The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.21
no.2
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pp.227-231
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1986
The hemagglutination activities of Hantaan virus and Seoul virus were demonstrated. The hemagglutinins were prepared by sucrose-acetone extraction method from suckling mouse brains infectecd with Hantaan and Seoul viruses. Hemagglutination of goose erythrocytes by these viral hemagglutinins was pH dependent in phosphate buffer system. Hantaan and Seoul viruses were distinguished by pH range of hemagglutination. 76/118 and 79/90 strains of Hantaan virus showed hemagglutination at the range of pH 5.75-6.4 and the optimal pH was 5.75 with the titer of 1:512 in 76/118 and 1:256 in 79/90. In contrast, KSNUSD 84/34 strain of Seoul virus revealed hemagglutination at the range of pH 6.2-6.4 and the optimal pH was 6.4 with the titer of 1 : 64.
The Presence and quantity of protein A in Staphylococcus hyicus subsp hyicus isolates from pigs were determined by indirect hemagglutination test and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA). Cell-bound and extracellular protein A was demonstrated in 87.7% and 36.0% of 489 isolates, respectively, by indirect hemagglutination test. When contents of the protein A were estimated by ELISA method, all of the isolates that were positive to protein A in indirect hemagglutination test produced extracellular protein A of less than 1ng/ml. Most of the isolates produced cell-bound protein A of less than 1ng/ml, whereas 28 isolates produced 1 to 35ng/ml and 11 isolates produced 25 to 108ng/ml.
Recently Carter(1952) reported the capsule antigens of Pasteurella multocida could be divided into four serological types A,B,C and D by means of precipitation tests. Subsequently he showed that the most sensitive for identification of these types involved the use of capsule substance adsorbed by erythrocytes in hemagglutination test. It may be somewhat difficult to conduct the hemagglutination test in small laboratory, because relatively large amounts of antisera and erythrocytes of the human O type are required for the test. A simple method for serological typing of P. multocida was the slide agglutination test employed by Little et al. (1943) and Namioka et al. (1962), but this method is still in controversy. The author tried adapting Carter's hemagglutination method to the slide method so called "micromethod technique", and studied on the stabilization of erythrocytes for use of slide hemagglutination to P. multocida although many invesigators reported the stabilization of erythrocytes. The results obtained are summarized as follows: 1. A simplified method (slide method) for capsule typing of the organism was developed by adapting Carter's hemagglutination reaction(tube method). Antibody-containing serum can be diluted serially on Boerner's microtest slide with capillary or serological pipetts with a considerable accuracy. The slide reaction can be carried out with case on the slide by adding $0.05m{\ell}$ of antigen-sensitized erythrocytes suspension diluted to one percent on $0.05m{\ell}$ of serially diluted antibody-containing sera, and the final result can be read after 60 minutes at the room temperature ($15^{\circ}C$). 2. It is difficult to determine superiority of inferiority between the slide method and the tube method on the pattern of the reaction of hemagglutination. 3. The pH range of 6.6 to 8.3 is optimal for the slide hemagglutination reaction. 4. The antigen-sensitization against erythrocytes at $37^{\circ}C$ is optimal for the slide hemagglutination. 5. Both the doses and concentration of antigen do not influence the antigen-adsorbing capacity of erythrocytes. 6. The reduction of antigen-sensitizing hours does not influence the antigen-adsorbing capacity of erythrocytes even 30 minutes. 7. The tannic acid treatment against formalinized and non-formalinized erythrocytes showed no effect on the reaction of hemagglutination. 8. The erythrocytes preserved at $4^{\circ}C$ in the ACD solution do not decrease the reactivity on the reaction of hemagglutination for 60 days, while they begin slight hemolysis 30 days after preserving. 9. The stable preparation of erythrocytes can be obtained by treating the cells at $37^{\circ}C$ for 20 hours with from 4 to 8 percent of formalin in saline or buffer. These cells can be preserved at $4^{\circ}C$ for more than 8 months experimented without hemolysis. With low concentration of formalin, the cells were not sufficiently stabilized resulting in the hemolysis after short period of preservation at $4^{\circ}C$. 10. The erythrocytes treated with 16 percent of formalin remain constantly or increase the reactivity for the reaction of hemagglutination. On the contrary, the cells treated with I to 8 percent of formalin decrease the reactivity. 11. There is no difference between nontreated fresh erythrocytes and the erythrocytes preserved in the ACD solution on the reactivity against the hemagglutination, and the erythrocytes treated with 16 percent of formalin showed the reactivity of higher level than that of the above two kinds of erythrocytes. 12. There is no difference between the saline and the isotonic buffer solution on the reaction of hemagglutination.
Cold agglutinins are predominately immunoglobulin M autoantibodies that react at cold temperatures with surface antigens on the red blood cell. This can lead to hemagglutination at low temperatures, followed by complement fixation and subsequent hemolysis on rewarming. Development of hemagglutination or hemolysis in patients with cold agglutinins is a risk of cardiac surgery under hypothermia. In addition, there is the potential for intracoronary hemagglutination with inadequate distribution of cardioplegic solutions, thrombosis, embolism, ischemia, or infarction. We report a patient with incidentally detected cold agglutinin who underwent normothermic cardiac surgery with warm blood cardioplegia.
Erythrocytes from three different animal species were used to determine mannose-sensitive hemagglutination (MSHA) and mannose-resistant hemagglutination (MRHA) of 755 isolates obtained from rectal swabs of healthy pig. In addition, colony hybridization using digoxigenin-dUTP labeled polynucleotide probes was performed for the detection of heat-stable and heat-labile enterotoxin genes carried by MRHA positive isolates. Of 755 strains, 9, 4 and 28 strains gave a positive MRHA with bovine, equine and pig erythrocytes, respectively. Of these isolates, 28 (3.7%) were characterized for positive MRHA by at least one blood. Seven isolates gave a positive MRHA with two kinds of blood. Three gave a positive MRHA with three kinds of blood. Twenty-eight strains, while positive in MRHA, yielded negative signals in the colony hybridization assay for the detection of heat-stable (STaI and STaII) and heat-labile (LT) enterotoxin genes in E. coli.
Concanavalin-A, lectin extracted from Korean native plant “Banha”(Pine-llia Termata) and their conjugation products with tyrosine and 5-iodo-6-aminouracil were labelled by radioactive iodiae-125, and these labelled compounds were subjected to a hemagglutination test in vitro. The labelling procedures were presented with respect to labelling yield and the trends on the conjugation reaction of lectin with various amino acids were discussed. The preliminary results on the hemagglutination tests against cancer tissues were presented and the potential clinical applications of these labelled compounds were discussed.
Porcine deltacoronavirus (PDCoV) is an emerging swine enteric coronavirus that causes diarrhea in piglets. However, the biological characteristics of PDCoV are unclear. In this study, the hemagglutination (HA) abilities of two PDCoV strains (CH-01 and HNZK-04) were investigated. Our results showed that PDCoV has the ability to agglutinate rabbit erythrocytes after virion pretreatment with trypsin or neuraminidase. Additionally, the HA assay results showed a significant positive correlation with the infectious viral titer. Our results suggest that assessing the HA activity of PDCoV may be a useful diagnostic method for investigating and surveilling PDCoV infections.
Effects of squalene on humoral immune system in mice were investigated. Squalene exhibited significant increases in the circulating leukocyte counts and relative spleen and thymus weights of the mice. However, the relative liver weight was slightly decreased. Hemagglutination titers (HA) were signficantly enhanced by squalene while Arthus reaction was not affected. Splenic plaque forming cells (PFC) were also greatly increased by squalene, especially at doses of 50 and 100 mg/kg of it.
Rabbits were experimentally infected with rabbit hemorrhagic disease virs and the viral pathogenicity, hemagglutinability, and the effect of physicochemical factors were studied. The experimental results were summariaed as follows: 1. Mean rectal temperature of 11 infected rabbits was $40.0{\pm}0.47^{\circ}C$ prior to the virus inoculation, and $39.9{\pm}0.75^{\circ}C$ after 12hrs., $40.2{\pm}0.65^{\circ}C$ after 24hrs., $40.1{\pm}0.77^{\circ}C$ after 36hurs, and $40.6{\pm}0.56^{\circ}C$ just before the death. 2. Mean death time of infected rabbits was $40.3{\pm}22.0$ honrs and its range was 24 to 93 hours. 3. O, B, AB and A type of human erythrocytes were shown their HA in the order, but rabbit and chicken erythrocytes were not hemagglutinated by the virus. 4. In the hemagglutination, less than 0.25 per cent of a final concentration of erythrocytes and 0.2 per cent of BSA in PBS resulted in the best hemagglutination. Phosphate concentration in a range of 0.01M to 0.10M in PBS was not influenced on the hemagglutination reaction, and its pH 7.0 resulted in a better HA. 5. The hemagglutinating titers, in log 2 scale, of organs and tissues of the virus infected rabbits were $9.3{\pm}3.8$ (liver), $9.1{\pm}3.9$ (blood), $6.2{\pm}2.6$ (spleen) and $5.0{\pm}2.5$ (kidney). 6. The physicochemical factors such as heating ($50^{\circ}C$, 10 min.), trypsin treatment (0.05 pre cent, 5 min.), acid treatment (pH 3.0, 20 min.) and ether extraction (3 times) were not affective to the stability of virus and viral HA activities.
The Journal of the Korean Society for Microbiology
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v.22
no.2
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pp.147-153
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1987
Colonization factor antigen I(CFA I) has been shown to be one of several virulence factors that promote attachment of enterotoxigenic E. coli(ETEC) to small intestinal epithelial cells of humans. The ability of ETEC to produce mannose-resistant hemagglutination(MRHA) of human blood group A has been used to detect CFA I. To determine gastrointestinal carriage in Korean children of E. coli with MRHA and CFA I, 116 strains of E. coli from diarrheal children admitted to Hanyang University Hospital were examined for MRHA of human erythrocytes and the presence of CFA I. Of 45 ETEC strains, 18(40%) gave a positive MRHA($MRHA^+$) and eight(18%) were positive for CFA I(CFA $I^+$). ETEC with CFA I were all heat-stable enterotoxin(ST) producers and two of these strains were of serogroups $O_{25}$. Of 17 classic enteropathogenic E. coli(EPEC), 7(41%) were $MRHA^+$ but all were negative for CFA I(CFA $I^-$). Of 30 enteroadherent E. coli(EAEC) strains, 11(37%) were $MRHA^+$ and one was CFA $I^+$. Of 24 nonpathogenic E. coli, 4(17%) were $MRHA^+$ but all were CFA $I^-$. It was shown that MRHA was common in all strains of E. coli, CFA I was limited only to ST producing ETEC and EAEC; although MRHA is a useful screening procedure, serologic tests seem to be necessary to comfirm CFA I production. CFA I was associated with a lower proportion of ETEC isolates in Korea than has been reported for other locations.
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