Feline panleukopenia virus (FPV) causes leukopenia and severe hemorrhagic diarrhea, killing 50% of naturally infected cats. Although intact FPV can serve as an antigen in the hemagglutination inhibition (HI) test, an accidental laboratory-mediated infection is concern. A non-infectious diagnostic reagent is required for the HI test. Here, we expressed the viral protein 2 (VP2) gene of the FPV strain currently prevalent in South Korea in a baculovirus expression system; VP2 protein was identified by an indirect immunofluorescence assay, electron microscopy (EM), Western blotting (WB), and a hemagglutination assay (HA). EM showed that the recombinant VP2 protein self-assembled to form virus-like particles. WB revealed that the recombinant VP2 was 65 kDa in size. The HA activity of the recombinant VP2 protein was very high at 1:215. A total of 143 cat serum samples were tested using FPV (HI-FPV test) and the recombinant VP2 protein (HI-VP2 test) as HI antigens. The sensitivity, specificity, and accuracy of the HI-VP2 test were 99.3%, 88.9%, and 99.3%, respectively, compared to the HI-FPV test. The HI-VP2 and HI-FPV results correlated significantly (r = 0.978). Thus, recombinant VP2 can substitute for intact FPV as the serological diagnostic reagent of the HI test for FPV.
Helicobacter pylori specifically adhere to host cells through a number of putative receptors and ligands, mainly based on carbohydrate-protein interactions. Polysaccharide fractions isolated from the leaves of Artemisia capillaris showed different inhibitory activities against H. pylori adhesion by using hemagglutination assay. Among these fractions, an acidic polysaccharide fraction FlA showed highly effective inhibitory activity, and its minimum inhibition concentration was 0.63 mg/ml. The inhibition results by the hemagglutination assay were consistent with those obtained by the enzymelinked glycosorbent assay, which was developed by the conjugation of horseradish peroxidase with fetuin, a sialic acid-containing glycoprotein which was specific to H. pylori adhesion. FlA contained the highest carbohydrate content among polysaccharide fractions, and no protein was detectable when further purified by gel filtration FPLC. Sugar composition analysis using GC revealed the highest amount of galacturonic acid among sugars, which suggests that FlA contains essentially acidic polysaccharides. Our data suggest that acidic polysaccharides may play an important role in the inhibition of H. pylori adhesion to host cells.
Lectin activities and chemical characteristics of Escherichia coli, Lactobacillus spp. and Bifidobacterium spp. originating from the porcine cecal mucosal layer were studied based on hemagglutination assay (HA) and hemagglutination inhibition assay (HIA). Although all the bacterial strains were able to agglutinate erythrocytes of porcine or rabbit origin, much higher HA titers were consistently observed for Lactobacillus spp. than for E. coli or for Bifidobacterium spp. A remarkable reduction in HA titers occurred by the treatment of E. coli and Lactobacillus spp. with protease or trypsin and of Bifidobacterium spp. with protease, trypsin or periodate. There were no significant effects on the HA titers of the three groups of bacteria after the treatment with lipase. Hemagglutination of E. coli was strongly inhibited by D (+)-mannose and D (+)-galactose; Lactobacillus spp. by $\alpha$-L-rhamnose and methyl-$\beta$-galactopyranoside; Bifidobacterium spp. by D (+)-alactose, $\alpha$-L-rhamnose, $\alpha$-L-fucose, L (+)-arabinose, D (+)-mannose, D (-)-fructose at a relatively low concentration (1.43 to 3.75 mg/ml). These results, combined with the enhanced HA activities of the three bacterial strains by modification of rabbit erythrocytes with neuraminidase and abolished HA activity of E. coli after treatment with $\beta$-galactosidase, indicate that it might be the glycoproteinous substances surrounding the surface of the bacterial cells that are responsible for the adhesions of these microorganisms by recognizing the specific receptors on the red blood cell.
Park, Mi-Ja;Joh, Seong-Joon;Choi, Kang-Seuk;Kim, Aeran;Seo, Min-Goo;Song, Jae-Young;Yun, Seon-Jong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.3
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pp.189-192
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2016
The virus neutralization (VN) test was used to determine potency of the infectious bronchitis (IB) vaccine. The results of VN, hemagglutination inhibition (HI), and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were compared with those of the IBV M41. The $r^2$ values between VN and HI titers and the ELISA antibody titer were 0.8782 and 0.0336, respectively, indicating a high correlation between VN and HI, but not VN and ELISA. The Cohen's kappa coefficient between the VN titer of 2 $log_{10}$ and HI titer of 5 $log_2$ was 0.909. Our results showed that VN could be replaced with HI for testing the potency of IBV M41.
The antigenicity of the aqueous extract of red ginseng (ARG) was evaluated using the following assay procedures : 1. active systemic anaphylaxis (ASA) in guinea pigs, 2 active cutaneous anaphylaxis (ACA) in guinea pigs, 3 passive cutaneous anaphylaxis (PCA) in guinea pigs, 2.active cutaneous anaphylaxis (ACA) in guinea pigs, 3. passive cutanepous anaphylaxis (PCA) in guina pigs with serum for guina pigs sensitized with ARG and 4. passive hemagglutination (PHA) with serum from guinea pigs sensitized with ARG. 1. ASA : No anaphylaxis reaction was observed in any of the sensitized guinea pigs by elictitation with ARG. 2. ACA : No skin reaction was observed in sensitized guinea pigs after intrademal injection of ARG. 3. PCA in guinea pigs : PCA titer of sera from all the sensitized animals was less than 10 in eliciation with ARG. 4. PHA reaction : When eythrocytes coated with challenge antigen were added to sensitized sera, the hemagglutination titer was less than 1. These results suggest that ARG has no antigenicity under the conditions used. And the dose levels of ARG employed in the present experiment were confirmed not to suppress immune reactions.
The antigenecity of somatic substances of S. pullorum standard strain and variant strain extracted byheat treatment, acid treatment and their modification, ammonium sulfate saturation (60 per cent), trypsin digestion was tested by indirest hemagglutination test and precipitation test and following results were optained. 1. Teatment at $100^{\circ}C$ for an hour of the bacteria could extract the antigen of S. pullorum standard strain and variant strain which was demonstrable by hemagglutination reaction with the human a group and chicken red blood cell. 2. Trypsin digestion was more enhanced its antigenecity in acid extracted antigen of S. pullorum variant strain compare with the S. pullorum standard strain. 3. The extracted antigenic substances of S. pullorum standard strain existed chiefly in the elicited fraction of precipitate at the treatment of ammonium sulfate saturation and after trypsin digestion, its antigenecity was demonstrated by hemagglutination. 4. At the treatment of ammonium sulfate treatment, did not occur the precipicate in acid extracted antigens of S. pullorum variant strain, however, the heal extracted antigen, positive reactions were obtained in both of the precipitate and supernatant fraction of the S. pullorum variant strain by hemagglutination reaction. After trypsin digestion, these fraction also exhibited positive reactions. 5. Precipitation test also tested dub could not detect in any soft of the antigens.
Liver abscess in children is rare in developed countries; the incidence is 25 per 100,000 admissions in USA. Common complications are pleural effusion, empyema, pneumonitis, hepatopleural or hepatobronchial fistula, intraperitoneal or intrapericardiac rupture, septic shock, cerebral amebiasis, etc. These complications may lead to death if the management is delayed. However, recent management results in a mortality of less than 15%. We report a case of liver abscess in a child. He manifested with fever and abdominal pain in the right upper quadrant. On computerized tomography scans, multiple cystic lesions were seen in both lobes of the liver and were 5 to 55 mm in size. In laboratory findings, neutrophilic leukocytosis, peripheral eosinophila, elevated values of ESR, C-reactive protein, and elevated serum AST, ALT, ALP and GGT were detected. Furthermore, we determined the organisms in the blood culture and serum. Blood culture was positive for Streptococcus spp., and amebic indirect hemagglutination antibody titer was increased to 1:512.
Effects of zinc chloride (Zn) on the immune responses of lipopolysaccharide (LPS) were studied by using ICR mice. Mice were divided into 4 groups (10 mice/group), and Zn was given to the mice with i.p. injection at 0.3 mg/kg 5 times a week for 14 days, and 1 hr after Zn administration, LPS was given with i.p. injection at 5 mg/kg twice a week. Mice were immunized and challenged with sheep red blood cells (SRBC). Immunobiological responses were evaluated by humoral, cellular and nonspecific immunity. LPS treatment significantly increased the relative weights of spleen and thymus, hemagglutination titer (HA) and proliferation of splenocytes compared with those in controls, but significantly decreased the body weight gain. Zn treatment significantly increased proliferation of splenocytes and circulating leukocytes compared with those in controls. Combination of Zn and LPS significantly decreased the body weight gain and proliferation of splenocytes compared with those in controls. Combination of Zn and LPS significantly decreased HA and proliferation of splenocytes than in LPS alone. These findings indicate that zinc lowered the humoral immune responses of LPS.
Aqueous extreact of fresh ginseng (AFG) was examined for the antigenicity in Hartley guinea pigs in comparision with ovalbumin (OVA). When guinea pigs were sensitized with AFG emulsified with complete Freund's adjuvant (CFA), these animals showed negative reactions in active systemic anaphylaxis (ASA), active cutaneous anaphylaxis (ACA) and passive cutaneous anaphylaxis (PCA) tests and passive hemagglutination (PHA) reaction. On the contrary, when guinea pigs were sensitized with OVA emulsified with CFA as positive controls, these animals disclosed positive reactions in ASA, ACA and PCA tests and PHA reaction. From these results, AFG was considered not to possess antigenic properties in guinea pigs. In addition, the dose levels of AFG empolyed in the present experiment were confirmed not to suppress immune reactions.
In order to investigate the preventive and therapeutic effects of Herba Houttuyniae, experimental studies on the immune response and histological findings were undertaken. The results of these studies were summarized as follows; Delayed type hypersensitivity and rosette formation rate were significantly increased compared with control group. Hemagglutination, hemolysin titer and NK cell activity were variable, not significantly against the control group. When observed on lung tissue recovery; experimental groups were shown to be significantly recovered as compared with the control group. From these results, it is suggested that Houttuyniae Herba promotes immune response and reduces the recovery time of pneumonitis and lung abscess from the histological viewpoint.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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