면역크로마토그래피 진단방법을 이용하는 B형간염 스크리닝 kit를 개발하기 위하여 두가지의 항체를 이용하였다. 표식자항체로 사용된 것은 단세포군항체 anti-HBs이고 포획항체는 goat anti-HBs 인데 포획항체는 니트로셀룰로즈 막에 고정되고 표식자항체는 금 입자에 결합된다. 혈청 검체를 well에 가하면 유리섬유 표면에 건조상태로 침착되어 있던 conjugate가 활성화되어 검체중의 HBsAg와 결합한다. 검체를 가한 지 5분 후 검사결과가 나타나는데 HBsAg와 conjugate가 결합된 복합체가 니트로셀롤로즈 막의 하단부에 붉은 색 선으로 나타난다. 본 kit의 검출한계는 표준 HBs-Ag 용액을 사용하여 시험하였을 때 2 ng/ml이었다.
만삭 임부 및 신생아에서의 B형간염 감염실태를 알아보기 위하여 1986년 1월 1일부터 1987년 6월 30일까지 영남대학교 의과대학 부속병원 산부인과에서 분만을 위해 입원한 임부 2,032명중 1,276명에 대하여 HBsAg 혈증 여부을 검사하고 혈청 HBsAg 양성으로 확인된 임부 74명중 66명과 그 신생아에서 B형간염 바이러스 표식자 검사와 함께 SGOT 및 SGPT를 측정한 결과 다음과 같은 성적을 얻었다. 1. 만삭 임부의 혈청 HBsAg 양성율은 4.7%(53/1,279) 이었다. 2. HBsAg 혈증 임부의 신생아에서의 혈청 HBsAg과 anti-HBs 양성율은 각각 12.1%(8/66)와 9.1%(6/66)이었다. 3. HBsAg 혈증 만삭 임부에서의 혈청 anti-HBc, HBeAg, 및 anti-HBe 양성율은 각각 94.0%(62/66), 45.5%(30/66), 및 50%(33/66)이었으며, 혈청 anti-HBc, HBeAg, 및 anti-HBe의 모체 - 신생아 전파율은 각각 85.5%(53/62), 90%(27/30), 및 87.9%(29/33)이었다. 혈청 anti-HBc와 anti-HBe가 신생아에서만 검출된 경우는 각각 1예와 2예가 있었으며 anti-HBe가 검출된 신생아 2명중 1예에서만 혈청 anti-HBs도 동시에 검출되었다. 4. HBsAg 혈증 만삭 임부에서 모체가 혈청 HBeAg를 보유한 경우와 혈청 anti-HBe를 보유한 경우의 신생아 혈청 HBsAg 양성율은 각각 13.3%(4/30)와 9.1%(3/33)이었으며, 모체에서 혈청 HBeAg과 anti-HBe가 모두 검출되지 않은 경우, 신생아 혈청 HBsAg 양성율은 33.3%(1/3)이었다. 이상의 검사성적으로 미루어 한국인 임부에서도 임신말기에 B형간염 바이러스 표식자검사가 routine screening으로 시행되어야 할 것으로 생각되었으며, B형간염 바이러스의 산전 태반을 통한 신생아 전파율이 본 연구에서는 24.2%로 추정되었다.
The purpose of this study was to investigate the incidence rate of hepatitis B in the military service and to examine the effect of the asymptomatic hepatitis B surface antigen(HBsAG) carries on the incidence of hepatitis B. The subject were 223,270 men who were conscripted to the Korean Army from 1991 to 1994. According to the conscripted year, four conscription cohort were constructed. At the screening examination for military service no test for hepatitis B were performed in 1991 and 1992. In 1993, a screening test for hepatitis B were performed and those who were confirmed as HBsAg positive o. showed high titers $(\geqq100IU)$ of nm glutamic-pyruvic transaminase(SGPT) were excluded from conscription. In 1994, the criteria for conscription was changed and those who were HBsAg positive were not excluded from conscription. Only those who showed $\geq$ SGPT 100IU were excluded. The main results were as follows ; 1. The positive rate of HBsAg is 5.5% in the conscripted men. 2. The incidence rates of the hepatitis B in 1991 and 1992 conscription cohort were 9.96 and 8.10 per ten thousand person-year, respectively. The incidence rate of the hepatitis B was 1.34 per ten thousand person-year in 1993 conscription cohort which was confirmed as HBsAg negative at the screning test, and 7.41 per ten thousand person-year in 1994 conscription cohort which included the HBsAg positive. 3. The incidence rate of hepatitis B was 99.98 per ten thousand person-year in HBsAg positive group and 2.25 per ten thousand person-year in HBsAg negative group. The incidence rate of the group with high SGPT and HBsAg positive was 255 times higher than that of normal population. 4. The incidence of hepatitis B in HBsAg negative group did not increase even though the probability of personal contact with HBsAg positive had been increased. from the above results, the men who have high SGPT with HBsAg positive should be excluded from military service, and it can not be said that asymptomatic HBsAg carriers influence on the hepatitis B incidence among the HBsAg negative through personal contact.
B형간염표면 항원 및 항체(HBsAg와 anti-HBs)에 대한 검사 방법으로 화학발광면역검사법(CIA)을 포함한 면역검사법을 주로 사용하고 있으나 최근 간편한 면역크로마토그래피법(ICA)의 사용이 늘고 있는 추세이다. 본 연구에서는 CIA법을 이용한 정량검사법과 비교하여 신속검사인 ICA법의 민감도를 평가하고자 하였다. 대학병원에 간염검사를 의뢰한 검체 중 CIA법에서 양성 및 음성으로 나온 120 검체를 선정하여 ICA법으로 분석하였다. ICA법과 CIA법의 일치율은 항원 97%와 항체 90%로 나타났다. 항원검사의 ICA법 민감도, 특이도, 양성예측도, 음성예측도는 각각 97%, 100%, 100% 및 96.8%로 나타났으며, 항체검사는 각각 90%, 93.3%, 93.1% 및 90.3%로 나타났다. ICA법을 임상에서 사용 시 결과판독에 주의가 필요하며, 낮은 역가의 경우 검출되지 않는 제한점이 있으므로 예민도가 높은 다른 검사법을 이용하여 이중검사를 시행해야 할 것으로 사료된다.
This study of the positive rates of HBsAg, anti-HBs among 119 Emergency Medical Technicians and Rescuers who were working in Pohang, Kyoung-Buk, Korea was performed from March to June 1997 according to three methods of EIA, RPHA and PHA. The number of samples were 201. The results were as follows; The overall positive rate of HBs Ag by EIA and RPHA methods were 4.98%, 5.47%, the overall positive rate of anti-HBs by EIA and PHA methods were 58.71%, 63.68%. In detecting of HBs Ag, concurrence rate, sensitivity, specificity and predictability of PHA to EIA were 99.5%, 90.9%, 100% and 99.75% respectively. In detecting of anti-HBs, concurrence rate, sensitivity, specificity and predictability of PHA to EIA were 91.04%, 89%, 94.5% and 89.87% respectively. Based on this study, there were no significant diffrences in the positive rates of HBsAg and Anti-HBs in 119 Emergency Medical Technicians and Rescurers in Pohang, Korea as compared with the general population according to other studies. In terms of concurrence rate, sensitivity, specificity and the costs of RPHA with EIA for detecting HBsAg, RPHA is more cost effective than EIA for mass screening of HBsAg detection. Also, In terms of concurrence rate, sensitivity and specificity of PHA with EIA, PHA is more cost effective and less problems of procedure than the EIA for mass screening of Anti-HBs detection.
To determine relationships of supposed risk factors to positives for HBsAg and Anti-HBs and also relationships of subjective symptoms to positives for HBsAg and Anti-HBs, study of 658 people working in the hospital, university, bank and other office was performed. Positive rate for HBsAg was about 7.9% and positive rate for Anti-HBs was about 20.0%. Odds ratio of HBsAg was high and significant in individuals who are married and who have previous hepatitis B(P<0.001), medical personnel in family, more than 4 people in a room(0.01
B형간염 바이러스 연구에 관한 최근의 주제는 혈중 B형간염 표면항원농도(HBsAg)를 예후 판정의 지표로 활용하는 것이다, 본 연구에서는 B형간염에 대한 자가진단을 목적으로 하여 컴퓨 터 상 분석 기법을 사용하는 HBsAg에 대한 정량적 면역크로마 토그래피 측정법을 개발하였다. 본 방법을 사용하였을 때 측정 된 integrated optical density(IOD)은 2~200 ng/mL의 범위 내에 서 표준 HBsAg 농도의 log값에 비례하여 증가하였데, ELISA 측정법은 0.1~100 ng/mL의 범위 내에서 표준 HBsAg 농도의 log값에 비례하여 증가하였다. 3개의 혈청 겸제를 가지고 두 가 지의 측정법으로 각각 시험하여 표준곡선에 대입하였을 때 동일 한 농도를 나타내 었는데 그 값이 각각 9,000, 7,000, 4,000 ng/mL 이었다. 또한 컴퓨터 상 분석 기법을 사용하는 HBsAg에 대한 정량적 면역크로마토그래피 측정법으로 동일 겸체를 5회 반복 시험하였을 때 측정된 IOD값이 재현성이 있었으며, 변이계수가 1.38 ~ 6.30% 이내였다.
Many studies have provided evidences that hepatitis B surface antigen (HBsAg) including preS region could be an ideal candidate for a new hepatitis B virus (HBV) vaccine with higher efficacy. We established CHO cell lines, IY-CHO-2 and IY-CHO-11 expressing high levels of HBsAg containing preS2 and S protein by stable transfection method. These cell lines expressed the correct size (about 1 kb in length) of HBsAg mRNA as expected. The purified protein from the culture supernatants of the clones showed the same sizes as those expressed in native hepatitis B virus (24 kDa, 27 kDa, 34 kDa and 36 kDa). Antibody productivity of CHO-derived HBsAg protein at lower dose challenge was higher than the protein containing S region alone expressed in yeast system. These results indicate that CHO-derived HBsAg protein containing preS2 and S region can be effectively used for a better immune response as a HBV vaccine.
목적 : 1998년 한국인 성인에서의 혈청 HBsAg의 양성률을 추정하는 것을 일차적 목적으로 하며, HBsAg 양성률의 연령별로 분포, 지역적 차이, 과거 간질환력, 만성간질환 가족력 및 예방접종과의 관련성을 파악하며 또한 양성자를 6개월간 추적후 재검사 하여 B형 간염의 만성보균율을 파악하고자 하는 것을 이차적 목적으로 하였다. 방법 : 1998년 전국 10개 지역에서 의료보험관리공단의 정기건강검진 수진자를 대상으로 하여 HBsAg의 혈청유병률을 조사하였다. HBsAg 양성인 사람들을 대상으로 6개월 이상 추적조사하여 B형간염 만성보균율을 파악하였다. 총 1,816명에 대한 혈청과 설문서가 수집되었다. HBsAg는 RIA로 측정하였다. 결과 : HBsAg의 혈청유병률은 5.5%(95% CI-4.5-6.6)였으며 남자에서 7.4%(95% CI=5.8-9.4), 여자에서 3.6%(95% CI=2.5-5.0)로 나타났다. 급성간질환 과거력과 만성간질환 가족력을 HBsAg 혈청검사결과와 비교한 결과 유의한 관련성이 있는 것으로 나타났다. HBsAg 양성자에서 6개월 후에 음성으로 전환한 사람은 3.2%(95% CI=0.1-16.7)였으며 따라서 B형간염의 만성보균율은 5.3%(95% CI=3.7-6.6)로 추정되었다. 결론 : 본 연구결과에서는 HBsAg의 양성률이 1980년대의 연구결과들에 비하여 비교적 낮게 추정되었으며 이는 특히 여성과 젊은 연령층에서 두드러지게 나타났다. 그러나 우리나라에서의 간암 및 만성간질환의 공중보건학적 중요성을 고려하면 지속적인 간염발생의 예방대책이 필요하다고 할 수 있다.
Kim, Gye-Won;Hong, Sung-Youl;Shin, Soon-Cheon;Lee, Sung-Hee;Kim, Won-Bae
Archives of Pharmacal Research
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제10권1호
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pp.18-24
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1987
Mouse monocolonal antibodies to Hepatitis B surface antien (HBsAg) were prepared and their functional capabilities tested by the method of solid phase enzyme linked immuno sorbent assay (ELISA). HBsAg binding studies inicated that one monoclonal antibody 6E-1-1 bound more HBsAg at a faster rate than the other monoclonal antibodies. Also, for the binding inhibition studies with the selected monoclonal antibody 6E-1-1, one monoclonal antibody 8D-3-6 didn't exhibit binding inhibition for HBsAg. Then, a simultaneous ELISA method was developed for the immunodiagnosis of HBsAg. Different combinations of two monoclonal antibodies as solid phase and horseradish peroxidase (HRPO) labeled phase were studied. The combination of monoclonal antibody of higher affinity constant (6E-1-1) immobilized in a solid phase and monoclonal antibody of lower affinity constant (8D-3-6) as a HRPO laeled phase was more sensitive when two monoclonal antibodies of different affinity constants for HBsAg were prepared.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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