HyPer is the genetically encoded biosensor of intracellular hydrogen peroxide ($H_2O_2$), the most stable of the reactive oxygen species (ROS) generated by living cells. HyPer has a high sensitivity and specificity for detecting intracellular $H_2O_2$ by confocal laser microscopy. However, it was not known whether high speed ratiometric imaging of $H_2O_2$ by HyPer is possible. We thus investigated the sensitivity of HyPer in detecting changes to the intracellular $H_2O_2$ levels in HEK293 and PC12 cells using a microfluorometer imaging system. Increase in the HyPer ratio were clearly evident on stimulations of more than $100{\mu}M$$H_2O_2$ and fast changes in the HyPer ratio were observed on ratiometric fluorescent images after $H_2O_2$ treatment. These results suggest that HyPer is a potent biosensor of the fast temporal production of intracellular $H_2O_2$.
Interplay between calcium ions ($Ca^{2+}$) and reactive oxygen species (ROS) delicately controls diverse pathophysiological functions of vascular smooth muscle cells (VSMCs). However, details of the $Ca^{2+}$ and ROS signaling network have been hindered by the absence of a method for dual measurement of $Ca^{2+}$ and ROS. Here, a real-time monitoring system for $Ca^{2+}$ and ROS was established using a genetically encoded hydrogen peroxide indicator, HyPer, and a ratiometric $Ca^{2+}$ indicator, fura-2. For the simultaneous detection of fura-2 and HyPer signals, 540 nm emission filter and 500 nm~ dichroic beamsplitter were combined with conventional exciters. The wide excitation spectrum of HyPer resulted in marginal cross-contamination with fura-2 signal. However, physiological $Ca^{2+}$ transient and hydrogen peroxide were practically measurable in HyPer-expressing, fura-2-loaded VSMCs. Indeed, distinct $Ca^{2+}$ and ROS signals could be successfully detected in serotonin-stimulated VSMCs. The system established in this study is applicable to studies of crosstalk between $Ca^{2+}$ and ROS.
Seo, Eun-Hee;Kim, Seong-Tae;Bae, Na-Young;Choi, Ae-Ryun
Journal of Sasang Constitutional Medicine
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v.25
no.4
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pp.343-358
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2013
Objectives This study aimed to observe the effect of Hyangsayangwi-tang on the cisplatin-induced gastrointestinal dysfunctions in rats. Methods Four groups(each of 8 rats per group) were used in this study. Saline and distilled water treated control rats are Intact vehicle control group. Delayed gatrointestinal mortility was induced by intraperitoneal treatment of cisplatin 2mg/kg, once a week for 5 weeks(Cisplatin control group). Hyangsayangwi-tang aqueous extracts(HY) were orally administered in a volume of 5ml/kg, once a day for 14 days from 4th ciplatin treatmernt(HY group). Ondansetron 1mg/kg was subcutaneously treated, in a volume of 1ml/kg, as same as HY(ondansetron group). We measured the body weights, intestinal charcoal transit ratio, fecal parameters, fundus MDA, GSH contents and SOD, CAT activities, TPH and MAO activities, pyloric gastrin and serotonin contents with their immunoraective cells, colonic serotonin-immunoreactive cells, the histopathology of pylorus, fundus mucosa and colon. Results and Conclusions (1) The body weight gains, the small intestinal charcoal transfer rates, the fecal parameters(numbers, weights and water contents) were increased in HY, ondansetron group. (2) The inhibit of fundus antioxidant defense systems by cisplatin were decreased in HY, ondansetron group. (3) The pyloric TPH activities were increased and the pyloric MAO activities were decreased in HY group. (4) The pyloric gastric contents and the gastrin-immunoreactive cells were increased in HY group. And the pyloric serotonin contents and the pyloric and colonic serotonin-immunoreactive cells were decreased in HY group. (5) The pyloru atrophic changes and the gastric surface erosive damage regions by cisplatin were favorably inhibited by treatment of HY. HY, a representative Soeumin prescription improve GI dysfunctions and constipation retarded by cisplatin through modulations of GI enterochromaffin cells, serotonin and gastrin-producing cells and antioxidative systems. Especially HY showed the highest favorable effects more than those of ondansetron.
The objective of this study was to investigate the line-by-feed additive interaction on egg traits and yolk cholesterol level in laying hens. Hy-line W-98 (white shell line) and Hy-line Brown (brown shell line) were used as experimental stocks and three groups were assigned in each line. The age of hens used in this study were from 40- to 46-wk-old. Two different levels of chitosan were also used as additive in chicken diet. The first (CH$_{30}$) and second (CH$_{60}$) experimental groups were fed basal diet added 30mg and 60mg chitosan/kg feed, respectively. And the control group (CON) hens were fed with basal diet only. The eggs were collected and analyzed at the end of 40, 42, 44, and 46-wk-old. In the mean egg weight, the CH$_{30}$ in Hy-line Brown was significantly heavier (P<0.05) than CON, but the CH$_{30}$ in Hy-line W-98 was significantly lighter (P<0.05) than CON. Whereas, the mean egg weight did not significantly differ between CH$_{60}$ and CON in both line. The mean albumen percentage in Hy-line Brown did not show significant between experimental groups and control group. On the other hand, the mean albumen percentage of CH$_{60}$ in Hy-line W-98 was significantly lower (P < 0.05) than that of CON, but there was no significantly different between CH$_{30}$ and CON. In the mean yolk percentage, it showed a reverse trend as shown in the mean albumen percentage; there were significantly higher (P<0.05) in CH$_{60}$ than in CON fur the Hy-line W-98, and higher in CH$_{30}$ than in CON for the Hy-line Brown. However, the mean shell percentages did not significantly differ between experimental groups and control group in both lines. In the mean yolk cholesterol levels, the CH$_{30}$ and CH$_{60}$ in both lines were lower by 0.46 mg ∼2.80 mg per gram yolk than CON. Although the interaction effect of line-by-supplementing level of chitosan in hens diet on the pooled mean of yolk cholesterol level was no significant, it showed a highly significant interaction (P<0.01) at three of four experimental ages.
Objectives To evaluate the neuroprotective effects of Hyangsayangwi-tang (HY), a Korean traditional medicinal prescription in a Parkinson's disease mouse model. Methods Four groups(each of 10 mouse per group) were used in this study. The neuroprotective effect of HY was examined in a Parkinson's disease mouse model. C57BL/6 mouse treated with 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP, 30mg/kg/day), intraperitoneal (i.p.) for 5 days. Slow behavioral responses and memory disorder is the major clinical symptoms of PD. In order to investigate the effect of HY on recovery of behavioral deficits and memory, we examined the motor function and memory by using Morris water maze and Forced swimming test. Ischemic mouse brain stained with TTC(2,3,5 triphenyl tetrazolium chloride) in the MPTP-induced Parkinson's disease to find out ischemia and tissue damage in mouse. The convenient, simple, and accurate high-performance liquid chromatography (HPLC) method was established for simultaneous determination of neurotransmitters in MPTP-HY group. To measure the amount of dopamine in mice brain, striatum-substantia nigra, was examined by Bradford assay. Immunohistochemistry was examined in the MPTP-induced Parkinson's disease (PD) mouse to evaluate the neuroprotective effects of Hyangsayangwi-tang on hippocampal lesion, ST and SNpc. Results and Conclusions Hyangsayangwi-tang (HY) prevents MPTP-induced loss of serotonin, hippocampus and TH-ir cell.
Park, Sun-Ho;Yu, Yeon-Su;Park, Jae-Sung;Choo, Ho-Yul;Bae, Soon-Do;Nam, Min-Hee
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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v.6
no.2
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pp.139-143
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2001
The efficacies of several entomopathogenic nematodes of Steinernema and Heterorhabditis spp. were examined against tobacco cutworm, Spodoptera litura Fabricius. H. bacteriophora HY showed 100% mortality after 20 h against 2nd instar of tobacco cutworm. In the case of 3-4th instar, S. carpocapsae PC, H. bacteriophora HY and S. monticola CR showed 100% mortality after 47 h. In the case of 5-6th instar, S. carpocapsae PC proved more effective than the others. Generally, the number of nematodes harvested as their size decreased. Also, the highest number of nematodes was obtained in the 5-6th instar of S. litura by H. bacteriophora HY, showing about $1.3{\times}10^6$ nematodes per larva. In vitro cultured S. carpocapsae PC showed 100% mortality after 73 h against 5-6th instar tobacco cutworm, indicating that nematodes produced in vitro can be potentially used for the biological control of S. litura instead of nematodes in vivo.
Epidemiological and experimental studies provide evidences that diet and intestinal microflora play an important role in colon carcinogenesis. In recent years, it has been suggested that lactic acid bacteria (LAB) used to ferment dairy products have an inhibitory effect on the colon cancer. This study was designed to determine the effect of Bifidobacterium longum HY8001 (Bif) and Lactobacillus acidophilus HY2104(Lac) of Korean origin on azoxymethane (AOM)-induced colonic preneoplastic lesions such as aberrant crypt foci(ACF) formation and cecal pH. At five weeks of age, Spraque-Dawley rats were divided at random into four (AOM alone, Bif, ,Lac, and Bif+Lac) groups. Animals were weighed weekly and oral administration of LAB cultures were performed daily until the termination of the study. Two weeks later, all animals were given a subcutaneous injection of AOM dissolved in normal saline at a dose of 15 mg/kg of body weight once per week for 2 weeks. All rats were necropsied 7 weeks after the last AOM injection , and the ACF were visualize under light microscopy in the formalin-fixed, unsectioned methylene blue-stained colons. The total number of aberrant crypt in Bif, Lac, and Bif+Lac groups were significantly lower than that of the AOM alone group and the percentage of inhibitions weas 35.0, 45.6%, respectively. Significant inhibition (p<0.001) in the total number of ACF was also observed in LAB treated groups (Bif , Lac, and Bif+Lac group by 3003, 38.6, and 41.2%, respectively). Furthermore, cecal pH appeared to significantly decrease by LAB administration. The results of present study provide some evidences for potential colon tumor-inhibitory properties of lactic cultures and fermented dairy products.
Journal of the Institute of Electronics and Information Engineers
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v.53
no.12
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pp.94-102
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2016
Recently, the I/O performance of a single node is rapidly improving due to the advent of high-performance SSD. As a result, the next-generation storage platform based on SSD has received a great deal of attention and such storage platforms are increasingly adopted to commodity servers or data centers that look for the high-bandwidth computation and I/O. However, building all SSD-based storage platform may not be cost-effective because the price per storage capacity is very high as compared to that of HDD. In this paper. we propose a hybrid file management solution, called HyPLVM(Hybrid Priority Logical Volume Manager), which combines the strength of SSD with the desirable aspects of low-price, high-storage capacity HDD. HyPLVM prioritizes the files and directories to be accessed by users, in order to determine the target storage device (SSD/HDD) in which files are allocated, while mitigating the cost of building storage platforms.
The present study was conducted to compare the carcass yields and meat characteristics of three types of commercial male chicks White mini broilers, Ross broilers and Hy-Line brown chicks under the identical feeding condition. One-hundred 1-d chicks of each type were randomly placed into four pens per group (25 chicks per pen) and fed corn-soybean meal based commercial diets for 35d, 18d or 49d, respectively. At the end of the feeding trial, the birds were sacrificed and subjected to carcass measurements. The dressing percentages of White mini broilers and Ross broilers were significantly higher (P<0.05) than that of Hy-Line brown cockerels. The rate of breast meat of Hy-Line brown cockerels was significantly lower (P<0.05) than those of White mini broilers and Ross broilers. However, Hy-Line brown cockerels showed higher (P<0.05) leg meats than the others. There were no significant differences in serum total cholesterol and the activities of glutamic-oxaloacetic transaminase and glutamic-pyruvic transaminase among the groups. The breast meats of White mini broilers presented highest lightness value. The yellowness of breast and redness of leg meats of White mini broilers and Ross broilers were significantly higher (P<0.05) than those of Hy-Line brown cockerels. There were no significant differences in the SOD-like activity and change of pH in edible meats among the groups. The meat color in White mini broilers was significantly higher than that of Hy-Line brown cockerels. No significant differences were observed in term of flavor, tenderness and overall acceptability. In conclusion, the physico-chemical properties and sensory characteristics of edible meats were not greatly affected by genotype if they were similar body weights and kept under the identical feeding condition. But the Hy-Line brown cockerels were less desirable as a meat-type strain due to lower carcass yields and inferior growth and feed conversion ratio.
Statement of problem : In cemented implant-supported porstheses, it is still controversy what kind of cement to use. However, the effect of thermocycling on retentive strength of cemented implant-supported prostheses has not been well investigated. Purpose : This study was tested to evaluate the effects of various cements and thermocycling on retentive strengths of cemented implant-supported prostheses. Material and methods : Prefabricated implant abutments, height 5mm, diameter 6mm, 3-degree taper per side, with light chamfer margins were used. Ten specimens of two-unit fred partial denture were fabricated. The luting agents used for this study were three provisional luting agents which were Temp bond, Temp bond NE, IRM and four permanent luting agents which were Panavia F, Fuji-cem, Hy-bond Zinc cement, Hy-bond Polycarboxylate cement. 24 hours after cementation. the retentive strengths were measured by the universal testing machine with a cross-head speed of 0.5mm/min. Then cementation procedures were repeated and specimens were thermocycled 1000 times at temperature of $5^{\circ}C$ and $55^{\circ}C$. After thermocycling, the retentive strengths were measured. Results : Before thermocycling, the retentive strengths were decreased with the sequence of Panavia F. Fuji-cem. Hy-bond Zinc cement. Hy-bond Polycarboxylate cement, IRM, Temp bond NE and Temp bond, and there were significant differences among each groups(p<0.05). After thermocycling, the retentive strengths were decreased with the sequence of Panavia F. Fuji-cem, Hybond Zinc cement, Hy-bond Polycarboxylate cement, IRM, Temp bond NE and Temp bond, and there were no significant differences among Panavia F, Fuji-cem and Temp bond NE, Temp bond(p>0.05). The retentive strengths before and after thermocycling showed significant differences in Hy-bond Zinc cement. IRM, Temp bond NE and Temp bond(p<0.05). Conclusion : Within the limitation of this study, thermocycling do not affect the retentive strengths of permanent luting agents but the retentive strengths of temporary cements were reduced significantly after thermocyling.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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