This study was carried out to examine the action mechanism of Chamaecyparis obtusa oil (CO) on hair growth in C57BL/6 mice. For alkaline phosphatase (ALP) and ${\gamma}$-glutamyl transpeptidase (${\gamma}$-GT) activities in the skin tissue, at week 4, the 3% minoxidil (MXD) and 3% CO treatment groups showed an ALP activity that was significantly higher by 85% (p < 0.001) and 48% (p < 0.05) and an ${\gamma}$-GT activity that was significantly higher by 294% (p < 0.01) and 254% (p < 0.05) respectively, as compared to the saline (SA) treatment group. For insulin-like growth factor-1 (IGF-1) mRNA expression in the skin tissue, at week 4, the MXD and CO groups showed a significantly higher expression by 204% (p < 0.05) and 426% (p < 0.01) respectively, as compared to the SA group. At week 4, vascular endothelial growth factor (VEGF) expression in the MXD and CO groups showed a significantly higher expression by 74% and 96% (p < 0.05) respectively, however, epidermal growth factor (EGF) expression in the MXD and CO groups showed a significantly lower expression by 66% and 61% (p < 0.05) respectively, as compared to the SA group. Stem cell factor (SCF) expression in the MXD and CO groups was observed by immunohis-tochemistry as significant in a part of the bulge around the hair follicle and in a part of the basal layer of the epidermis. Taking all the results together, on the basis of effects on ALP and ${\gamma}$-GT activity, and the expression of IGF-1, VEGF and SCF, which are related to the promotion of hair growth, it can be concluded that CO induced a proliferation and division of hair follicle cells and maintained the anagen phase. Because EGF expression was decreased significantly, CO could delay the transition to the catagen phase.
코르티코트로핀분비인자(Corticotropin-releasing factor)는 스트레스 반응에 관여하는 호르몬으로, 최근 스트레스가 탈모와 같은 피부질환에 영향을 미친다는 보고들이 많아지고 있다. 보고에 따르면, 사람 모낭 배양에서 코르티코트로핀분비인자는 길이생장을 억제하며, 모낭의 조기퇴행을 유도하고 모기질각질형성세포(hair matrix keratinocyte)의 세포사멸을 촉진시킨다. 본 연구에서는 코르티코트로핀분비인자가 모발성장과 모주기조절에 핵심적으로 역할하는 모유두세포에 미치는 영향에 대해 알아보고자 했다. 시상하부-뇌하수체-부신축의 주요 스트레스호르몬들인 코르티코트로핀분비인자, 부신피질자극호르몬, 그리고 코르티솔을 사람 모유두세포에 처리하였다. 흥미롭게도, 코르티코트로핀분비인자가 모발성장과 관련된 사이토카인(KGF, Wnt5a, $TGF{\beta}-2$, Nexin)의 발현을 변화시키는 것을 관찰하였으며, 세포 내 cAMP의 수준을 증가시켰고, 수용체의 발현을 억제시켰다. 이러한 변화는 수용체의 길항제인 antalarmin과 astressin2B, 또는 PKA 억제제의 전처리로 인해 막을 수 있었다. 코르티코트로핀분비인자는 cAMP/PKA경로를 통해 POMC의 발현을 유도하는데, 사람 모유두세포에서도 이 호르몬의 처리가 POMC mRNA의 발현을 증가시키는 것을 확인할 수 있었으나 부신피질자극호르몬의 변화는 western blot으로는 확인할 수 없었다. 이러한 결과들을 바탕으로, 코르티코트로핀분비인자가 그 수용체를 통해 사람 모유두세포 내 모발성장 관련 사이토카인의 발현을 조절함을 확인하였으며, 이는 코르티코트로핀분비인자의 수용체 길항제가 스트레스성 탈모환자를 위한 치료제 혹은 화장품 소재로써 활용될 수 있음을 보여준다.
탈모방지 및 발모효과를 가지는 소재를 개발하기 위해 한의학에서 전통적으로 사용되는 23가지 한방소재를 선정하여 한방복합처방단을 개발하였다. 한방복합처방단을 구성하는 한방소재들은 예로부터 전통적으로 발모 및 탈모방지, 흰머리방지, 염증 치료 및 혈액순환개선 효과를 가진 것으로 알려져 있는 당귀, 보골지, 측백엽, 한련초, 구기자, 복분자, 상백피, 숙지황, 여정실, 적하수오, 흑지마, 고삼, 백지, 익모초, 단삼, 도인, 몰약, 감국, 유향, 인삼, 천궁, 합환피, 현호색 등이다. 또한, 한방복합처방단의 발모효과를 확인하기 위해 in vitro와 in vivo 평가모델을 이용하여 모발성장 및 촉진에 미치는 영향을 실험하였다. In vitro 상에서는 모유두세포, 각질형성세포 및 섬유아세포의 증식을 확인하였다. 또한, 흰머리방지 효과와 관련하여 멜라노마 세포에서의 멜라닌 합성능력을 확인하였다. 한방복합처방단의 in vitro 상에서의 육모효과는 C57BL/6 마우스를 이용한 in vivo 상에서도 확인하였다. 연구 결과 한방복합처방단은 $50{\mu}g/mL$의 농도에서 모유두 세포의 증식을 175 %까지, 섬유아세포인 NIH3T3 세포의 증식은 120 %까지 증가시켰으며, $20{\mu}g/mL$의 농도에서 각질형성세포인 HaCaT 세포의 증식을 133 %까지 증가시켰다. 멜라닌 합성의 경우, $50{\mu}g/mL$의 농도에서 154 %까지 증가시켰다. 또한, C57BL/6 마우스를 이용한 육모효과에 있어서는 한방복합 처방단 처리 4주 후 98 % 이상의 육모효과를 나타내는 것을 확인하였다. 이상의 결과로 볼 때 본 연구에서 개발한 한방복합처방단은 모발의 성장 촉진에 유용하게 활용될 수 있는 처방으로 사료된다.
We made an experiment if the extracts of DanGuiBoHyulTangGami-Bang(DBTG) and 15 kinds of the medical herbs used the materials of DBTG were effective on the hair formation palpation and the falling out of hair, and came to the following conclusions. 1. The extracts of Paeonia lactiflora, Cuscuta chinensis and Angelica tenuissima of DBTG consisted of the 15 kinds of the medical herbs kept the activity of 5${\alpha}$-reductase type Ⅱ from being active 75.3$\%$, 63.8$\%$. 75.5$\%$. 2. The hair growth index, 1.6(control group 0.8) of the extracts of DBTG bas a little effect on the hair growth palpation and that of Rubus coreanus 1.8(control group 0.4) was the most effective one of the medical herbs, and Paeonia lactiflora 2.3(control group 1.7) and Vitex rotundifolia 2.3(control group 1.5) showed the effect on hair formation palpation. 3. The hair growth period couldn't be extended by DBTG in this experimental stage. 4. The 15 kinds of constitution medicines of DBTG didn't have effects in dermal papilla cells DNA increase, IGF- I, KGF, HGF the revelation of a gene heredity, the protein synthesis of the hair follicle tissues. 5. All of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG didn't have the antibacterial activity in Paper disc rule. 6. The results from the test of a radical scavenging activity of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG showed that the extracts of Paeoria lactiflora, Scutellaria baicalensis, Rubus coreanus have the superior antioxidant activity in the concentration of 0.01$\%$ and 0.001$\%$ 7. In the formation controlled experiment, Vitex rotundifolia (70.6$\%$), Scutellaria baicalensis (47.1$\%$, Saposhnikovia (44.8$\%$) of the 15 kinds of constitution medicines of DBTG in the 50㎍/㎖ concentration controled NO forming and Vitex rotundifolia (12.7$\%$) controled NO forming in the 5㎍/㎖ concentration in order. 8. MTT(lC/50) of the extracts of Rehmannia glutinosa, Paeonia lactiflora, Scutellaria baicalensis, Lycium chinense, Rubus coreanus of the 15 kinds of constitution medicines of DBIG was more than 500㎍/㎖ and had the least cell virulence.
포장방법이 칼치 Chunk의 저장성에 미치는 영향을 알아보기 위하여 시료를 염장 혹은 무염처리 상태로 진공포장, 탈산소제 포장 및 대조구로 하여 $0^{\circ}C$ 또는 $5^{\circ}C$에 저장하면서 실험한 결과는 다음과 같았다. 염장 칼치의 적정 염농도를 4% 내외로 하였을때 적정 식염수의 농도는 15%였고 염장기간은 24시간 이었다. 염장 혹은 무염 처리구의 VBN, TMA, 생균수는 저장 기간이 길어짐에 따라 증가하는 경향이었으나 TBA 값은 $5{\sim}15$일 경에 최고값에 달한후 감소하였다. 칼치 Chunk의 품질 유효지표 성분은 VBN 이었으며 그 함량의 상한선은 29mg%였다. 칼치 Chunk의 간이 품질 평가방법을 도출하였다. $0^{\circ}C$에 저장한 무염처리 칼치의 진공포장, 탈산소제 포장 및 대조구의 경우, 저장 가능기간은 14, 10 및 6일 이었으며, $5^{\circ}C$의 경우는 7, 6 및 4일 이었다. 또한 염장한 칼치를 $5^{\circ}C$에 저장할 경우는 각각 14, 13 및 10일 이었다.
Cell-based therapy is a promising approach in the field of regenerative medicine. As cells are formed into spheroids, their survival, functions, and engraftment in the transplanted site are significantly improved compared to single cell transplantation. To improve the therapeutic effect of cell spheroids even further, various biomaterials (e.g., nano- or microparticles, fibers, and hydrogels) have been developed for spheroid engineering. These biomaterials not only can control the overall spheroid formation (e.g., size, shape, aggregation speed, and degree of compaction), but also can regulate cell-to-cell and cell-to-matrix interactions in spheroids. Therefore, cell spheroids in synergy with biomaterials have recently emerged for cell-based regenerative therapy. Biomaterials-assisted spheroid engineering has been extensively studied for regeneration of bone or/and cartilage defects, critical limb ischemia, and myocardial infarction. Furthermore, it has been expanded to pancreas islets and hair follicle transplantation. This paper comprehensively reviews biomaterials-assisted spheroid engineering for regenerative therapy.
Objectives: Recently, thread-embedding therapy (TET) has been widely applied in Korean medicine for cosmetic purposes such as reducing skin wrinkles. An inserted thread was reported to have induced continuous stimulation, followed by support for connective tissue regeneration. However, the potential role of TET in hair-growth has not yet been reported. Methods: We designed this study to evaluate whether TET has a hair-growth-promoting effect. C57 black 6 (C57BL/6) mice were divided into three groups: normal saline-treated, minoxidil-treated, and thread-embedded groups. Normal saline or 5% minoxidil was topically sprayed on the dorsal skin of the mice once a day for 16 days. Medical threads were embedded into the dorsal skin of the mice in a single application. Hair growth activity was evaluated by using dermoscopic and microscopic observations. Sections of the dorsal skin were stained with hematoxylin and eosin. Expressions of bromodeoxyuridine (BrdU), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), fibroblast growth factor-7 (FGF-7), and fibroblast growth factor-5 (FGF-5) were detected by using immunohistochemical staining. A reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) analysis was adopted to measure the messenger RNA (mRNA) expressions of FGF-7 and FGF-5. Results: TET enhanced anagen development in the hair follicles of C57BL/6 mice. The expressions of BrdU and PCNA, both of which imply active cellular proliferation, were increased by using TET. Moreover, TET increased the expression of FGF-7, an anagen-inducing growth factor, while decreasing the expression of FGF-5, an anagen-cessation growth factor, both at the protein and the mRNA levels. Conclusion: TET enhanced hair re-growth in C57BL/6 mice. TET regulated the expressions of anagen-associated growth factors and activated the proliferation of hair follicular cells in depilated skin lesions. Considering its long-lasting effect, TET may be a good alternative therapeutic for the treatment of alopecia.
백발화는 자외선, melanin 세포 자극 호르몬(α-MSH), 줄기 세포 인자 성장인자(SCF), Wnt 및 endothelin-1 (ET-1)에 의하여 활성화되는 melanogenesis를 조절하는 신호 전달 경로가 제대로 작동하지 못하여 나타난 결과이다. 백발화를 예방하기 위하여, tyrosinase, tyrosine hydroxylase, tyrosinase-related protein (TRP)-1, TRP-2 및 microphthalmia-associated transcription factor (MITF)에 의하여 조절되는 melanogenesis를 자극하는 효과적인 합성 및 천연 화합물이 있다. 이러한 화합물은 백발화 예방을 위한 잠재성을 지니고 있다. 이 기사는 melanogenesis와 백발화와 관련된 신호 전달 경로에서 최근의 진전뿐 만 아니라 백발화의 문제를 해결하기 위한 핵심적인 전략에 대해 기술한다. 특히, 이글에서는 catalase 및 methionine sulfoxide reductase를 조절하는 항산화제, resveratrol, fisetin, quercetin 및 ginsenoside와 같은 sirtuin (SIRT) 1 activator와 같은 melanin 생성을 촉진하는 잠재적으로 효과적인 치료제에 대하여 설명한다. 또한 estrogen, androgen, progesterone 및 dihydrotestosterone를 포함하는 telomerase 발현 및 activator 뿐만 아니라, corticosteroids, calcineurin restrainer 및 palmitic acid methyl ester와 같은 백반증 억제제에 대하여 논의한다. 더불어 latanoprost, erlotinib, imatinib, tamoxifen, 및 levodopa와 같은 백발화를 억제할 수 있는 화합물에 대해서도 탐구한다. 결론적으로 이 기사는 모발 백발화와 관련된 melanin 생성을 촉진시키는 화합물에 대한 최근의 연구동향을 고찰한다.
Kim, Kyu-Sung;Cho, Byung-Han;Choi, Ho-Seok;Park, Chang-Shin;Jung, Yoon-Gun;Kim, Young-Mo;Jang, Tae-Young
Molecular & Cellular Toxicology
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제4권3호
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pp.177-182
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2008
Caveolin proteins are mediators of cell death or the survival of injured cells, and they are inhibitors of various signaling pathways. The expression of caveolin-, which is involved in the protein kinase A (PKA) signaling pathway, was examined in the differentiated mouse vestibular cell line UB/UE-1 after gentamicin ototoxicity. Caveolae in the vestibular hair cell of healthy guinea pigs were observed through an electron microscope. UB/UE-1 cells were cultured at 95% $CO_2$ with 5% $O_2$ at $33^{\circ}C$ for 48 hours and at 95% $CO_2$ with 5% $O_2$ at $39^{\circ}C$ for 24 hours for differentiation. Cells were treated with 1 mM gentamicin, 0.02 mM H89 (PKA inhibitor), and then incubated for 24 hours. Caveolin-1 expression was examined by western blotting and PKA activity by a $PepTag^{(R)}$ assay. Caveolae were observed in the vestibular hair cells of healthy guinea pigs by electron microscopy. Caveolin-1 was expressed spontaneously in differentiated UB/UE-1 cells and increased after gentamicin treatment. PKA was also over-activated by gentamicin treatment. Both gentamicin-induced caveolin-1 expression and PKA over-activation were inhibited by H89. These results indicate that gentamicin-induced caveolin-1 expression is mediated by the PKA signaling pathway. We conclude that caveolae/ caveolin activity, induced via a PKA signaling pathway, may be one of the mechanisms of gentamicin-induced ototoxicity.
본 연구에서는 탈모방지 토너의 활성 성분인 tocopheryl acetate, salicylic acid 및 niacinamide 성분 중 유용성 성분인 tocopheryl acetate의 피부흡수를 높이기 위한 연구를 진행하였다. Salicylic acid와 niacinamide를 함유함과 동시에 tocopheryl acetate를 투명하게 가용화시키려는 방법으로, 계면활성제가 회합하여 형성되는 micelle의 크기를 증가시킨 swollen micelle 구조를 이용하였다. 제조한 swollen micelle 용액은 3종의 활성 성분을 함유하며 투명한 성상과 안정성을 높이기 위해 계면활성제로 poloxamer 407과 octyldodeceth-16을 사용하였다. 또한 micelle의 크기를 증가시키기 위한 보조계면활성제로서 isostearic acid를 사용하였다. 제조한 swollen micelle의 물리적 특성을 평가하기 위해 실온(25 ℃)에서의 탁도를 측정하였다. Swollen micelle에 함유된 탈모방지 성분 중, tocopheryl acetate의 피부흡수율을 평가하기 위해 Franz diffusion cell method를 이용하였다. 24 h 후 tocopheryl acetate의 경우 대조군보다 6 배 향상된 피부흡수량을 보여주었다. 따라서 본 연구에서 개발한 swollen micelle은 탈모방지 제품 또는 여러 기능성 화장품의 가용화 제형에 응용될 수 있음을 알 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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