 간흡충 감염환자 및 건강인의 혈청 IgE와 특이 IgE는 각각 2,372 lU/ml과 364IU/ml 그리고 52.0%와 4.4%로 간흡충 감염자에서 모두 유의하게 상승되어 있었으며 (p<0.001 및 p<0.01), 혈청 IgE의 상승과 특이 IgE의 상승은 상호 밀접한 관계가 있었고(r=0.9451), 혈청 IgE와 EPG(r=0.6056), 특이 IgE와 EPG(r=0.5693) 역시 상관 관계가 있었다. 이상의 결과로 보아 간흡충 감염은 인체 혈청내 IgE 및 특이 IgE항체를 상승시키며, IgE 및 간흡충에 대한 특이 IgK는 숙주-기생충간의 면역반응에 관여할 것으로 생각된다.
An experiment was conducted to establish a large scale production method of anti-serum against chicken IgA and to profile the developmental changes of serum IgA levels during the feeding period(from hatching to 7 weeks of age) in broiler chicks. Blood samples were taken from Hubbard chicken at the age of hatching, 3 days of age, and weekly thereafter till to 7 weeks of age. The pure IgA was isolated from ammonium sulfate treated chicken bile juice by gel filtration chromatography ( Sepharose GL-6B) - The quantitative assay of serum IgA were carried by RID method. Developmental changes of serum IgA concentrations were 0.42 mg /mL at hatching, thereafter dicreased gradually, lowest at 1 week of age(0.17 mg /mL), and gradually increased to 7 weeks of age(2.73 mg /mL). There was no sexual difference in serum IgA level, but female chicks showed higher IgA levels than male chicks during the experimental period.
This prospective study was aimed to detect acute and chronic ocular toxoplasmosis by comparison of anti-Toxoplasma gondii IgM and IgG antibody levels and IgG avidity test. One hundred and seventeen patients with ocular toxoplasmosis (OT) who referred to the Farabi Eye Hospital, Tehran, Iran were included in this study. Of the patients, 77 cases were positive for anti-T. gondii IgG, and 8 cases were positive for anti-T. gondii IgM. IgG avidity test revealed 11, 4, and 102 cases were low, intermediate, and high, respectively, and 6.8% and 9.4% of cases were positive for IgM and IgG avidity tests, respectively (P=0.632). Agreement (Kappa value) between paired tests IgG-IgM, IgG-IgG avidity, and IgM-IgG avidity was 0.080, 0.099, and 0.721, respectively (P<0.05). This study showed that conventional serologic tests (IgM and IgG levels) and IgG avidity correlate well each other and can be used to differentiate recent infections from old OT. It seems that reactivated old infections rather than recently acquired infections are majority of Iranian OT patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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