Objective: This study was perfomled to examine the therapeutic effect of aqua-acupuncture solution of Hominis Placenta(HP) on kidney and liver intoxicated by $HgCI_2$ in rats. Methods: $10\%$ and $25\%$ HP aqua-acupuncture were carried out everyday for 8 days on corresponding bilateral loci of Shinsu(BL23) and Kansu(BL18), respectively, after mercuric chloride intoxication in rats. Thereafter BUN, creatinine, GOT, GPT, ALP, ${\gamma}$-GT, albumin and total bilirubin were measured before intoxication, and at the 4th and the 8th experimental day. Histopathological and immunochemical observation were also carried out. Results: 1. It showed significant decreases of BUN in the group of $10\%$ HP aqua-acupuncture into Shinsu on the 4th experimental day as compared with the control group. 2. It showed significant decreases of creatinine in the group of $10\%$ HP aqua-acupuncture into Shinsu on the 4th and the 8th experimental days as compared with the control group. 3. There were not any significant changes of GOT, GPT, ALP,${\gamma}$-GT, albumin and total bilirubin in the HP aqua-acupuncture groups compared with the control group. 4. By the histopathological observations on kidney under a light microscope, alt the $10\%$ and $25\%$ HP aqua-acupuncture into Shinsu showed the preventive effect on tubulo-interstitial necrosis and muItifocal calcification in tubular lumen respectively compared with the control group. 5. By the histopathological observations on liver under a light mIcroscope, the groups $10\%$ and $25\%$ HP aqua--acupuncture into Kansu did not show any significant changes in the liver compared with the control group. 6. By the immunochemical analysis of heat shock protein(hsp) and glucose-regulated protein(grp) in rat renal cortex, the expressions of hsp70 and grp78 were decreased in the $10\%$ and $25\%$ HP aqua-acupuncture into Shinsu respectively compared with the control group. Conclusion: These results suggest that Hominis Placenta aqua-acupuncture have an effect on prevention and protection of renal intoxication by $HgCI_2$ in rats.
Kim, Do-Rim;Yu, Seong-Jin;Kim, Jee-Yun;Youm, Mi-Young;Lee, Chae-Kwan;Kang, Sung-Goo
한국발생생물학회:학술대회논문집
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한국발생생물학회 2003년도 제3회 국제심포지움 및 학술대회
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pp.70-70
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2003
The uterus undergoes dynamic changes during the cycle and displays many features typical of developmental process. In order to be prepared for implantation, endometrium undergoes predictable, sequential phases of proliferation and secretory changes. The uterus during estrus cycle synthesize a complex of signaling molecules with specific spatial and temporal modes of expression and which are critical for cell proliferation and differentiation. The purpose of this investigation was to use cDNA microarrays to evaluate the expression of genes of rat uterus in estrus cycle. Animals were sacrificed on proestrus, estrus, metestrus, diestrus. Differential gene expression profiles were revealed(growth-related c-myc reponsive protein RCL, heat shock 47-kDa protein (HSP47), cytochrome c oxidase polypeptide Vlc2 (COX6C2), calreticulin (CALR)). Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to validate the relative expression pattern. Using this approach, we found several genes whose expression in rat uterus was altered with estrus cycle. Our long-term goal is to determine the role of these differentially expressed genes during estrus cycle. This study was supported by through the Biohealth Products Research Center(BPRC), Inje University.
단백질 번역 후 O-GlcNAc 수식은 단백질 조절의 새로운 기전으로 대두되고 있다. 전통적인 당수식과 달리 O-GlcNAc 수식은 단 한번의 O-GlcNAc 전달로 이루어지며, 핵 및 세포질단백질 모두에 수식될 수 있다. O-GlcNAc은 이 분자를 끝으로 하는 최종수식으로 생각되어 왔으나, 최근의 논문(J Proteome Res. 2011 10:2725-2733)은 AP180 단백질에 O-GlcNAc-P가 존재함을 보고하였다. 이 논문은 O-GlcNAc-P가 일반적인 단백질수식인지에 대한 중요한 질문을 던진다. 이에 답하고자 저자들은 HEK293T 세포에 O-GlcNAc 인산화효소 NAGK를 DsRed2에 연결한 DsRed2-$NAGK_{WT}$ 혹은 효소활성이 없는 돌연변이 NAGK를 표현하는 DsRed2-$NAGK_{D107A}$를 표현시키고, 단백질 추출물을 얻어 2D-PAGE로 분리한 후 인산화 정도를 측정하여, $NAGK_{WT}$에 의하여 인산화가 증가되는 15개의 단백질 스폿을 선별하였다. 이 가운데 7개 스팟을 동정한 결과 2개의 스폿은 O-GlcNAc 수식 단백질인 $HSP90{\beta}$, 다른 2개의 스폿도 O-GlcNAc 수식 단백질인 ENO1로 동정되었으며, 나머지(dUTP nucleotidohydrolase mitochondrial isoform 2, glutathione S-transferase P, grp94)는 O-GlcNAc 수식 여부를 아직 모르는 단백질이였다. NAGK에 의하여 O-GlcNAc 단백질의 인산화가 증가된다는 사실은 O-GlcNAc이 인산화되어 O-GlcNAc-P로 수식됨을 시사하며, 따라서 본 연구의 결과는 O-GlcNAc이 최종 수식이 아님을 지지한다.
The Korean native chickens (Woorimotdak$^{TM}$, KNC) and commercial broilers (Ross, CB) show obvious differences in meat flavor after cooking. To understand the contribution of protein and peptide for meat flavor, 2-dimensional (2-D) gel electrophoresis and matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry was performed. A total of 16 protein spots were differentially expressed in the breast and thigh meat between the two breeds. A total of seven protein spots were represented by different levels between KNC and CB for breast meat. Among them three protein spots (TU39149, TU40162 and TU39598) showed increases in their expressions in KNC while other four protein spots (BU40125, BU40119, BU40029 and BU39904) showed increases in CB. All nine protein spots that were represented by different levels between KNC and CB for thigh meat showed increases in their expression in KNC. Phosphoglucomutase 1 (PGM 1), myosin heavy chain (MyHC), heat shock protein B1 (HSP27), cytochrome c reductase (Enzyme Q), Glyoxylase 1, DNA methyltransferase 3B (DNA MTase 3) were identified as the main protein spots by MALDI-TOF mass spectrometry. These results can provide valuable basic information for understanding the molecular mechanism responsible for breed specific differences in meat quality, especially the meat flavour.
Background : Anticancer effects of herbal medicine have been reported in various types of cancer, but the systematic approaches to explain molecular mechanism(s) are not established yet. Objective : To find the anticancer-effect and mechanism(s) of Water Extract of Coptis japonica (WECJ) colon cancer cell (SNU-81). Methods : We first selected 11 herbals, and anti-cancer effects of water-extracts from those herbals have been tested in human colon cancer cell line, SNU-81. Among the tested herbals, the WECJ significantly reduced proliferation of SNU-81. To establish a basis of understanding for anti-cancer mechanism, whole proteins have been obtained from SNU-81 harvested at 48 and 96 hrs after the treatment of WECJ, protein expression has been profiled by 2DE-based proteomic approach. Results : Various changes of the protein expression have been monitored, and most frequent dysregulation was found in the molecular chaperons including heat shock protein 90-alpha (Hsp90-alpha), 14-3-3 protein epsilon, T-complex protein 1 subunit alpha, protein disulfide-isomerase A3, and calreticulin. Interestingly, proliferation-associated protein 2G4 has been up-regulated, and it suggests the possible effect of Coptis japonica on ErbB3-regulated signal transduction pathway and growth control of human colon cancer cells. Conclusion : Based upon the present findings, the further study will focus on monitoring various cancer survival factors after artificial regulation of the proteins identified, and it would be the basis for the understanding of the Coptis japonica anti-cancer effect(s) at the molecular level.
수온은 어류를 포함한 수중동물의 다양한 생물학적 사건에 영향을 미친다. 어류의 번식 및 발생도 수온의 변화와 밀접한 관련이 있다. 어류를 높은 수온에 노출시키면 HSP70 유전자 발현을 유도한다. 따라서, HSP70 유전자 발현을 효과적으로 차단할 수 있는 저해제의 개발은 온도에 민감한 생물학적 사건과 관련된 HSP70의 역할을 연구하는데 크게 기여할 수 있다. 본 연구에서는 고온($36^{\circ}C$)에 노출된 틸라피아 자어와 치어(전장 10~13 cm)에서 천연 flavonoid의 일종인 quercetin, 3,3',4',5,7-pentahydroxyflavon의 "고온 유도 HSP70 유전자 발현" 억제효과를 조사하였다. 고온 노출 전에 50 ${\mu}M$ 이상의 quercetin 용액에 6시간 동안 사전 침지한 실험어에서는 HSP70 유전자 발현이 유의하게 감소하였다(P<0.05). 특히, 100 ${\mu}M$로 침지 처리한 개체에서는 고온 처리를 하지 않은 실험어에서 만큼 낮은 HSP70 유전자 발현을 나타내었다. 한편, 0.1 $m{\ell}$씩의 0.5 mM, 5 mM 또는 20 mM의 quercetin 용액을 치어에 주사한 결과, 고수온 유도 HSP70 유전자 발현은 0.5 mM의 quercetin을 주사한 치어의 생식소와 뇌에서 모두 유의하게 감소되었다(P<0.05). 본 연구의 결과는 quercetin이 어류에서 고온에 의해 유도된 HSP70 유전자 발현을 효과적으로 차단할 수 있으며, 틸라피아 자어 침지의 경우 유효 농도 100 ${\mu}M$ 그리고 치어 주사의 경우 유효 농도 0.5 mM로 원하는 효과를 얻을 수 있음을 제시한다.
Jong Woo Park;Chang Hoon Lee;Chan Young Jeong;Hyeok Gyu Kwon;Seul Ki Park;Ji Hae Lee;Sang Kuk Kang;Seong-Wan Kim;Seong-Ryul Kim;Hyun-Bok Kim;Kee Young Kim
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제46권1호
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pp.16-23
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2023
The silkworm's dormancy and embryonic development are accomplished through the interaction of various genes. Analysis of the expression of several interacting genes can predict the embryonic stage of silkworms. In this study, we analyzed the changes in the expression level of genes at each stage during the embryonic development of dormant silkworm eggs and selected genes that can predict the hatching time. Jam123 and Jam124 silkworms were collected after egg laying, and the silkworm eggs were preserved using a double refrigeration method and expression analysis was performed for 23 genes during embryogenesis. There were 5 genes showing significant changes during embryogenesis: UDP-glucuronosyltransferases (BmUGTs), heat shock protein hsp20.8 (BmHsp20.8), Cytochromes b5-like proteins (BmCytb5), Krüppel homolog 1 (BmKr-h1), and cuticular protein RR-1 motif 41 (BmCpr41). As a result of quantitative comparison of the expression levels of these 5 genes through real-time PCR, the BmUGTs gene showed a difference between Jam123 and Jam124, making it difficult to see it as an indicator for predicting hatching time. However, the BmHsp20.8 gene had a common expression decreased at the imminent hatching stage. In addition, it was confirmed that the expression level of the BmCytb5 gene decreased to the lowest level at the time of imminent hatching, and the expression of the BmKr-h gene was made only at the time of imminent hatching. The expression of the last BmCpr41 gene can be confirmed only at the time of imminent hatching, and it was confirmed that it shows a rapid increase right before hatching. Taken together, these results suggest that expression analysis of BmHsp20.8, BmCytb5, BmKr-h1, and BmCpr41 genes can determine the stage of embryogenesis, predict hatching time, which facilitate better management of silkworm eggs.
본 연구에서는 국산종계 개발을 위하여 5계통의 토종닭 순계를 이용하여 $5{\times}5$ 이면교배조합 시험을 수행하고, 공시된 25계통에 대한 스트레스 반응 정도를 비교 분석하였다. 스트레스 반응정도 표지로 텔로미어 함량 및 감축율, 열 스트레스 단백질 유전자(HSPs)로 HSP-70, $HSP-90{\alpha}$, $HSP-90{\beta}$의 발현율 및 DNA 손상율을 이용하여 분석하였다. 텔로미어 함량은 양적 형광접합보인법을 이용하고, HSPs 발현율은 quantitative real-time PCR 기법으로, DNA 손상율은 Comet assay법을 적용하였다. 분석 결과, 교배조합 25계통 간 텔로미어 함량과 감축율, HSPs 유전자 발현율 및 DNA 손상율 모두에서 유의한 차이를 보였고, 더불어 계통 간 체중 및 생존율에도 유의한 차이가 나타났다. 텔로미어 감축율, HSPs 유전자 발현율 및 DNA 손상율 모든 분석 값에서 W 및 Y 계통과의 교잡구가 다른 교잡구에 비해 유의하게 낮은 값을 보였고, 반면 G계통의 순계구가 가장 높은 값을 나타내었다. 생존율과 스트레스 표지 값들 간의 상관계수를 추정한 결과, 텔로미어 함량과는 저도의 정(+)의 상관, HSP-70, $HSP-90{\alpha}$, $HSP-90{\beta}$ 및 DNA 손상율과는 중도 및 저도의 부(-)의 상관을 나타내었다. 또한 폐사 개체와 생존 개체 간 HSP-70, $HSP-90{\alpha}$ 및 $HSP-90{\beta}$의 발현율을 비교 분석한 결과, 폐사 개체의 HSPs 발현율이 생존 개체에 비해 유의하게 높은 발현율을 보였다. 이상 스트레스 표지 값의 분석 결과를 종합할 때, 교잡계들이 순계에 비해 스트레스 저항성이 높은 것으로 판단되고, 더불어 W, Y와 같은 경량종 계통의 교잡계들이 외적 스트레스에 강한 반면, G, H, F와 같은 고체중 계통의 교잡계들은 스트레스에 민감한 것으로 사료된다.
Low temperature is one of the major environmental factors that affect productivity including reduced growth and budding of vines, and changes of metabolic processes in grape (Vitis spp.). To screen the specific expression of abiotic stress-related genes against cold treatment in 'Kyoho' and 'Campbell Early' grapevines, expression of various defense-related genes was investigated by RT-PCR and real-time PCR. Among the 67 genes analyzed by RT-PCR and real-time PCR, 17 and 16 types of cDNA were up-regulated, while 5 and 6 types were down-regulated in cold-treated 'Kyoho' and 'Campbell Early' grapevines, respectively. Genes encoding carotene (Cart3564 and Cart4472), chalcone isomerase (CHI), cytochrome P450 (CYP), flavonol synthase (FLS), endo-${\beta}$-glucanase precursor (Glu), glutathione peroxidase (GPX), glutathione-S-transferase (GST), leucine-rich repeats (LRR), manganese superoxide dismutase (Mn-SOD), phenylalanine ammonia lyase (PAL), polygalacturonase-inhibiting protein (PGIP), proline rich protein 2 (PRP2), small heat shock protein (sHSP), temperature induced lipocalin (TIL), and thaumatin-like protein (TLP) were up-regulated, while those encoding CBF like transcription factor (CBF1), chitinase-like protein (CLP), cold induced protein (CIP), glycerol-3-phosphate acyltransferase (GPAT), and mitogen-activated protein kinase (MAPK) were down-regulated by low temperature treatment in both in 'Kyoho' and 'Campbell Early'.
This study analyzed change of proteins in granulosa cells during the porcine follicuar development by proteomics techniques. Granulosa cells of the follicles, of which the diameter is $2{\sim}4\;mm$ and $6{\sim}10\;mm$, were collected from ovary of slaughtered pig that each follicle of diameter $1{\sim}4\;mm$ and $6{\sim}10\;mm$. We extracted glanulosa cell proteins by M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent. Proteins were refined by clean-up kit and quantified by Bradford method until total protein was $200{\mu}l$. Immobilized pH gradient(IPG) strip used 18 cm, $3{\sim}10\;NL$. SDS-PAGE used 10% acrylamide gel. After silver staining, Melanie 7 and naked eye test were used for spot analyzation. Increasing proteins in glanulosa cell of $6{\sim}10\;mm$ follicle were 7 spots. This spots were analyzed by MALDI-TOF MS and searched on NCBInr. In results, 7 spots were similar to zinc/ling finger protein 3 precursor (RING finger protein 203), angiomotin, heat shock 60 kDa protein 1 (chaperonin) isoform 1 (HSP60), similar to transducin-like enhancer protein 1 (TLE 1), SH3 and PX domains 2A (SH3PXD2A). Those proteins were related with transfer between cells. Increase of proteins has an effect on follicular development.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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