To understand the effects of lower pH levels due to elevated $CO_2$ and salinity, we designed and constructed a pH-control system that included automatic $CO_2$ infusion and measured the hatching rate of a crustacean model species, Artemia franciscana. The pH-control system was cost-effective and capable of performing animal tests in which pH fluctuated around $8.0{\pm}0.1$, with the temperature around $27{\pm}0.5^{\circ}C$. Hatching rate was observed under four different pH levels (7.0, 7.3, 7.6, and untreated control) combined with three salinity ranges (15, 25, and 35 ppt). The results demonstrated that lower pH levels led to decreased hatching rates regardless of salinity, and the minimum hatching rate was detected at pH 7.0 compared to the control (pH $8.0{\pm}0.1$), supporting the idea that OA has adverse effects on hatching rates and increases the risk of juveniles being introduced in the ecosystem. In contrast, salinity changes exhibited no synergistic effects with pH and had independent effects.
JI, Hwan-Sung;LEE, Dong Woo;CHOI, Jung Hwa;CHOI, Kwang Ho
Journal of the Korean Society of Fisheries and Ocean Technology
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v.51
no.3
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pp.370-374
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2015
Pacific herring Clupea pallasii eggs were attached to the gill net in Korean coastal waters off Busan. To conservation and management the eggs attached to the gill net, we followed the natural hatching in coastal waters from five days after fertilization to the hatching finished, where the temperature was $9^{\circ}C$. The diameter of fertilized eggs was 1.24-1.55 mm (n= 50), and had a segmented pale yellow yolk, no oil globule. Natural hatching had started by 10 days after fertilization. Mass hatching occurred around 11-12 days after fertilization, most of eggs separated from the gill net. Therefore, when the Pacific herring eggs attached in gill net, should be natural hatching-induced in coastal waters during 12-14 days.
This study was performed to investigate the effect of laser-assisted hole in the zona pellucida (ZP) of frozen-thawed ICR mouse embryos on the process of hatching that is critical for expanded blastocysts to implant into endometrium, Vitrification medium, composed of ethylene glycol and sucrose supplemented with 7.5% (w/v) PVP, was used to freeze $2{\sim}4$ cell stage embryos recovered from oviducts of superovulated and mated female mice before storing them in $LN_2$. Right after thawing them, a laser beam was shot to make a hole in ZP followed by culturing in KSOM for $96{\sim}120\;hr$ and examining development to blastocyst and hatching every 12 hr. Laser-treated embryos showed significantly higher hatching rate compared to control (92.9% vs. 22.1%, p<0.05). From around Day 4, blastocysts developed from laser-treated embryos started hatching while the blastocysts of control group failed to hatch showing a lot of shrinkage. This study shows that a laser-assisted hole in ZP improves the hatching rate of blastocysts developed from frozen-thawed, in vitro cultured ICR mouse embryos.
The acid treatment hatching method has been used practically for about 60 years and a number of investigators have studied about the artificial hatching for silkworm e99s, but the basic theory about the acid treatment hatching is not clarified yet. It is no exaggeration to say that the accidents of non hatching is continued ceaselessly in the silkworm egg by hydrochloric acid treatment. It is believed that the accident is due to the adulterants in HCl lather than inattention of acid treatment. Therefore, the authors mixed hydrochloric acid (analytical grade) with or added it to chemical ingredients which are possible to be included in the process of hydrochloric acid production, and treated it to summer and fall silkworm egg. The metalic adulterants such as iron, mercury, lead and arsenic are appeared not to be worried, but damage of SO$_3$ and free chlorine is seemed to lie considerable. Therefore, before acid treatment for hatching hydrochloric acid was warmed to 50$^{\circ}C$ with shaking to evaporate several injurious gases, by whick the damage due to use of hydrochloric acid for acid treatment hatching is prevented considerably. In conclusion, it is recommended to pretest bioassay with every HCl samples before artificial hatching of silkworm egg.
Lee, Young Seok;Park, Min Jung;Park, Sea Hee;Koo, Ja Seong;Moon, Hwa Sook;Joo, Bo Sun
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.42
no.2
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pp.51-57
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2015
Objective: This study aimed to examine the effect of laser-assisted zona thinning (LAZT) at one or four-points on the blastocyst formation and hatching process in mice with respect to female age. Methods: Eight-cell or morula embryos collected from superovulated C57BL female mice with different ages (6-11 and 28-31 weeks) were treated with LAZT at one-point (LAZT1) or four-points (LAZT4). The zona pellucida was thinned to more than 70% of its initial thickness by making two holes of $15-20{\mu}m$. Results: In the young mice, LAZT resulted in a significant increase in early hatching and hatching rates compared to the control group (p<0.05). However, in the old mice, LAZT significantly increased blastocyst formation as well as early hatching and hatching compared to the controls (p<0.05). These effects were more remarkable in LAZT4 than in LAZT1 and in aged mice than in young ones. Conclusion: These results show that multi-point LAZT leads to a significant improvement of blastocyst formation and hatching in mice compared to controls.
The effect of temperature ($24\~36^{\circ}C$ and salinities ($5\~30$ ppt) on hatching rate of the resting egg of the Korean rotifer, Brachionus plicatilis was investigated. The highest hatching rate of the resting egg was $85.7\%$ at $28^{\circ}C$ and 15 ppt. The hatching rates of the resting eggs with salinities were not significant at $326{\circ}C$ and $36^{\circ}C$. Hatching was faster at higher temperature. The resting eggs stored at $5^{\circ}C$ in dark hatched simultaneously within two days, however, those at $28^{\circ}C$ in dark hatched intermittently within 14 days. But, final hatching rate of the resting egg at $28^{\circ}C$ was higher at $28^{\circ}C$ than that at $5^{\circ}C$. With regard to drying temperature and time of resting egg, the resting egg dried at $30^{\circ}C$ for 1 hour showed the highest hatching rate ($46.4\%$).
A large volume of hatching jar was tested whether it is an effective to hatch fertilized eggs of Pacific cod. The volume of hatching jar did not show any significant differences in survival of the fertilized eggs; 48.3% for the jar of 15 L and 50.4% for that of 42 L. Survival rate of the fertilized eggs in a large volume of hatching jar ranged from 40.0 to 71.2%, which was higher than those of conventional small circular tank. A higher survival could be achieved even though stocking density of fertilized eggs was as high as 5,000 mL/jar. Consequently, the tested hatching jar allowed for incubation of a greater number of eggs with higher survival rate in a much smaller space. In addition, it reduces costs and manpower, and requires a relatively small amount of water per individual unit (6,700 mL/min), and provides a way to incubate multiple rearing groups in a quarantine environment.
The effects of prostaglandins in hatching and implantation have been studied but the results were various, and those are not well known by the embryonic stage. The present study examined the effects of prostaglandin $E_2$(PG $E_2$) and prostaglandin $F_2$$_{\alpha}$ (PG $F_2$$_{\alpha}$) on the expansion and hatching of mouse embryos by embryonic stage. Also we tried to measure the concentration of prostaglandins of morula, expanded, and hatching embryos. In early morula stage embryos, high concentration of PG $E_2$(>100$\mu$M) showed cytotoxicity but PG $F_2$$_{\alpha}$ did not. The hatching was inhibited all groups but not gave negative effects on expansion. In 84 hr and 96 hr stage embryos, the hatching rate was decreased at all treatment groups but not inhibited the expansion. When combine prostaglandin with indomethacin, the hatching rate was increased significantly compared to the prostaglandin-treated groups, and as lower and lower the PG $E_2$ concentration, the hatching rate increased to the control level. The embryonic synthesis of PG $E_2$ increased dramatically but that of PG $F_2$$_{\alpha}$ increased gradually. PG $E_2$ showed cytotoxicity at early stage embryos much than late stage embryos, but PG $F_2$$_{\alpha}$ did not. Hatching was inhibited by the high PG $F_2$$_{\alpha}$ concentration. It is suggested that the inhibition of hatching might be at resulted from cytotoxicity of PG $E_2$ on embryo. However, it is thought that the mechanisms of inhibition of hatching are different between PG $E_2$ and PG $F_2$$_{\alpha}$. In conclusion, it can be suggested that PG $E_2$ and PG $F_2$$_{\alpha}$ concerned with the expansion and hatching, and their effects on hatching were different by the embryonic stage.$/ concerned with the expansion and hatching, and their effects on hatching were different by the embryonic stage.
Exposure experiments during the egg development were conducted to assess the influences of 5 different concentrations (0, 25, 50, 75 and 100%) of water-soluble fraction (WSF) of Kuwait crude oil on the eggs and larvae of black seabream (Acanthopagrus schlegeli), red seabream (Pagrus major) and olive flounder (Paralichthys olivaceus). All experiments were triplicated. Hatching time and hatching rate were examined on the eggs. The median lethal time ($LT_{50}$), morphological abnormality and swimming activity (swimming frequency and speed) of larvae were also investigated. The time and rate of egg hatching were not significantly influenced by WSF on the eggs of the fishes. The larvae exposed to WSF during the egg development were also not significantly influenced on the $LT_{50}$ and swimming activity. But the higher morphological abnormalities of notochord were observed from the larvae in 100% WSF exposure.
There are many reports concerning to the restoring times, and the range of times are very wide. Author restored the artificial hatching silkworm eggs 1 ice pit (5$^{\circ}C$) two different method; one restored in directly after protected following different times 24 hours, 48 hours and 72 hours of room temperature (24$^{\circ}C$), another protected above suggested times and room temperature then indirectly keeping medium temperature (1$0^{\circ}C$)6 hours. It was incubated in $25^{\circ}C$ temperature after about 20 days of restoring. Pure line and hybrid silk warm eggs are no difference hatching ratio in 72 hours blocks by restoring. Especially good hatching ratio obtained by the medium temperature treatment rather than directly restoring.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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