키토올리고당의 정량법으로 기존의 비색법과 HPLC방법을 비교 검토하였다. HPLC에 의한 키토올리고당의 정량은 키토올리고당을 D-glucosamine로 분해한 다음, D-glucosamine을 분석하므로서 가능하였다. D-glucosamine를 분석하기 위한 HPLC 분석 조건은 검출기로서 RI detector 그리고 컬럼으로 Bondclone10 $NH_{2}$ column$(330{\times}3.9\;mm,\;10\;micron,\;Phenomenex)$을 사용하고 이동상으로는 acetonitrile : $H_{2}O$(65 : 35)으로 하였다. 키토올리고당의 정량은 비색법 보다 HPLC법이 높은 회수율을 보였으며, 분석시간도 시료당 10분 이내로서 비색법의 4 시간 보다 더 짧았다. 비색법은 키토산 등에 의한 false positive response가 일어났으나 HPLC법은 glucosamine 이외의 다른 성분에 의한 영향을 받지 않았다. 따라서 HPLC에 의한 키토올리고당의 정량은 가능하였으며 기존의 비색법 보다 신속 정확하였다.
Objectives: The purpose of this study was to determine the best method to analyze PAHs at extremely low concentrations. To this end, 16 PAHswere analyzed simultaneously by GC/MS, HPLC/FLD and HPLC/UVD, and the analytical characteristics of HPLC and GC/MS were compared. Methods: This study was conducted by GC/MS and HPLC/FLD/UVD, and evaluated linearity, precision and detection limit. Standard solutions were prepared for 21 samples in the range of $0.00001{\sim}1.0{\mu}g/mL$ and the samples were divided into four groups. All samples were made in three sets and analysis was replicated seven times. Results: Sixteen PAHs could be simultaneously separated by HPLC and GC/MS, and the adequate equipment was HPLC/FLD. The retention times by HPLC were shorter than GC/MS, and HPLC had better separation for most PAHs than GC/MS. The peaks of naphthalene and naphthalene-D8 partially overlapped for GC/MS. HPLC/FLD had a 20-2000 times lower limit of detection than GC/MS and UVD. However FLD was not adequate for analyzing acenaphthylene because it has too low a fluorescence quantum yield to be detected. The precision of HPLC/FLD/UVD and GC/MS showed less than 20% at $0.001{\mu}g/mL$ PAHs and when the concentration was higher, the coefficient of variation was decreased. HPLC/FLD was better for the overall detection of limits. Conclusions: The results indicate that the HPLC/FLD method has good linear range, precision and a detection of limits from $0.00001{\sim}0.0001{\mu}g/mL$ for all 16 PAHs. This study contributes to providing useful data for analysis technology and can be applied to occupational exposure measurement for PAHs in workplaces.
In order to develop a good separation and simultaneous analysis of different sugar in an artificial mixed sugar solution, we analyzed 10 sugar components in an artificial mixed sugar solution composed of fructose, glucose, mannitol, sucrose, maltose, lactose, xylose, xylitol erythritol, and trehalose with using HPLC-ELSD or HPLC-RI. Separation and quantification by HPLC-ELSD was superior to those by HPLC-RI and detection sensitivity by HPLC-ELSD was higher then that by HPLC-RI as micorgram($\mu\textrm{g}$) level. 1. The units of minimal detectable limits were showed $\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and ng/$m\ell$ by the HPLC-RI and HPLC-ELSD, respectively. 2. The condition of ELSD was drift tube temperature $82^{\circ}C$, $N_2$ gas flow rate 2.10 SLPM, and colum oven temperature $30^{\circ}C$, respectively. Isolation and recovery rates of single sugar from the multiple sugar solution was higher at the condition (time: flow rate: D.W.:ACN MeOH, min : $m\ell$/min:v:v:v) of linear gradient elution of mobile phase as 0 : 1.00 : 15 : 85 : 0.1 : 1.00 : 6 : 90 : 4, 17 : 1.00 : 10 : 70 : 20, 28 : 1.00 : 15 : 85 : 0 an 35 : 1.00 : 15 : 85 : 0, in order.
나프탈렌과 TNT는 미국 환경청(U.S. EPA)에서 규정한 발암가능성 물질로(Group C), 환경으로 방출될 경우 수생태계와 인체에 심각한 영향을 주는 것으로 알려져 있다. 그러나 지하수 내 두 물질의 미량 분석법에 대한 기존연구는 매우 미비한 실정이다. 이에 본 연구에서는 HPLC-FLD(Fluorescence etector)와 MSD(Mass detector)를 이용한 지하수 내 나프탈렌 및 TNT의 미량분석법을 개발하여, MDL과 LOQ 및 이온영향을 조사하고, 현재 사용되고 있는 HPLC-UV 분석법과 비교 평가하였다. 나프탈렌의 경우, 3D-Fluorescence를 통하여 확인된 최고의 파장(Ex: 270 nM, Em: 330 nM)이 HPLC-FLD에 적용되었고, $0.3\;{\mu}g/L$의 MDL과 $2.0\;{\mu}g/L$의 LOQ가 획득되었다. 이는 현재 방법(HPLC-UV; MDL: $23.3\;{\mu}g/L$, LOQ: $163.1\;{\mu}g/L$)보다 약 80배 우수한 결과이며, U.S. EPA의 음용수 권고기준($700\;{\mu}g/L$)의 약 350배 이하까지 정량분석이 가능한 수치이다. TNT의 경우, 새롭게 제시된 HPLC-MSD로 측정한 방법(MDL: $0.13\;{\mu}g/L$, LOQ: $0.88\;{\mu}g/L$)이 HPLC-UV(MDL: $16.8\;{\mu}g/L$, LOQ: $117.5\;{\mu}g/L$ at 230 nM)보다 약 130 배 우수한 것으로 조사되었고, U.S. EPA의 음용수 권고기준($20\;{\mu}g/L$)보다 약 23배 낮은 농도까지 정량분석이 가능한 것을 확인하였다. 또한 HPLC-UV(230 nM)의 분석법은 ${NO_3}^-$ 농도가 증가할수록(특히 21 mg/L 이상) 크로마토그램의 기준선이 증가하여 정량에 방해를 주었으나, HPLC-MSD 분석법은 국내 지하수 평균 농도보다 약 3.5배인 63.7 mg/L에서도 분석의 영향 없이 안정한 크로마토그램을 보여주었다. 따라서 새롭게 제시된 HPLC-FLD와 MSD에의한 나프탈렌과 TNT 분석법은 지하수 및 음용수 미량분석에 적합하며, 관련분야 연구에 크게 도움이 될 것이다.
남조류 독소인 마이크로시스틴은 여름철 우리나라 여러 호수들에 존재하여 물고기와 가축 그리고 인간에게 강한 독성을 나타내는 독소이다. 본 논문에서는 이러한 수중 남조류 독소, 마이크로시스틴을 정량분석하는 두가지 방법, 즉 고성능 액체크로마토그래피(HPLC) 분석법과 최근 우리 실험실에서 개발한 스트립분석법의 비교를 시도하였다. 두 분석법의 측정가능농도범위가 많이 달라 HPLC 법으로 먼저 측정한 후 시료를 물로 희석시켜 스트립분석법에 적용하였다. 서로 다른 농도의 마이크로시스틴을 함유한 7가지 물시료들을 사용하여 HPLC분석법과 스트립 분석법으로 남조류 독소 총량을 측정하였다. 그 결과 두 분석법의 정량측정결과가 매우 잘 일치하는 것을 볼 수 있었다. 두 분석법의 상관분석 결과 r 값은 0.99998 이었으며 통계적인 유의성을 나타내는 p 값은 0.00001 이었다.
An HPLC assay method of a drug to be applied to the pharmacokinetic studies of the drug should be completely validated. The validation process for an HPLC assay method in a biological sample was discussed using the data obtained from the development of HPLC method for the simultaneous quantitation of verapamil and norverapamil in human serum. The validation criteria included were specificity, linearity, accuracy, precision, sensitivity, recovery, drug stability, and ruggedness of an assay method.
A simple and rapid determination of total retinol from various pharmaceuticals containing retinol derivatives was described. Retinol derivatives were hydrolyzed with alcoholic KOH to alcoholic retinol, which was determined by HPLC. Pretreatments and HPLC conditions depend on the kind of retinols and preparation forms. The total amount of alcoholic retinol could be determined with this method from many pharmaceutical preparation of retinol derivatives. Treating time of KOH, acidic reagents and HPLC conditions were investigated.
In this study, we shortly introduced the HPLC method validation guideline for the analysis of functional food which was released from the Ministry of Food and Drug Safety of Korea in Dec 2018. The HPLC method validation was performed through the aforementioned HPLC method validation guideline in order to quantitate scopoletin content from the hot-water extract powder of Artemisia annua Linné. The HPLC method was validated by evaluating specificity, accuracy, precision, limit of quantitation and linearity. All parameters were in the suitable ranges which are designated in the guideline, which indicated the current HPLC method is reliable to quantitate the scopoletin content from the hot-water extract of A. annua.
화학발광고속액체크로마토그래피(chemiluminescence-HPLC, CL-HPLC)법을 이용하여 생체지질과산화물의 측정에 있어서 표준물질인 포스파티딜콜린 하이드로퍼옥사이드(phosphatidylcholine hydroperoxide, PCOOH)의 조제법을 개발하였다. 미산화의 포스파티딜콜린(PC)에 로즈벤갈(rose bengal)을 첨가하여 형광분광광도계에서 1시간 조사시킴으로써 광 산화 시켰다. 얻어진 PCOOH의 농도는 FOX(ferrous oxidation-xylenol orange)법으로 측정하여 계산한 후, 일정 농도로 희석하여 CL-HPLC계에서 분석하였다.
Octanol/water partition coefficients of 52 chemicals were calculated using RP-HPLC estimation method and predicted by computer program, PCHEM. The result showed relationship between literature values and RP-HPLC observed values (relative coefficient r$^2$=0.916), but the relationship of PCHEM values with literature values was lower than RP-HPLC value (relative coefficient r$^2$=0.795). The average difference in partition coefficient between the RP-HPLC method and flask-shaking method was log Kow=0.54, while the average difference between the values predicted form the computer program and flask- shaking method was log Kow = 0.36 Compared to octanol/water partition coefficients by 3 methods (Flask-shaking, RP-HPLC, computer prediction), the octanol/water partition coefficient values based on the flask-shaking method were very similar to the literature values, while the octanol/water partition coefficient values by RP-HPLC method without to consider the dead time, and computer prediction values did not significantly differ with the literature values.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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