감성돔을 대상으로 부화직후에서 양성생식소단계에 이르기까지 성분화과정을 규명하기 위해 시원생식세포의 출현과 원시생식소의 형성 그리고 자웅 성분화과정을 조직학적으로 조사하였다. 1. 시원생식세포 (primordial germ cell) 는 부화후 3 일 전장 2.4 mm된 전기 자어의 장관과 척색사이 체벽중배엽상피 위에서 크기 $6.8{\sim}7.2\;{\mu}m$인 3~4개의 세포가 섬유성 간충직에 묻혀 식별되었다. 2. 부화후 21일 전장 6.4 mm 개체에서, 색소세포가 다소 집착된 복막체강상피에 생식원세포(proto-gonial cell)가 위치한다. 3. 부화후 59일 전장 20.8 mm 개체에서, 섬유성 간충직으로 선상의 원시생식소를 따라 생식원세 포들은 후복막쪽으로 이동한다. 4. 부화후 186일 전장 7.8 cm 개체에서, 섬유질이 풍부하고 호산성 과립세포가 다수 분포하는 선상의 원시생식소에 유사분열중인 생식원세포들이 나타나고 있다. 5. 부화후 254일 전장 9.5 cm 개체에서, 섬유질이 풍부한 생식소내에 정모세포, 정세포 무리들이 나타나고 있다. 6. 부화후 13개월 전장 10.5 cm 개체에서, 생식소는 피층과 수층으로 구분된다. 피층에는 소수의 정모세포 무리들과 원생식세포 무리들이 나타나고, 수층에는 섬유질이 풍부한 간충직 조직과 소수의 원생식세포들이 드문드문 분포하고 있다. 7. 부화후 16개월 전장 14.7 cm 개체에서, 생식소는 섬유성 결합조직에 의해 정소부위와 난소부위로 구분되며, 정소부위에는 포낭내에 정원세포들이 분포하고, 난소부위에는 난소강과 주변인기 난모세포들로 구성된다.
Purpose: The aims of this study were to assess the in vitro co-culturing pattern of isolated skin-derived precursor cells (SKPs) with a mixed demineralized bone (DMB) and fibrin glue scaffold and to evaluate in vivo osteogenesis after transplantation of autogenous SKPs with a these mixed scaffold in the animal's mandibular defects. Materials and Methods: We isolated SKPs from the ears of adult 4 miniature pigs. The isolated SKPs were co-cultured with a mixed DMB and fibrin glue scaffold in a non-osteogenic medium for 1, 2, and 4 weeks. Histological characteristics of in vitro co-cultured cells and scaffold were evaluated. $1{\times}10^7\;cells/100\;{\mu}l$ of autogenous porcine SKPs were grafted into the mandibular defects with a DMB and fibrin glue scaffold. In the control sites, only a scaffold was grafted, without SKPs. After two animals each were euthanized at 2 and 4 weeks after grafting, the in vivo osteogenesis was evaluated with histolomorphometric and osteocalcin immunohistochemical studies. Results: Homogeneously shaped skin-derived cells were isolated from porcine ear skin after 3 or 4 weeks of primary culture. In vitro osteogenic differentiation of SKPs was observed after co-culturing with a DMB and fibrin glue scaffold in a non-osteogenic medium. Von Kossa-positive bone minerals were also noted in the co-cultured medium at 4 weeks. As the culture time progressed, the number of observable cells increased. Trabecular new bone formation and osteocalcin expression were more pronounced in the SKP-grafted group compared to the control group. Conclusion: These findings suggest that autogenous SKP grafting with a DMB and fibrin glue scaffold can serve as a useful alternative to bone grafting technique.
The mammalian target of rapamycin (mTOR) signaling pathway is upregulated in the pathogenesis of many cancers, including colorectal cancer (CRC). DEPTOR is an mTOR inhibitor whose expression is negatively regulated by mTOR. However, the role of DEPTOR in the development of CRC is not known. The aim of this study was to investigate the expression of DEPTOR and mTORC1 activity (P-S6) in a subset of CRC patients and determine their relation to tumor differentiation, invasion, nodal metastasis and disease-free survival. Here, Immunohistochemical expression of P-S6 (S235/236) and DEPTOR were evaluated in 1.5 mm tumor cores from 90 CRC patients and in 90 samples of adjacent normal mucosa by tissue microarray. The expression of P-S6 (S235/236) was upregulated in CRC, with the positive rate of P-S6 (S235/236) in CRC (63.3%) significantly higher than that in control tissues (36.7%, 30%) (p<0.05). P-S6 (S235/236) also correlated with high tumor histologic grade (p=0.002), and positive nodal metastasis (p=0.002). In contrast, the expression level of DEPTOR was correlated with low tumor histological grade (p=0.006), and negative nodal metastasis (p=0.001). Interestingly, P-S6 (S235/236) expression showed a significant negative association with the expression of DEPTOR in CRC (p=0.011, R= -0.279). However, upregulation of P-S6 (S235/236) (p=0.693) and downregulation of DEPTOR (p=0.331) in CRC were not significantly associated with overall survival. Thus, we conclude that expression of DEPTOR negatively correlates with mTORC1 activity and tumor progression in CRC. DEPTOR is a potential marker for prognostic evaluation and a target for the treatment of CRC.
이 연구는 자주복의 개체발생 단계에 따른 소화관 외부형태의 변화와 소화관의 발달 양상을 조직학적으로 조사하였다. 부화 직전 수정란의 소화관은 난황낭과 배체의 척추 사이에 위치하였고, 형태는 거의 직선상 이었다. 입은 부화 후 2일째, 항문은 부화 후 4일째 열렸다. 부화 후 4일째 소화관은 식도, 전장, 중장 그리고 직장으로 구분이 되었고, 전장과 중장이 괄약근에 의해 구분되었다. 부화 후 5일째 자어는 전장과 중장 사이가 배측으로 굴곡되었고, 식도상피에 점액세포가 분포하였다. 이 시기에 난황은 대부분 흡수되었다 부화 후 6일째 자어의 소화관은 전장이 두부 쪽으로 팽창하면서 U자형으로 분화하였다. 부화 후 10일 째에 팽창한 전장은 더욱 커져서 구형을 형성하였다. 부화 후 15일째 전장의 배측 부위 중간에서 함입되기 시작하여 전장이 두 부분으로 나누어졌다. 부화 후 21일째 전장의 앞부분이 팽창낭으로 분화하였다. 부화 후 24일째에 후장의 앞부분이 배측으로 다시 회전하였다. 부화 후 30일째 팽창낭은 두부 쪽과 항문 쪽으로 길게 신장되어 어미의 소화관 형태로 발달하였다.
Background: Maspin (mammary serine protease inhibitor) is a member of the serpin superfamily. A few studies have examined the role of maspin in tumor suppression of non-small cell lung cancer (NSCLC); however, its role in the development and progression of NSCLC still remains controversial. We evaluated the immunohistochemical expression of maspin in order to elucidate its clinical significance in NSCLC. Methods: We analyzed 145 patients with pathologically confirmed NSCLC, including 66 cases of squamous cell carcinomas (SCCs) and 79 cases of adenocarcinomas (ADCs). We performed a immuno-histochemical stain with maspin and PCNA (proliferating cell nuclear antigen) using tissue microarray blocks. Results: There were 108 men and 37 women in the study population. The mean age of patients in the study was 63.7 years (range, 40.0~82.0; median, 65.0). The proportion of maspin expression was significantly higher in SCCs (52/66, 78.8%; p<0.01) than in ADCs (17/79, 21.5%; p<0.01). Maspin expression was not associated with PCNA (p=0.828), lymph node involvement (p=0.483), or tumor stage (p=0.216), but showed correlation with well-to-moderate tumor differentiation (p=0.012). There was no observed correlation between maspin expression and survival with NSCLC (p=0.218). Conclusion: The present study suggests that maspin expression was significantly higher in SCCs than in ADCs and was associated with low histological grade. However, maspin expression was not an independent factor to predict a prognosis in NSCLC.
c-fos와 c-jun은 암 유전자의 하나이며, 이 유전자의 단백질 산물은 여러 가지의 다른 활성화 단백 (activator protein 1, AP-1)으로 골 종양에서 골세포의 증식과 분화를 조절하는 중요한 역할을 하는 인자 중 하나로 알려져 있다. 본 연구에서는 단클론 항체를 이용하여 포르말린에 고정된 파라핀 포매조직을 이용하여 35례의 사람 골육종에서 c-fos 단백의 발현을 연구하였다. c-fos의 발현은 골 형성 병변에서 주로 발현되며, 저등급의 연골형성 병변에서는 발현이 관찰되지 않았다. 높은 빈도의 c-fos 단백의 발현이 골아성 골육종에서 발현되었으나 (17례 중 13례에서 1등급 내지 2등급으로 발현), 2례의 연골형성 골육종, 1례의 섬유아세포성 골육종, 2례의 방골성 골육종에서는 음성으로 나타났다. 2례의 혈관확장성 골육종에서는 양성으로 c-fos 단백의 발현되었다. 비록 조직학적으로 고등급의 골육종에서 면역조직화학적 염색상 고 빈도의 c-fos 단백의 발현이 관찰되나, 조직학적 등급과, 면역염색상 발현사이에 통계적인 유의성은 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 c-fos 단백이 골육종의 발생에 관여할 것으로 추론되며, 저등급의 연골형성 육종에 이 단백의 역할에는 추후 연구가 필요할 것으로 사료된다.
생체 조직 내에서 표지인자의 발견은 해당 세포의 특성과 기능을 이해하는 데 매우 중요하다. 이전의 연구에서 본 연구진은 돼지정원줄기세포에서 특이적으로 IGFBP 3가 발현되어 표지인자로의 가능성을 보고한 바 있다. 본 연구에서는 IGFBP 3이외의 다른 family member가 정원줄기세포에서 특이적으로 발현하는 지와, 이의 발현을 조절하는 PAPP-A의 조직학적인 측면에서의 발현 양상을 5일령 돼지 정소에서 확인하였다. 그 결과 IGFBP 1, 2, 3, 4, 6의 발현은 정소 전체에서 발현되는 수준보다 돼지 정원줄기세포에서 더 높은 수준에서 발현하고 있음을 확인하였다. PAPP-A는 sertoli cell에서 특이적으로 발현하며, 정원줄기세포에서는 발현하지 않는 것을 PGP9.5와의 동시-조직염색으로 확인하였다. 이러한 결과는 Sertoli cell에서 발현하는 PAPP-A 단백질은 미성숙 돼지 정소에서 IGFBP family를 통해 정소 세포의 발달과 분화를 조절할 것으로 판단된다.
본 실험은 생쥐에서 부정소액내의 단백질 성분과 조성에 미치는 정소액과 정자의 영향을 알아보기 위하여, 성적 성숙시기에 따라 정소와 부정소의 조직분화 양상을 관찰하였으며, 강소분화 특징에 따라 체취한 부정소액은 전기영동법으로 단백질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 정소와 부정소는 생후 10일군에서 미분화 상태였고, 20일군에서 세정관의 강소는 형성되지 않았으나 부정소는 두부에서 미부에까지 강소가 형성되었으며, 35일군에서는 정소내 세정관의 강소가 형성되었고 정세포는 정자로 분화되었고, 부정소의 상피세포는 principal cell과 clear cell로 분화되었으나 부정소로 유입된 정자는 없었다. 80일군에서는 정소와 부정소가 완전히 본화되었고 부정소로 유입된 많은정자가 관찰되었다. 그리고 부정소액의 전기영동상에는 혈청내의 성분과 다른 단백질이 모두 28종이 나타났는데, 그 중 12종은 부정소액에만 존재하는 부정소 특이단백질이었고, 16종은 정소액에도 공통으로 존재하는 단백질이었다. 또한 이 단백질들은 성숙시기에 따라 종류가 다르게 나타났으며, 성체에서 나타난 3종의 단백질은 부정소의 부위에 따라 양적인 변화를 나타냈다. 이상의 결과로 보아 부정소액내 단백질의 성분과 조성은 정자를 포함한 정소액의 유입과 부정소 상피세포의 분비 및 흡수의 조절작용에 의하여 변화되는 것으로 사료된다. 따라서 부정소액내의 TEP와 ESP는 부정소 정자의 성숙에 어떤 중요한 역할을 할 것으로 사료된다.
Periodontal regenerative therapy and tissue engineering on defects destructed by severe periodontitis need maintaining of space, which provides the environment for cell migration, proliferation and differentiation. Application of bone grafts may offer this environment in periodontal defects. This study evaluated bone graft materials, $MBCP^{(R)}$ and $Algipore^{(R)}$ , in surgically created i-wall periodontal intrabony defects of minipigs by histological analysis. Critical sized($4mm{\times}4mm$), one wall periodontal intrabony defects were surgically produced at the proximal aspect of mandibular premolars in either right and left jaw quadrants in four minipigs. The control group was treated with debridement alone, and experimental group was treated with debridement and $MBCP^{(R)}$ and $Algipore^{(R)}$ application. The healing processes were histologically observed after 8 weeks and the results were as follows. 1. In the control group, limited new bone formation was observed. 2. In MBCP group, more new bone formation was observed compared to other groups. 3. Histologically, dispersed mixture of new bone, biomaterial particles and connective tissue were shown and osteoblasts, osteoclasts and new vessels were present in this area. 4. Defects with Algipore showed limited new bone formation and biomaterial particles capsulated by connective tissue. 5. Histologically, lots of osteoclasts were observed around the biomaterial but relatively small numbers of osteblasts were shown. Within the limitation to this study protocol, $MBCP^{(R)}$ application in 1-wall intrabony defect enhanced new bone formation rather than $Algipore^{(R)}$ application.
Background: Gastric cancer is frequently lethal despite aggressive multimodal therapies, and new treatment approaches are therefore needed. Retinoids are potential candidate drugs: they prevent cell differentiation, proliferation and malignant transformation in gastric cancer cell lines. They interact with nuclear retinoid receptors (the retinoic acid receptors [RARs] and retinoid X receptors [RXRs]), which function as transcription factors, each with three subclasses, ${\alpha}$, ${\beta}$ and ${\gamma}$. At present, little is known about retinoid expression and influence on prognosis in gastric cancers. Patients and Methods: We retrospectively analyzed the expression of the subtypes RARa, $RAR{\beta}$, $RAR{\gamma}$, RXRa, $RXR{\beta}$, $RXR{\gamma}$ by immunohistochemistry in 147 gastric cancers and 51 normal gastric epithelium tissues for whom clinical follow-up data were available and correlated the results with clinical characteristics. In addition, we quantified the expression of retinoid receptor mRNA using real-time PCR (RT-PCR) in another 6 gastric adenocarcinoma and 3 normal gastric tissues. From 2008 to 2010, 80 patients with gastric cancers were enrolled onto therapy with all-trans-retinoic acid (ATRA). Results: RARa, $RAR{\beta}$, $RAR{\gamma}$ and $RXR{\gamma}$ positively correlated with each other (p < 0.001) and demonstrated significantly lower levels in the carcinoma tissue sections (p < 0.01), with lower $RAR{\beta}$, $RAR{\gamma}$ and RXRa expression significantly related to advanced stages (p < =0.01). Tumors with poor histopathologic grade had lower levels of RARa and $RAR{\beta}$ in different histological types of gastric carcinoma (p < 0.01). Patients whose tumors exhibited low levels of RARa expression had significantly lower overall survival compared with patients who had higher expression levels of this receptor (p < 0.001, HR=0.42, 95.0% CI 0.24-0.73), and patients undergoing ATRA treatment had significantly longer median survival times (p = 0.007, HR=0.41, 95.0% CI 0.21-0.80). Conclusions: Retinoic acid receptors are frequently expressed in epithelial gastric cancer with a decreased tendency of expression and RARa may be an indicator of a positive prognosis. This study provides a molecular basis for the therapeutic use of retinoids against gastric cancer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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