• 한국수산과학회지
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• 제45권6호
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• pp.553-560
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• 2012

Hizikia fusiformis, a brown alga that is widely consumed in Korea, Japan, and China, possesses a number of potentially beneficial compounds, including antioxidants and anticoagulants. However, the molecular mechanisms of H. fusiformis in hepatoma cells have not been elucidated. This study investigated the antiproliferative effect and mechanism of action of a glycoprotein from H. fusiformis (HFGP) in HepG2 human hepatoma cells. In an MTS assay, 25 ${\mu}g/mL$ HFGP inhibited the proliferation of HepG2 cells by $52.36{\pm}2.37%$. HFGP caused the dose-dependent growth inhibition of HepG2 cells by inducing apoptosis and a sub-G1 phase arrest. The antiproliferative activity of HFGP was confirmed based on the expression of several apoptosis-related proteins, which was assessed by Western blot analysis. The expressions of Fas, Fas-associated death domain protein, Bax, and Bad was significantly up-regulated in HFGP-treated cells, and HFGP induced the translocation of Bax to mitochondria and the release of cytochrome c into the cytosol. Therefore, HFGP might be useful in the treatment of liver cancer.

• 동의생리병리학회지
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• 제19권3호
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• pp.640-646
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• 2005

This study was performed for the investigation of anticancer effects of Siegesbeckia glabrescens(SG) on HepG2 cells, a human hepatoma cell line. In the previous study, we examined the involvement of nitric oxide (NO) on anti-proliferative and apoptotic efficacy of SG in vascular smooth muscle cells. The possible mechanism of the apoptotic effects of SG was investigated in HepG2 cells. SG showed potent cytotoxic activity in HepG2 but not chang cells, liver normal cells. SG treatment caused morphological change such as cell shrinkage, nuclei condensation and cell blebbing in HepG2 cells. SG also increased the nitrite production of HepG2 cells in a dose-dependent manner. Furthermore, L-NNA treatment inhibited the anti-proliferative effect of SG. From RT-PCR, SG decreased Bcl-2 but no affected on Bax. Western blot for procaspase-3 and COX-2 showed that degradation of procaspase-3 protein level or inhibition of COX-2 protein expression by SG treatment. In addition, the apoptotic effect of SG was also demonstrated by DNA laddering. In conclusion, SG-induced HepG2 cells death can occur via apoptosis which was dose-dependent, and associated with apoptosis-related Bcl-2/Bax gene expressions, COX-2 inhibition, caspase-3 activation and NO pathway. These results suggest that SG is potentially useful as a chemotherapeutic/chemopreventive agent in hepatocellular carcinoma.

• Nuclear Medicine and Molecular Imaging
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• 제41권3호
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• pp.226-233
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• 2007

목적: 광학과 핵의학 및 자기공명 분자영상 기술은 생체내에서 리포터 유전자의 발현을 비침습적으로 평가할 수 있다. 한가지 이상의 유전자 발현을 영상화 할 수 있는 복합분자영상은 유전자의 발현과 유전자 치료 후 효능의 평가를 다양한 방법으로 반복하여 평가할 수 있다는 장점이 있다. 본 연구에서는 핵의학 영상이 가능한 NIS와 광학 영상이 가능한 EGFP 두가지 유전자를 동시에 발현하는 HepG2-Retro-PNRGW (PGKp-NIS-RSVp-EGFP-WPRE) plasmid를 이용한 간암 세포주(HepG2-NE)를 구축하고, NIS와 EGFP 리포터 유전자의 기능 발현을 체내에서 광학영상과 핵의학 영상으로 확인하고자 하였다. 재료 및 방법: pcDNA-NIS로 부터 NIS 유전자를 분리하여 pRetro-PN vector를 만든 후, pLNRGW (LTR-NeoR-RSV-EGFP-WPRE)로부터 RSV-EGFP-WPRE 조각을 분리하여 최종적으로 NIS와 EGFP 유전자가 동시에 발현할 수 있는 pRetro-PNRGW vector를 구축하였다. 구축된 vector를 이용하여 Retro-PNRGW retrovirus를 생산하였으며, 이를 HepG2 세포에 감염시켜 HepG2-NE 세포주를 만들었다. 이 세포주의 NIS 유전자의 발현은 역전사효소 중합효소 연쇄반응으로 mRNA 발현을 확인하였고, EGFP 유전자의 발현은 형광현미경을 통하여 EGFP 단백질이 발현하는 녹색형광을 관찰함으로써 확인하였다. 이중 리포터 유전자 중 NIS 유전자의 기능은 세포에서 방사능 옥소의 섭취량과 유출량의 측정을 통해서 확인하였다. 이렇게 만들어진 세포를 누드마우스에 이식하여 형광 영상, I-123을 이용한 감마카메라 영상과 I-124를 이용한 소동물용 PET 영상을 획득하였다. 결과: NIS와 EGFP의 이중 리포터 유전자를 가지고 있는 HepG2 세포주가 성공적으로 만들어졌다. 세포의 약 50% 정도가 형광 현미경 아래에서 관찰되었다. NIS 유전자의 발현은 역전사효소 중합효소 연쇄반응 실험을 통해서 확인하였고, NIS가 발현된 세포의 방사능옥소 섭취량은 대조군에 비하여 약 9배 정도 높게 나타났다. 방사능옥소 유출량 실험에서는 약 9분에 반 정도의 옥소가 유출되는 것이 확인되었다. 구축된 세포주를 이식한 후 획득한 형광 영상, 감마카메라과 소동물용 PET 영상에서는 반대쪽의 대조군 세포를 이식한 것에 비하여 뚜렷한 형광신호가 보였고, 더 높은 방사능옥소 섭취가 확인되었다. 결론: NIS와 EGFP의 이중 리포터 유전자를 가지는 간암 세포주가 성공적으로 구축되었고, 소동물에서 두 유전자를 각각 치료용 리포터 유전자와 영상 리포터 유전자로의 사용이 가능할 것이라고 생각된다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제6권4호
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• pp.187-191
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• 2002

Tamoxifen, an antiestrogen, has previously been shown to induce apoptosis in HepG2 human hepatoblastoma cells through activation of the pathways independent of estrogen receptors, i.e., intracellular $Ca^{2+}$ increase and generation of reactive oxygen species (ROS). However, the mechanism of tamoxifen to link increased intracellular $Ca^{2+}$ to ROS generation is currently unknown. Thus, in this study we investigated the possible involvement of calmodulin, a $Ca^{2+}$ activated protein, and $Ca^{2+}$/calmodulin-dependent protein kinase II in the above tamoxifen-induced events. Treatment with calmodulin antagonists (calmidazolium and trifluoroperazine) or specific inhibitors of $Ca^{2+}$/calmodulin-dependent protein kinase II (KN-93 and KN-62) inhibited the tamoxifen-induced apoptosis in a dose-dependent manner. In addition, these agents blocked the tamoxifen-induced ROS generation in a concentration-dependent fashion, which was completely suppressed by intracellular $Ca^{2+}$ chelation. These results demonstrate for the first time that, despite of its well-known direct calmodulin-inhibitory activity, tamoxifen may generate ROS and induce apoptosis through indirect activation of calmodulin and $Ca^{2+}$/calmodulin-dependent protein kinase II in HepG2 cells.

• 한국독성학회:학술대회논문집
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• 한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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• pp.95-96
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• 2001

The mutagenic and antimutagenic activities of catechin, hamamelitannin and two proanthocyanidin fractions prepared from the bark of Hamamelis virginia L. - a commonly used medicinal herb - were investigated in a human derived hepatoma (Hep G2) cell line using the single cell gel electrophoresis (SCGE, syn. Comet assay) for the detection of DNA-migration. The cells possess different phase I and phase II enzymes involved in the biotransformation of xenobiotics.(omitted)

• 한국독성학회:학술대회논문집
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• 한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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• pp.93-94
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• 2001

Former studies dealing with combined effects caused by chemical compounds in the metabolically competent hepatoma cell line Hep G2 indicated that Hep G2 cells are useful and sensitive indicators for the identification of synergisms of promutagens, comutagens and antimutagens which are relevant in eukryontic (human) cells. In the present study we examined the modulation of DNA damages by the suspected antimutagens ascorbic acid, beta-carotene, alpha-naphthoflavone and beta-naphthoflavone in Hep G2 cells.(omitted)

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권5호
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• pp.891-900
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• 2004

UDP-N-Acetylglucosamine(GlcNAc):$\beta$1,4-D-mannoside$\beta$-l ,4N-acetylglucosaminyltransferase-III (GnT-III) and UDP-N-GlcNAc:$\alpha$-6-D-mannosid$\beta$-1,6N-acetylglucosaminyltransferase-V(GnT - V) activities were determined in human hepatoma cell lines and metastatic colon cancer cells, and their activities were compared with those of normal liver cells and fetal hepatocytes. GnT-III activities were higher than those of GnT-V in hepatic carcinoma cells. When the two enzyme activities were assayed in highly metastatic colon cancer cells, GnT - V activities were much higher than those of GnT-III. When GlcN, GlcN-biant-PA and UDP-GlcNAc were used as substrates, the enzymes displayed different kinetic properties between hepatic and colon cancer cells, depending on their metastatic potentials. Normal cells of two origins had characteristically very low levels of GnT-III and -V activities, whereas hepatoma and colon cancer cells contained high levels of activities. These data were supported by RT-PCR and Northern blot analyses, showing that the expression of GnT-III and -V mRNAs were increased in proportion to the enzymatic activities. The increased GnT-III, md -V activities were also correlated with increased glycosylation of the cellular glycoproteins in hepatoma and colon cancer cells, as examined by lectin blotting analysis by using wheat germ glutinin (WGA), erythroagglutinating phytohemagglutinin (E-PHA), leukoagglutinating phytohemagglutinin (L-PHA), and concanavalin A (Con A). Treatment with retinoic acid, a differentiation agent, resulted in decreases of both GnT-III and -V activities of HepG2 and HepG3 cells. In colon carcinoma cells, however, treatment with retinoic acid resulted in a reduction of GnT-V activity, but not with GnT-III activity. Although the mechanism underlying the induction of these mzymes is unclear, oligosaccharides in many glycoproteins have been observed of cancer cells.

• 생명과학회지
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• 제15권3호
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• pp.323-331
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• 2005

남미지역에서 자생하는 Tabebuia avellanedae라는 나무의 수피에서 동정된 quinone계 물질이며, DNA topoisomeras억제제로 알려진 $\beta-lapachone$의 항암작용에 관한 부가적인 자료를 얻기 위하여 인체 간암(HepG2) 및 방광암(T24)세포를 대상으로 조사한 결과 다음과 같은 결과를 얻게 되었다. MTT assay 및 flow cytometry 분석 등의 결과에서, $\beta-lapachone$의 처리에 따라 조사된 두 가지 암세포에서 $\beta-lapachone$처리 농도의존적으로 암세포의 심한 형태적 변형이 동반되면서 암세포의 증식이 억제되었으며, 생존율이 저하되었고 이는 apoptosis유발과 상관성이 있음을 알 수 있었다. $\beta-lapachone$처리에 의한 두 암세포의 증식억제는 종양억제 유전자 p53 및 Cdk inhibitor p21의 발현과는 큰 연관성이 없음을 RT-PCR 및 Western blot analysis를 통하여 확인하였다. 그러나 전사조절인자 Sp-1 및 세포증식 주요조절인자인 PCNA의 단백질 발현은 $\beta-lapachone$처리에 따라 매우 감소되었으며, telomere조절에 중요한 인자들의 선택적 발현 저하 현상도 관찰되었다. 이상의 결과들은 인체 암세포에서 $\beta-lapachone$의 항암작용을 이해하는 중요한 자료가 될 것이며, $\beta-lapachone$과 유사한 화학적 구조 및 성질을 가지는 항암제 후보물질들의 항암기전 비교 및 항암제 개발을 위한 기초 자료로서 응용될 것이다.

• 한국식품영양학회지
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• 제27권3호
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• pp.400-405
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• 2014

최근 알로에 베라 섭취에 의한 독성 간염이 보고되고 있으나, 아직까지 알로에 베라의 간에 대한 염증 효과가 명확히 밝혀지지 않았다. 본 연구는 알로에 베라 에탄올 추출물이 간세포의 염증 발현에 미치는 영향과 그 기전을 밝히기 위해 수행되었다. $0.001{\sim}100{\mu}g/mL$의 알로에 베라 추출물을 HepG2 세포에 처리하여 MTT assay를 시행한 결과, 모든 농도에서 세포사멸이 유도되지 않았다. 그러나 모든 농도에서 알로에 베라 추출물은 염증성 사이토카인인 IL-8의 분비를 15.7~25.8%까지 유의적으로 증가시켰다(p<0.05). 또 다른 사이토카인인 M-CSF도 알로에 베라 추출물에 의해 36.3~61.5%까지 유의적으로 분비가 증가되었다(p<0.05). 본 연구 결과는 알로에 베라 추출물이 IL-8과 M-CSF와 같은 염증성 사이토카인 분비기전에 의해 간에 염증을 유발할 수 있음을 보여준다. 또한 알로에 추출물에 의해 유발될 수 있는 간염기전을 제시함으로써, 향후 수행될 추가 실험을 위한 기초 자료로 그 가치가 높을 것으로 사료된다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제17권5호
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• pp.1086-1091
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• 2008

The antioxidant activities of the extracts of dangyuja (Citrus grandis Osbeck) leaves were evaluated. The highest phenolic content was obtained from the ethyl acetate fraction (EF) (202.1$\pm$0.8 mg GAE/g dried extract) and it exhibited the highest 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity. The cytoprotective effects of EF on oxidative damage induced by tert-butyl hydroperoxide (t-BHP) in a human hepatoma cell line, HepG2 cells, were investigated to understand the intracellular antioxidant mechanisms. Treatment of HepG2 cells with EF prior to oxidative stress was found to inhibit reactive oxygen species (ROS) generation, lipid peroxidation, and DNA damage in a dose-dependent manner. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) studies on EF resulted in tentative identification of 19 compounds representing 94.3% of the total content. Taken together, these results demonstrated that EF has excellent antioxidant activities and thus dangyuja leaves have great potential as a source for natural antioxidant which can be applied in food products.