The Journal of Korean Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology
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v.23
no.1
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pp.94-110
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2010
Objective : This study was performed to evaluate the effect of immune reaction inductive substances such as phorbol-myristate-acetate(PMA), lipopolysaccharide(LPS), dermato-phagoides pteronyssus crude extract(DPE), dinitrochloro-benzene(DNCB) and Cryptotympana pustulata(CP), the Cryptotympana pustulata extracting substance at simultaneously on the translocation of nuclear factor-kappa B(NF-${\kappa}B$) towards to the nucleus and the mRNA expression patterns of various cytokine genes in Human acute monocytic leukemia cell line(THP-1 cells), monocytes of human. Experiment : To analyze cytokine genes expression patterns, the RT-PCR method was used, measuring tumor necrosis factor(TNF)-$\alpha$ that had been secreted during cell culture in the ELISA method. The morphological change in the cell observed during THP-1 cell culture was observed using a scanning electron microscope (SEM) and the quantitative distribution in the cell NF-${\kappa}B$ was analyzed through immunocytochemistry and a confocal microscopy. Result : CP showed different influences onto the mRNA expression patterns of cytokine genes with PMA, LPS. DPE and DNCB according to the types of immune inductive substances in the THP-1 cells. The expressions of inter-leukin(IL)-10, interferon(INF)-$\gamma$, TNF-$\alpha$ and monocyte chemoattractantant protein(MCP)-1 induced by PMA were suppressed by CP while the expression of transforming growth factor(TGF)-$\beta$ was promoted. Regarding the secretion pattern of TNF-$\alpha$ according to PMA processing, its secretion amount was increased by CP concurrent processing, in case of processing CP onto PMA and LPS, We discovered that the secretion amount of TNF-$\alpha$ was increased. Upon processing PMA and LPS on the THP-1 cell strain at the same time or either additionally processing CP thereon, the movement increase towards the nucleus from the NF-${\kappa}B$ cell cytoplasm, a transcription factor was able to be observed. Conclusion : In this study, Cryptotympana pustulata extracting substance was confirmed that it had an influence on expression patterns of cytokine genes according to the actions of a variety kinds of immune reaction inductive substances processed on the monocyte THP-1 cell of humans. Therefore, additional studies as for the immune adjusting function of Cryptotympana pustulata are considered to be able to offer important materials for curing immune abnormal diseases such as atopy dermatitis afterward.
Objectives : Angelicae Gigantis Radix (AG) is a plant of the Ranunculus family. AG have been reported to have various pharmacological effects on human health which include uterine growth promotion, anti-inflammatory, analgesic, and immune enhancement. However, research on dermatitis disease is insufficient. Therefore, we investigated the effects of AG on tumor necrosis factor-α (TNF-α)/interferon-γ (IFN-γ) stimulated HaCaT cell. Methods : To investigate the effect of AG on HaCaT cell, HaCaT cells were pre-treated with AG for 1 hour and then stimulated with TNF-α/IFN-γ. After 24 hours, media and cells were harvested to analyze the inflammatory mediators. Concentration of human interleukin-1beta (IL-1β), monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), and TNF-α in the media were assessed by ELISA. mRNA expression of human thymus and activation-regulated chemokine (TARC), IL-6, and IL-8 were analyzed by RT-PCR. Additionally, the mechanisms of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) signaling pathway were investigated by Western blot. Results : The treatment of AG inhibited gene expression levels of IL-6, IL-8, and TARC and protein expression levels of IL-1β, MCP-1, and GM-CSF. Also, AG significantly reduced extracellular signal-regulated kinase (ERK) phosphorylation and NF-κB translocation in TNF-α/IFN-γ stimulated HaCaT cell. Conclusions : Taken together, these results demonstrate that AG can alleviate inflammatory diseases such as atopic dermatitis by regulating the expression of inflammatory cytokines. Also, it suggest that AG may a promising candidate drug for the treatment of inflammatory disease such as atopic dermatitis.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.32
no.4
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pp.261-270
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2018
The aim of this study was to evaluate the antitumor activities of Typhae pollen (TP) by confirming in vitro cytotoxicity and in vivo anti-tumor and immune-modulatory effect with anti-cachexia effect. The MTT assay is used in HepG2 cell to detect potential cytotoxic activities of aqueous extract of Typhae pollen (TPe). After HepG2 tumor cell implantation, eight mice per groups were assigned to six groups. Three different dosages of TPe (500, 250 and 125 mg/kg) were orally administered in the amount of $10m{\ell}/kg$ and sorafenib also administered 20mg/kg, every day for 35 days from 28 days after the tumor cell implantation. We observed the changes on body weights, tumor volume and weights, lymphatic organ, serum interferon $(IFN)-{\gamma}$ levels, splenocytes and peritoneal NK cell activity, splenic tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$, interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-10 contents. Periovarian fat weights, serum IL-6 levels, thicknesses of deposited periovarian adipose tissue and mean diameters were also detected to monitor the tumor-related anticachexic effects. In tumor masses, the immunoreactivities of cleaved caspase-3 and cleaved poly (ADP-ribose) polymerase (cleaved PARP) - apoptotic marks, cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthases (iNOS) and tumor necrosis factor $(TNF)-{\alpha}$ were additionally observed by immunohistochemistry. The results were compared with sorafenib. Decreases of COX-2 were demonstrated in sorafenib and TPe treated mice and also increases of iNOS in tumor masses were observed in TPe, not in sorafenib. TPe increased periovarian fat pad weights compared with tumor-bearing controls and sorafenib treated mice. TPe showed increases of splenic $TNF-{\alpha}$, IL-10 and $IL-1{\beta}$, serum $IFN-{\gamma}$ and NK cell activities corresponding to increases of spleen weights, lymph node weights and non-atrophic changes of lymph nodes. Our results show oral treatment of TPe 500, 250 and 125 mg/kg has potent in vitro and in vivo antitumor activities through modest cytotoxic effects, immunomodulatory effects and apoptotic activities in HepG2 tumor cells. In addition, TPe can prevent cancer related cachexia.
In order to investigate experimentally that the effect of aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora on arthritis of mice induced by collagenII, the author performed several experimental items : that is increase, paw thickness, DTH, weight of spleen, hematological change, expression of $CD4^+$, $CD8^+$, $CD19^+$, gene expression of IL-1, IL-6, IL-12, IFN-${\gamma}$, TNF, proliferation of synovial cells and cytotoxicity. The results were obtained as follows; 1. Inhibitory effects of aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora on arthritis induced by collgenII. 1) In incidence, paw edema, AI and DTH were inhibited as compared with control group. 2) The splenic weight was increased and the number of leukocytes was decreased as compared with control group. 3) The number of $CD4^+$, $CD8^+$ activated cells and surface-receptor expression were increased as compared with control group. 4) In hematological change, total protein, creatinine and LDH were decreased significantiy as compared with control group. 2. FACS analysis on normal BABL/c of spenic cells treated with aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora. 1) Aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora activated adhesive splenic cells of mice morphologically in vitro. 2) Aqua-acupuncture solution of Paeonia dactiflora enhanced the gene expression of IL-12 and also enhanced that of interferon-${\gamma}$ remarkably. 3) Aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora reduced the number of $CD4^+$, $CD8^+$, $CD19^+$ activated cells and their surface-receptor expression as compared with control group. 3. Effects of aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora on human synovial cells. 1) In cytotoxicity against synovial cells, aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora didn't show cytotoxicity at concentration of $10-100{\mu}g/m{\ell}$ but showed significantly at concentration of $200-400{\mu}g/m{\ell}$ as compared with control group. 2) Aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora reduced the gene expression of IL-6, IL-$1{\beta}$ and TNF-${\alpha}$. 3) Aqua-acupuncture solution of Paeonia lactiflora inhibited proliferation of synovial cells at concentration of 100 and $200{\mu}g/m{\ell}$.
Purpose: Immunization with Porphyromonas gingivalis heat shock protein 60 (PgHSP60) may have an immunoregulatory effect on atherogenesis. The aim of this study was to determine whether nasal immunization with a PgHSP60 peptide could reduce atherosclerotic plaque formation in apolipoprotein E knockout (ApoE KO) mice. Methods: Seven-week-old male ApoE KO mice were assigned to receive a normal diet, a Western diet, a Western diet and challenge with PgHSP60-derived peptide 14 (Pep14) or peptide 19 (Pep19), or a Western diet and immunization with Pep14 or Pep19 before challenge with Pep14 or Pep19. Results: Atherosclerotic plaques were significantly smaller in mice that received a Western diet with Pep14 nasal immunization than in mice that received a Western diet and no Pep14 immunization with or without Pep14 challenge. An immunoblot profile failed to detect serum reactivity to Pep14 in any of the study groups. Stimulation by either Pep14 or Pep19 strongly promoted the induction of CD4+CD25+ forkhead box P3 (FoxP3)+ human regulatory T cells (Tregs) in vitro. However, the expression of mouse splenic CD4+CD25+FoxP3+ Tregs was lower in the Pep14-immunized mice than in the Pep14-challenged or Pep19-immunized mice. Levels of serum interferon gamma (IFN-γ) and transforming growth factor beta were higher and levels of interleukin (IL) 10 were lower in the Pep14-immunized mice than in the other groups. Induction of CD25- IL-17+ T helper 17 (Th17) cells was attenuated in the Pep14-immunized mice. Conclusions: Nasal immunization with Pep14 may be a mechanism for attenuating atherogenesis by promoting the secretion of IFN-γ and/or suppressing Th17-mediated immunity.
Cho, Jinhee;Kim, Sorina;Yang, Da Hee;Lee, Juyeon;Park, Kyeong Won;Go, Junyong;Hyun, Chang-Lim;Jee, Youngheun;Kang, Ki Soo
Journal of Korean Medical Science
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v.33
no.52
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pp.336.1-336.12
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2018
Background: We aimed to investigate mucosal immunity related to forkhead box P3 ($FOXP3^+$) regulatory T (Treg) cells, T helper 17 (Th17) cells and cytokines in pediatric inflammatory bowel disease (IBD). Methods: Mucosal tissues from terminal ileum and colon and serum samples were collected from twelve children with IBD and seven control children. Immunohistochemical staining was done using anti-human FOXP3 and anti-$ROR{\gamma}t$ antibodies. Serum levels of cytokines were analyzed using a multiplex assay covering interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-4, IL-6, IL-10, IL-17A/F, IL-21, IL-22, IL-23, IL-25, IL-31, IL-33, interferon $(IFN)-{\gamma}$, soluble CD40L, and tumor necrosis factor-${\alpha}$. Results: $FOXP3^+$ Treg cells in the lamina propria (LP) of terminal ileum of patients with Crohn's disease were significantly (P < 0.05) higher than those in the healthy controls. $ROR{\gamma}t^+$ T cells of terminal ileum tended to be higher in Crohn's disease than those in the control. In the multiplex assay, serum concentrations (pg/mL) of IL-4 ($9.6{\pm}1.5$ vs. $12.7{\pm}3.0$), IL-21 ($14.9{\pm}1.5$ vs. $26.4{\pm}9.1$), IL-33 ($14.3{\pm}0.9$ vs. $19.1{\pm}5.3$), and $IFN-{\gamma}$ ($15.2{\pm}5.9$ vs. $50.2{\pm}42.4$) were significantly lower in Crohn's disease than those in the control group. However, serum concentration of IL-6 ($119.1{\pm}79.6$ vs. $52.9{\pm}39.1$) was higher in Crohn's disease than that in the control. Serum concentrations of IL-17A ($64.2{\pm}17.2$ vs. $28.3{\pm}10.0$) and IL-22 ($37.5{\pm}8.8$ vs. $27.2{\pm}3.7$) were significantly higher in ulcerative colitis than those in Crohn's disease. Conclusion: Mucosal immunity analysis showed increased $FOXP3^+$ T reg cells in the LP with Crohn's disease while Th17 cell polarizing and signature cytokines were decreased in the serum samples of Crohn's disease but increased in ulcerative colitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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