Bovine oocytes with compact and complete cumulus cells were cultured for up to 24h in TCM199 buffered with 25mmol/l hepes and supplemented with 10% FBS (fetal bovine serum), 1mg/ml $17{\beta}$-estradiol, 20IU/ml hCG(human chorionic gonadotropin). All of the oocytes were divided into at 6 groups depending upon incubation times (control, 0 hour, 6 hours, 12 hours, 16 hours, 18 hours). To all experimental media, $200{\mu}g/ml$ puromycin was added at different incubation times mentioned above. Following these culture times, in vitro insemination was conducted with frozen-thawed bovine spermatozoa in medium BO (Brackett and Oliphant medium for in vitro insemination) with $10{\mu}g/ml$ BSA(bovine serum albumin) and 10 mg/ml heparin added. After 22h culture, the oocytes were fixed with acetic alcohol solution and stained with orcein acetic solution to evaluate sperm nuclear progression. Addition of puromycin after 0, 6 and 12 h of culture resulted in near of oocyte maturation at the M1 stage. Contrariwise, puromycin addition after 12 h of culture led to restoration of nuclear progression to M2 stage. On the one hand, puromycin affected the synthesis of Cyclin B protein that may be involved in the oocyte maturation and sperm capacitation for in vitro fertilization. The present study suggests the participation of protein synthesis, cyclin B, in the oocyte development from M1 to M2 stages in vitro.
Gestational trophoblastic disease (GTD) is a condition of uncertain etiology, choriocarcioma, or placental-site hydatidiform moles, invasive moles, choriocarcinoma, and placental-site trophoblastic tumors. It arises from the abnormal proliferation of trophoblastic tissue and spreads beyond the uterus hematogenously. The early diagnosis of GTD is important to ensure timely and successful management and the preservation of fertility. We report the unusual case of a metastatic choriocarcinoma that formed bullae on the lung surface and presented as recurrent pneumothorax in a 38-year-old woman with elevated beta-human chorionic gonadotropin (hCG) levels. She underwent thoracoscopic wedge resection of the involved lung and four subsequent cycles of consolidation chemotherapy. No other evidence of metastatic disease or recurrent pneumothorax was noted during 22 months of follow-up. GTD should be considered in the differential diagnosis of spontaneous pneumothorax in reproductive-age women with an antecedent pregnancy and abnormal beta-hCG levels.
The present study demonstrates the changes in body weight (BW) and plasma sex steroid hormone profiles during artificial maturation induced by human chorionic gonadotropin (HCG) or salmon pituitary extract (SPE) injections in cultured eel, Anguilla japonica, kept in seawater for 3 months. In the weekly SPE-injected female group, BW was relatively stable during vitellogenesis. Following induction of vitellogenesis, females exhibited a rapid increase of BW, and the oocytes were observed to be in the migratory nucleus stage at the end of the experiment. Plasma testosterone (T) and $estradiol-17{\beta}$ ($E_2$) levels increased slightly during vitellogenesis and peaked at an average of 5.82 ng/mL and 4.76 ng/mL, respectively, at the end of the experiment. In the weekly control and HCG-injected female groups, BW slowly decreased during the experimental period, and the oocytes of the two groups were observed to be at the primary yolk globule stage. In the weekly HCG-injected female group, plasma T and $E_2$ levels increased slightly during vitellogenesis and decreased afterward. In the control female group, however, plasma T and $E_2$ levels were not altered during the experimental period. Furthermore, plasma $17{\alpha},20{\beta}-dihydroxy-4-pregnen-3-one$ (DHP) was not detected in all experimental groups. Fertility and hatching rates of SPE-injected females were significantly higher in those that ovulated 15 h after DHP injection than 18 h. These results indicate that long rearing in seawater increases responsiveness to SPE in ovarian maturation of the Japanese eel, resulting in shortened period from completion of vitellogenesis by sex steroid hormone production.
A target-sensitive liposome was prepared by using a dioleoyl-phosphatidylethanolamine(DOPE) and a palmitic acid coupled antibody(p-IgG). For the preparation of stable PE-liposomes, the key factors such as antibody modification method with palmitic acrid, molar ratio of p-IgG to lipid and the amount of various additives, were examined. The optimum molar ratio of p-IgG to lipid was found to be $2.5{\times}10^{-4}$ and the final concentration of deoxycholate for the stable liposome formation was about 0.09%. Two kinds of target-sensitive liposomes, containing polyclonal anti-SRBC(Sheep Red Blood Cell)-antibody and monoclonal anti-${\beta}$-HCG(Human Chorionic Gonadotropin)-antibody, were successfully prepared. The destabilization of liposomes was examined by measuring the release of calcein entrapped in the liposome vesicles. Calcein was released only when the liposomes were contacted with the specific target cells. The calcein release with non-specific target cells was negligible. From this result, it is clear that p-IgG is indispensible for the maintenance of stable PE-liposome and the calcein release is mainly due to the specific interactions between the liposomes containing antibody and the target cells containing antigen.
Kim, Soo-Hee;Yang, Boo-Keun;Kim, Hyoung-Chun;Jhoo, Wang-Kee
Archives of Pharmacal Research
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v.17
no.4
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pp.209-212
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1994
Mophological normal of unfertilized oocytes, which was collected 12-14 hours after human Chorionic Gonadotropin(jCG) injection, was not influenced by chronically adiministration of cocaine for 2 weeks in mice. Proportion of normal unfertilized oocytes in non-cocaine treated group (control), `0 mg/kg and 20 mg/kg cocaine treated group based on body weight with subcutaneous(s.c.) daily injection of cocaine for 2 weeks were 92.9%, 85.6% and 90.9%, respectively. There is no significant difference between control and cocaine treated groups. Two to 8 cell stage embryos collected 24-48 hours post hCG in control group were 66.7%, whereas, 10 mg/kg and 20 mg/kg groups treated with cocaine was 12.5% and 27.3% respectively. Although control and treated groups are significantly different (p<0.05) the developmental score of 2 to 8 cell stage embryos collected at 24-48 hours post HCG, there is no difference between 10 mg/kg and 20 mg/kg treated with cocaine groups. These results indicated that the normal embryos of the roups of cocaine administration were significantly amested when compared with that of control group. The proportion of 2 to 8 cell stage embryo reaching the blastocyst stage, which were cultured 48-52 hours with 5% $Co_2$ in air at $37^{\circ}C$, were 93.9% in control group and, 70.4% and 71.9% in each 10 mg/kg and to blastocyst in vitro culture was significantly limited embryos obtained from cocanized mice compared with those of control mice. These results suggest that episode of cocaine intoxication can cause impaiment of early embrygenesis in the mouse.
Hormone induction in maturation and ovulation was carried out with spotted halibut (Verasper variegatus) which normally does not spawn spontaneously in captivity. Prior to spawning females were treated with human chorionic gonadotropin(HCG 265-678 IU/kg BM) 17 ${\alpha}$-hydroxy 20-${\beta}$-dihydroprogesterone (17 ${\alpha}$ 20${\beta}$ OHP 0.5-1.0${\mu}$g/kg BW) and luteinizing hormone-releasing hormone analogue pellet (LHRHa pellet 63-81 ${\mu}$g/kg BW) In all the trials HCG injection succeeded in inducing ovulation at 265-300 IU/kg BW. HCG at 620 or 678 IU/kg BW was ineffective in inducing a good rate of ovulation. Final maturation and ovulation were not stimulated by treatment of 17 ${\alpha}$ 20${\beta}$OHP and LHRHa pellet. These results suggest that HCG injection (around 300 IU/kg BW) is more effective compared with LHRHa pellet implantation.
Gwon, Seo-Hui;Kim, Hyun Kyu;Baek, Hea Ja;Lee, Young-Don;Kwon, Joon Yeong
Development and Reproduction
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v.21
no.4
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pp.457-466
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2017
Survival of embryos largely depends on yolk processing during early development. Proteolytic enzymes, cathepsin B & D (ctsb & ctsd) are known to have some important roles in yolk processing of various fish species. Mature female red spotted groupers were injected with human chorionic gonadotropin (HCG) to induce ovulation. The fertilized eggs and embryos were sampled at 0, 4 and 24 HPF (hours post fertilization). Survivals of each groups of embryos were checked at 24 and 48 HPH (hours post hatching). Transcripts of ctsb & ctsd showed the highest level at 0 HPF and relatively high at 4 HPF, but greatly decreased at 24 HPF. In bad egg quality group (BE, embryos survived until 24 HPH), transcript level of ctsb at 4 HPF were significantly lower than the transcript level at the same stage in good egg quality group (GE, embryos survived until 48 HPH) while no significant change of ctsb transcript level was observed at 0 or 24 HPF between BE and GE. Transcript level of ctsd was decreased at 24 HPF, but the difference was not as strong as the case of ctsb transcript. These results suggest that maternal ctsb transcript rather than ctsd transcript is likely to be involved in egg quality resulting in the difference of survival rate of embryos at early developmental period in this species.
The egg development and early life history of Korean endangered natural monument fish, Iksookimia choii, were investigated in 2006. The eggs from the females were obtained by injecting 10 IU $g^{-1}$ of human chorionic gonadotropin and inseminated by wet method in the laboratory. The fertilized eggs were $1.1\sim1.3mm$ in diameter and had no oil globules. Hatching of the embryo began about 24 hrs after fertilization under water temperature of $25^{\circ}C$. The newly-hatched larvae were $2.5\sim2.7mm$ in total length (TL), and their mouth and anus were not yet opened. Six days after hatching, the postlarvae were $4.7\sim5.4mm$ TL, and tip of the caudal notochord was flexed $45^{\circ}$ upward. The juveniles stage was reached when all fin-rays were formed at 35 days after hatching, and their total length were $20\sim22mm$.
Kim, Sanghwa;Lee, Inha;Park, Eunhyang;Rhee, Yeo Jin;Kim, Kyeongmin;Aljassim, Aminah Ibrahim;Park, Joo Hyun;Lee, Jae Hoon;Yun, Bo Hyon;Seo, Seok Kyo;Cho, Sihyun;Choi, Young Sik;Lee, Byung Seok
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.48
no.4
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pp.380-384
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2021
Theca lutein cysts are rare, benign lesions responsible for gross cystic enlargement of both ovaries during pregnancy. This condition is also termed hyperreactio luteinalis. Elevated human chorionic gonadotropin (hCG) levels or states of hCG hypersensitivity seem to promote these changes, which in up to 30% of patients produce clinical signs of hyperandrogenism. Given the self-limiting course of theca lutein cysts, which are subject to spontaneous postpartum resolution, conservative treatment is the mainstay of patient management. Described herein is a rare case of theca lutein cysts with maternal virilization that failed to regress by 9 months after childbirth. Surgical intervention was eventually undertaken, necessitated by adnexal torsion.
Ki, Se-Un;Park, Chung-Kug;Lee, Kyoung-Woo;Lee, Kyoung-Sik;Park, Joon-Taek;Lee, Won-Kyo
Development and Reproduction
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v.25
no.4
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pp.269-277
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2021
Effects of water temperature and hormones on ovarian development of conger eel in Korea were investigated. Ovarian development was analyzed by measuring gonadosomatic index (GSI) and oocyte diameter with histological methods. At rearing water temperatures of 12℃, 14℃, and 16℃, GSI value increased from 3.66 at the start of the experiment to 7.44, 8.82, and 7.34 at the end of the experiment, respectively. At rearing water temperatures of 12℃, 14℃, and 16℃, egg diameter increased from 245.11-300.25 ㎛ at the start of the experiment to 377.62-480.27 ㎛, 396.72-498.54 ㎛, and 382.29-475.69 ㎛ at the end of the experiment, respectively. Follicular oocyte development revealed that primary yolk globule stage observed from January to March. It entered to secondary yolk globule stage in April and remained at the same stage until July. As a result of examining effects of three hormones (human chorionic gonadotropin (HCG), luteinizing hormone releasing hormone analogue (LHRHa), and salmon pituitary extraction (SPE) on ovarian development, HCG was found to be the most effective one. The progress from diapause of the secondary yolk globule stage to migratory nucleus stage of oocytes could be induced by treating fish with HCG at 1,000 IU/kg. The effect of hormone treatment on ovarian development of conger eel in Korea was the most effective at water temperature of 14℃.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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