Kim, Mi-Kyoung;Kim, So-Jeong;Kim, Yeon;Park, Hyun-Joo;Jo, Min-Jee;Bae, Soo-Kyung;Kim, Hyung Joon;Bae, Moon-Kyoung
International Journal of Oral Biology
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제41권3호
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pp.155-161
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2016
Dental pulp is a highly vascularized tissue with high regenerative potential. Revascularization of severed vasculature in the tooth is required for pulp healing during avulsed tooth treatment. In this study, the relative expression of angiogenesis-related proteins was determined in human dental pulp cells using a human angiogenesis proteome profiler array. The proteome profiler array detected differentially expressed angiogenesis-related factors under conditions of hypoxia, which enhances the angiogenic potential of dental pulp cells. We confirmed that hypoxia regulates the mRNA expression of angiogenesis-related factors, including CXCL16 in dental pulp cells. Furthermore, conditioned media of hypoxic pulp cells induced tube-like structures of vascular endothelial cells, which were reduced by the neutralization of CXCL16 function. In conclusion, our data show that angiogenesis-related factors are differentially expressed by hypoxia in dental pulp cells and suggest that CXCL16 may involve in the revascularization of hypoxic dental pulp.
치수 검사(pulp test)는 치아에 물리적 및 화학적 자극을 가하여 치수의 생활력(vitality) 여부를 판별하는 검사이다. 치과 임상에서 수행되는 검사 과정에서 피검자는 치아에 가해지는 역치 이상의 자극으로 인하여 큰 고통과 스트레스에 노출된다. 본 논문에서는 생활치수의 전기 치수 검사 시, 자극의 강도를 서서히 증가시켜 역치에 이르게 되면 나타나는 피검자의 동통반응으로 개구반사에 의한 악이복근의 근전도, 발성에 의한 음성 반응, 손가락의 움직임에 의한 반응을 각각 측정하였다. 또한 동통 반응이 발생하는 시점으로부터 자극이 차단될 때까지 피검자에게 필요이상으로 인가되는 과용 자극 시간을 측정하였으며, 과용자극 시간 측정 시 치수 검사기의 자극 차단 주체자에 따른 과용 자극 시간을 측정 분석하였다. 이러한 결과를 바탕으로 동통 반응에 의한 인체 반응 신호를 이용하여 치수검사기의 출력을 자동으로 차단하는 제어 스위치를 구성하였다. 피검자가 역치 자극을 느낀 후 나타나는 최초의 인체 반응의 10 ms 이내에 신속하게 검사기의 출력을 차단함으로써 과용자극 시간을 줄이고자 하였다.
대한치과보존학회 2003년도 제120회 추계학술대회 제 5차 한ㆍ일 치과보존학회 공동학술대회
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pp.550-550
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2003
IL-1${\alpha}$ and TNF-${\alpha}$ play an important role in initiating and coordinating the cellular events that make up the immune response to infection. The purpose of this study was to examine the effects of proinflammatory cytokines on mineralization and HO-1 protein expression in the human pulp cells. Human pulp cell cultures between the fifth and sixth passage were used in this study. Alkaline phosphatase and osteonectin were selected as markers for mineralization that is, odontoblast-like differentiation.(omitted)
Human dental pulps obtained from normal teeth, hypersensitive teeth and teeth with inflamed pulp were studied to measure and to compare the endogenous levels of arachidonic acid metabolites in order to see the relative activities of the different pathways involved in arachidonic acid metabolism. Pulp homogenates were incubated with $^{14}C$-arachidonic acid and lipid solvent extracts were separated by thin layer chromatography (TLC) to be analyzed by autoradiography and TLC analyzer. 1. The most significant metabolite was HETEs showing $96.9{\pm}37.8$pmol/mg tissue protein/hr in normal pulp, $169.2{\pm}76.7$ in hypersensitive pulp and $385.4{\pm}113.2$ in inflamed pulp. In normal pulp $LTB_4$, 6-keto-$PGF_{1\alpha}+PGE_2$, $TXB_2$ and unidentified metabolite were formed in decreasing order. While in hypersensitive and inflamed pulp 6-keto-$PGF_{1\alpha}+PGE_2$, $LTB_4$, $TXB_2$ and unidentified metabolite were formed in decreasing order. 2. In hypersensitive pulp only HETEs were significantly increased when compared with that in normal pulp. The levels of all the converted metabolites in inflamed pulp were significantly increased compared with those in normal pulp. In inflamed pulp, the levels of $TXB_2$ and HETEs were significantly increased compared with those in hypersensitive pulp. 3. The ratio of each metabolites to the total converted metabolites showed an increased value of $TXB_2$ and 6-keto-$PGF_{1\alpha}+PGE_2$, as the degree of inflammation was increased, while that of HETEs decreased both in hypersensitive pulp and inflamed pulp more than in normal pulp. 4. The relative amounts of the total metabolites formed in lipoxygenase pathway to cyclo-oxygenase pathway were 6.8 fold in normal pulp, 4.4 fold in hypersensitive pulp and 3.8 fold in inflamed pulp.
Seo, Min-Seock;Hwang, Kyung-Gyun;Kim, Hyong-Bum;Baek, Seung-Ho
Restorative Dentistry and Endodontics
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제37권3호
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pp.142-148
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2012
Objectives: We analyzed gene-expression profiles after 14 day odontogenic induction of human dental pulp cells (DPCs) using a DNA microarray and sought candidate genes possibly associated with mineralization. Materials and Methods: Induced human dental pulp cells were obtained by culturing DPCs in odontogenic induction medium (OM) for 14 day. Cells exposed to normal culture medium were used as controls. Total RNA was extracted from cells and analyzed by microarray analysis and the key results were confirmed selectively by reverse-transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). We also performed a gene set enrichment analysis (GSEA) of the microarray data. Results: Six hundred and five genes among the 47,320 probes on the BeadChip differed by a factor of more than two-fold in the induced cells. Of these, 217 genes were upregulated, and 388 were down-regulated. GSEA revealed that in the induced cells, genes implicated in Apoptosis and Signaling by wingless MMTV integration (Wnt) were significantly upregulated. Conclusions: Genes implicated in Apoptosis and Signaling by Wnt are highly connected to the differentiation of dental pulp cells into odontoblast.
With electron microscope, author studied on the pulp structure of human primary tooth in shedding stage. Non-carious human primary molar teeth were selected for this study. Using standard methods, specimens were sectioned and examined by light and electron microscope, The results were as follows; 1. In coronal pulp, odontoblasts were replaced by multinucleated odontoclasts, which contained a large number of mitochondria of varying shape and vacuoles in cytoplasm. Where odontoclasts were in contact with tooth surface, the characteristic ruffled border and clear zone were observed. 2. Fibrous tissue with plentiful collagen fibers and fibroblasts was observed adjacent to the dentin in the pulp. Fibroblast contained a number of mitochondria and well-developed rough-surfaced endoplasmic reticulum. 3. Inflammatory cells were observed in the pulp and active fibroblasts could be seen between inflammatory cells. In many cases, cervical epithelium proliferated toward absorbed area. 4. Inflammatory cells consisted of a number of lymphocytes, polymorphonuclear leukocytes, plasma cells and macrophages. Macrophage containing lysosomes in digestive state or phagocyting PMN could be seen. 5. In the primary molar of delayed root resorption, odontoblast layer, zone of Weil and cell-rich zone could be seen at roof of pulp chamber and odontoblast in this area cont과ained some lipid droplets.
본 연구에서는 발거된 건전한 치아의 치수조직으로부터 배양된 치수조직을 SP 및 TNF (tumor necrosis factor)-${\alpha}$, 그리고 Spantide로 15분간 배양 후 SP로 36시간 자극하여 IL-8은 및 MCP-1의 분비량을 측정하였으며, 면역염색으로 IL-8의 분비를 관찰하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 치수 조직을 SP (10$^{-4}$M)로 36시간 자극 시 모의 자극에 비해 IL-8이 현저히 증가하였으며 (p < 0.05), 면역 염색 결과 모의 자극 시에는 치수조직의 변연부에만, SP(10$^{-4}$M)로 36시간 자극시에는 flbroblast 주위로 IL-8의 발현이 관찰되었다. 2. TNF-${\alpha}$ (40 ng/ml)로 치수조직을 36시간 자극시 모의 자극에 비해 MCP-1이 증가하였으며, SP에서는 증가 를 보이지 않았으며 (p < 0.05), 면역 염색 결과 IL-8의 발현이 관찰되지 않았으며, 치수 조직의 변연부를 따라서 약한 IL-8의 발현이 관찰되었다. 3. Spantide (10$^{-5}$ M)는 SP (10$^{-4}$ M)로 치수 조직을 36시간 자극 시 IL-8의 분비를 억제하였다.
Eun Jin Seo;Soyoung Park;Eungyung Lee;Yang Hoon Huh;Ye Eun Ha;Gabor J. Tigyi;Taesung Jeong;Il Ho Jang;Jonghyun Shin
International Journal of Stem Cells
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제17권3호
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pp.330-336
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2024
Mesenchymal stem cells in the dental tissue indicate a disposition for differentiation into diverse dental lineages and contain enormous potential as the important means for regenerative medicine in dentistry. Among various dental tissues, the dental pulp contains stem cells, progenitor cells and odontoblasts for maintaining dentin homeostasis. The conventional culture of stem cells holds a limit as the living tissue constitutes the three-dimensional (3D) structure. Recent development in the organoid cultures have successfully recapitulated 3D structure and advanced to the assembling of different types. In the current study, the protocol for 3D explant culture of the human dental pulp tissue has been established by adopting the organoid culture. After isolating dental pulp from human tooth, the intact tissue was placed between two layers for Matrigel with addition of the culture medium. The reticular outgrowth of pre-odontoblast layer continued for a month and the random accumulation of dentin was observed near the end. Electron microscopy showed the cellular organization and in situ development of dentin, and immunohistochemistry exhibited the expression of odontoblast and stem cell markers in the outgrowth area. Three-dimensional explant culture of human dental pulp will provide a novel platform for understanding stem cell biology inside the tooth and developing the regenerative medicine.
대한치과보존학회 2003년도 제120회 추계학술대회 제 5차 한ㆍ일 치과보존학회 공동학술대회
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pp.583-583
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2003
Recent study reported whether the cultured human pulp cells increase IL-8 secretion in response to SP stimulation22). In the present study, whether induction of IL-8 or MCP-1 in pulp tissue can be detected using enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) with ex vivo pulpal explants exposed to neuropeptides in culture and the IL-8 expression using immunohistochemical analysis with the ex vivo pulpal explants exposed to neuropeptides was evaluated. To investigate further mechanisms that may contribute to leukocyte recruitment in lesions of endodontic origin, the differential expression of IL-8 and MCP-1 by human dental pulp tissues stimulated in vitro by the Substance P was examined.(omitted)
The purpose of this study was to regenerate human dental pulp tissues similar to native pulp tissues. Using the mixture of type I collagen solution, primary cells collected from the different tissues (pulp, gingiva, and skin) and NIH 3T3 ($1{\;}{\times}{\;}10^5{\;}cells/ml/well$) were cultured at 12-well plate at $37^{\circ}C$ for 14 days. Standardized photographs were taken with digital camera during 14 days and the diameter of the contracted collagen gel matrix was measured and statistically analyzed with student t-test. As one of the pulp tissue engineering, normal human dental pulp tissue and collagen gel matrix cultured with dental pulp cells for 14 days were fixed and stained with Hematoxyline & Eosin. According to this study, the results were as follows: 1. The contraction of collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days was significantly higher than other fibroblasts (gingiva, skin) (p < 0.05), 2. The diameter of collagen gel matrix cultured with pulp cells was reduced to 70.4% after 7 days, and 57.1% after 14 days. 3. The collagen gel without any cells did not contract, whereas the collagen gel cultured with gingiva and skin showed mild contraction after 14 days (88.1% and 87.6% respectively). 4. The contraction of the collagen gel cultured with NIH 3T3 cells after 14 days was higher than those cultured with gingival and skin fibroblasts, but it was not statistically significant (72.1%, p > 0.05). 5. The collagen gel matrix cultured with pulp cells for 14 days showed similar shape with native pulp tissue without blood vessels. This approach may provide a means of engineering a variety of other oral tissue as well and these cell behaviors may provide information needed to establish pulp tissue engineering protocols.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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