Kim, Seon-Young;Lee, Chang-Hun;Kim, Kyung-Joo;Kim, Yeon-Soo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.11
no.2
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pp.234-241
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2001
The C-terminal 393 bp region of the human interleukin-16 (IL-16) gene was cloned and expressed in E. coli along with mammalian cell lines. Recombinant IL-16 expressed from E. coli was 22 kDa on SDS-PAGE and showed 260% of chemoattractant activity at a concentration of $0.1\;{\mu}g/ml$. HeLa, COS, and Neuro-2a cells were transduced by recombinant retrovirus vector pLNC/IL-16/IRES/TK and the intracellular and secreted amounts of IL-16 produced by HeLa/IL-16/TK, COS/IL-16/TK, and Neuro-2a/IL-16/TK cells were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HeLa/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ and COS/IL-16/TK $(1{\times}10^5)$ cells secreted 36.1 and 13.3 ng of IL-16 for 48 h, respectively. Forty-nine ng and 86.4 ng of IL-16 remained in the cell lysates of HeLa/IL-16/TK and COS/IL-16/TK. Intracellular and secreted amounts of IL-16 from Neuro-2a/IL-16/TK $(5{\times}10^5)$ cells during 24 h cultivation were 50 ng and 3.3 ng, respectively. Also, HeLa and COS cells wee stably transfected with mammalian expression vector pCRIII/IL-16. Both culture media and cell lysates prepared from HeLa/IL-16 cells and COS/IL-16 cells showed chemoattractant activity ranging from 190% to 460% as compared to the control experiment. Expression of the herpes simplex virus thymidine kinase (HSV0tk) gene in pLNC/IL-16/ IRES/TK bicistronic retroviral expression vector was verified by performing a genciclovir (GCV) sensitivity assay. Finally, IL-16 repressed Tat-transactivated human immunodeficiency virus type 1 long terminal repeat (HIV-1 LTR) promoter activity.
CD4+ T-cell count determines the effectiveness for antiretroviral therapy (ART) in patients with human immunodeficiency virus (HIV). Although ART slows the progression of HIV to AIDS, rapid counting of CD4+ T lymphocytes with a drop of patient's blood sample is urgently needed to ensure timely ART treatment in rural areas. Recently point-of-care CD4 testing devices have been developed by using non-flow based imaging cytometer incorporated with a sample cartridge where CD4+ T cells are reacted with fluorescently tagged specific antibodies. Here we conducted an experimental study using a conventional fluorescence microscope-based imaging system to quantitate the interaction of CD4 antibodies with CD4+ T cells at different reaction conditions. We demonstrated that a fast and affordable point-of-care CD4 test is feasible with a far less amount of antibodies and a shorter incubation time compared with a conventional sample preparation protocol for flow cytometry. We also proposed a general method to evaluate and compare the detection limit across different CD4 counting platforms by using fluorescently labelled microbeads for intensity calibration.
Dahmane, El Montassir;Rhazi, Mohammed;Taourirte, Moha
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.34
no.5
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pp.1333-1338
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2013
Chitosan-based nanoparticles (CSNP) were prepared through ionic cross-linking and gelation of chitosan (CS) by tripolyphosphate (TPP). CS properties such as molecular weight, and preparation conditions were screened and the resulting nanoparticles were examined by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), scanning electron microscopy (SEM) and transmission electron microscopy (TEM). The obtained particles were consistently spherical with an overall diameter of approximately $107{\pm}20$ nm. They were successfully used as a carrier for Zidovudine, an anti-human immunodeficiency virus (HIV) which, to our knowledge, is novel. The encapsulation ability, loading capacity, and controlled release behavior for these CSNP was evaluated. Results indicated that their intrinsic properties were strongly affected by properties inherent to CS such as molecular weight, and by the preparation condition, such as cross-linking density, which depends on the concentration of the cross-linker. In vitro release tests for the entrapped zidovudine showed that the CNNP provided a continuous release that can last upwards 20 h.
Human endogenous retroviruses (HERVs) are fossil viruses that began to be assimilated into the human genome some 30~40 million years ago, and now constitute nearly 8% of the human genome. These ancient retroviruses have since accumulated mutations that have rendered them defective; thus, they have been termed junk DNA. However, recent research indicates that not all HERVs remain silent passengers. Although they have not been shown to be causative of any human disease, endogenous retroviral sequences may become expressed under select pathological circumstances such as neurological disorders, including multiple sclerosis (MS), schizophrenia, and Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS); viral infections, including human immunodeficiency virus (HIV) and herpesvirus; and multiple types of cancers. This review focused on the possible interactions of HERVs and neurological diseases.
Yoon, Young Kyung;Kim, Min Ja;Chae, Yang Seok;Kang, Shin-Hyuk
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.53
no.3
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pp.197-200
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2013
Diagnosis of cerebral syphilitic gumma is frequently determined at the time of surgery, because imaging and laboratory findings demonstrate the elusive results. A 59-year-old woman presenting dysarthria showed a mass on her brain computed tomography. She was first suspected of brain tumor, but histological results from surgical resection revealed cerebral gumma due to neurosyphilis. After operation, she presented fever and rash with an infiltration on a chest X-ray. Histological assessment of skin was consistent with syphilis. Fluorescent treponemal antibody absorbed test IgG in cerebrospinal fluid was positive. She was successfully treated with ceftriaxone for 14 days.
Benign lymphoepithelial cysts of parotid gland were first described by Miculicz in 1888, have been presented for a long time, uncommonly. But, recently it has been reported with increasing frequency since the onset of human immunodeficiency virus (HIV) infection. Benign lymphoepithelial cysts can be diagnosed by the fine needle aspiration in conjunction with the history and physical examination. The therapeutic options of benign lymphoepithelial cysts have been limited to aspiration, surgical resection, medical therapy, radiotherapy and sclerotherapy. Recently, we experienced a case of benign lymphoepithelial cyst of right parotid gland, so we report this case with review of the literatures.
The human immunodeficiency virus type 1 (HIV-I) Tat protein transduction domain (PTD), which contains rich arginine and lysine residues, is responsible for the highly efficient transduction of protein through the plasma membrane. In addition, it can be secreted from infected cells and has the ability to enter neighboring cells. When the PTD of Tat is fused to proteins and exogenously added to cells, the fusion protein can cross plasma membranes. Recent reports indicate that the endogenously expressed Tat fusion protein can demonstrate biodistribution of several proteins. However, intercellular transport and protein transduction have not been observed in some studies. Therefore, this study examined the intercellular transport and protein transduction of the Tat protein. The results showed no evidence of intercellular transport (biodistribution) in a cell culture. Instead, the Tat fusion peptides were found to have a significant effect on the transduction and intercellular localization properties. This suggests that the HIV-1 PTD passes through the plasma membrane in one direction.
Objectives: In most countries around the world, sex work is an illegal activity. Female sex workers (FSWs) in Iran hide their identities, and they are known to be a hard-to-reach population. Despite free access to HIV testing, fewer than half of FSWs receive HIV testing. The purpose of this study was to characterize the reasons for which FSWs do not seek testing at drop-in centers (DICs) and voluntary counseling and testing (VCT) centers in Iran. Methods: A qualitative study was conducted in 2016. The participants were 24 FSWs who received services at VCT centers and DICs for vulnerable females in the north of Iran and 9 males who were the clients of FSWs. In this study, we made use of purposive sampling and carried out a thematic analysis. Results: We found 4 major and 6 minor themes. The major themes were: fear of being infected (with HIV), stigma, indifference, and knowledge. Conclusions: Despite the significant efforts made by the government of Iran to establish and expand DICs for vulnerable females, the number of FSWs receiving services at these centers has not been very considerable. Consequently, by introducing and implementing training programs for peer groups, it may be possible to take steps toward establishing strategic programs for the control and prevention of HIV/AIDS.
The prevalence of parasitic infections was investigated in human immunodeficiency virus (HIV)-infected patients (n = 105) who visited Seoul National University Hospital, Seoul, Korea, during the period from 1995 to 2003. Fecal samples were collected from 67 patients for intestinal parasite examinations, and sputum or bronchoalveolar lavage samples from 60 patients for examination of Pneumocystis carinii. Both samples were obtained from 22 patients. Thirty-three ($31.4\%$) of the 105 were found to have parasitic infections; Cryptosporidium parvum ($10.5\%$; 7/67), Isospora belli ($7.5\%$; 5/67), Clonorchis sinensis ($3.0\%$; 2/67), Giardia lamblia ($1.5\%$; 1/67), Gymnophalloides seoi ($1.5\%$; 1/67), and Pneumocystis carinii ($28.3\%$; 17/60). The hospital records of the 11 intestinal parasite-infected patients showed that all suffered from diarrhea. This study shows that parasitic infections are important clinical complications in HIV-infected patients in the Republic of Korea.
Choi, Hye;Park, Key Sun;Bae, Seon Joo;Song, Su Jeong;Kim, Kyoon Eon;Park, Jong-Sang;Choi, Joon Sig
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.33
no.11
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pp.3676-3680
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2012
An Epstein-Barr virus (EBV)-based plasmid contains the EBV nuclear antigen 1 (EBNA1) gene and EBV replication origin (oriP) sequence. Since EBNA1 (the only EBV-encoded protein) is combined with oriP, it is replicated simultaneously with chromosomal DNA in human, primate, and canine cells and is faithfully segregated at a stable copy number upon cell division. Consequently, it can be used to stably express gene inserts over a prolonged time in target cells. We have previously shown that the polyamidoamine (PAMAM) dendrimer can be surface-modified with L-arginine. Arginine is present at a high frequency in the transactivator of transcription (Tat) sequences of human immunodeficiency virus (HIV). It presents high membrane permeability and permits effective transfer of DNA inside the cells. In this study, we constructed two kinds of recombinant DNA by inserting the luciferase gene and enhanced green fluorescence protein (eGFP) gene as reporter genes into the pCEP4 plasmid vector. We measured dynamic light scattering (DLS) and zeta potential after preparing PAMAM-based cationic polymer/EBV-based plasmid complexes. We performed transfection of HEK 293 cell lines with the polyplexes, and monitored luciferase activity and green fluorescence protein (GFP) expression. Our results show that PAMAM-based cationic polymer/EBV plasmid complexes provide enhanced and sustained gene expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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