• 약학회지
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• 제53권1호
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• pp.34-40
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• 2009

The glycosylation of therapeutic glycoproteins can affect their efficacy, stability, solubility, and half-life. Analyzing the composition of monosaccharides, such as that of neutral and amino sugars, is the first step for elucidating the structure of glycan attached to glycoproteins. In the present study, neutral and amino sugars of lectin obtained from Maackia fauriei were analyzed using an enzyme-linked lectinsorbent assay (ELLA) and high-performance anion exchange chromatography with pulsed amperometric detection (HPAEC-PAD). Peroxidase-labeled lectins such as concanavalin A, Ricinus communis agglutinin, and soybean agglutinin were used for ELLA, since they specifically bind to the monosaccharide residue most frequently encountered in a glycan. The hydrosylate of lectin was prepared by treatment with trifluoroacetic acid, which resulted in the lectin mainly possessing the N-glycan consisting of 98.1 pmol Fuc, 342.1 pmol GlcN, 51.9 pmol Gal, 678.9 pmol Man, and 330.7 pmol Xyl. The present results demonstrate that ELLA and HPAEC-PAD are very effective methods for rapidly estimating the types and relative amounts of monosaccharides in intact glycoproteins.

• 대한한약학회:학술대회논문집
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• 대한한약학회 2007년도 Autumn Conference
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• pp.175-175
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• 2007

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제42권4호
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• pp.166-168
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• 1999

Inulo-oligosaccharides (IOS, $F_n$, n=2-6) were purified from enzymatic hydrolysates of water-soluble extract of Jerusalem artichoke tubers. Quantification of inulo-oligosaccharides was done using high pH anion exchange chromatography with pulsed amperometric detector (HPAEC-PAD) at the concentration range of 10-100 mg/L, which was compared with that of fructo-oligosaccharides (FOS, $GF_n$, n=1-7). Peak areas per mg IOS were higher than FOS at the same degree of polymerization (DP). Specific peak areas of IOS increased proportionally as DP increased up to six, in contrast to FOS showing no linearity.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제34권6호
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• pp.44-50
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• 2006

아임계 및 초임계수 특성에 따른 목질 바이오매스의 당화특성을 분석하기 위하여 물의 초임계 압력인 23 MPa로 고정하고 아임계 온도($325^{\circ}C$, $350^{\circ}C$)와 초임계 온도($380^{\circ}C$, $400^{\circ}C$, $425^{\circ}C$)에서 현사시나무 목분을 각각 60초 동안 처리하였다. 생성된 현사시 목분의 분해산물에는 액상과 고형분의 분해산물이 섞여 있었다. 각 처리조건에 따른 목분의 분해율은 처리 온도가 상승함에 따라 증가하였으며 초임계 온도인 $425^{\circ}C$에서 최고 83.1%의 분해율을 나타냈다. 아임계 및 초임계수 분해에 의해서 생성된 단당류는 액상의 분해산물을 대상으로 고성능 음이온 교환 크로마토그래프(HPAEC)를 이용하여 분석하였다. 목질바이오매스의 초임계수 분해과정에서 처리온도가 높아지면서 단당류 수율은 증가하는 경향을 보였으며, $425^{\circ}C$에서 가장 높은 7.3%의 단당류 수율을 나타내었다. 아임계 온도 범위에서는 현사시나무의 섬유소 성분 중에서 자일란이 우선적으로 분해되어 자일로스의 생성비율이 비교적 높았으며, 처리온도가 높아지면서 셀룰로오스의 분해에 의한 글루코오스 생성율이 급격히 상승하였다.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제19권12호
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• pp.814-824
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• 2018

거세한우 3두를 $3{\times}3$ Latin square design 시험방법에 적용하여 사료 적응 기간 10일 후 사료 급여 방식에 따른 반추위액 내 휘발성지방산과 단당류 비교 분석 및 대사산물 분석에 대한 연구를 수행하였다. 연구 결과 HPLC와 HPAEC에서 측정되지 않은 휘발성지방산과 단당류들은 $^1H-NMR$에서는 측정이 가능 한 것을 알 수 있었다. $^1H-NMR$에서 측정된 대사산물 중, carbohydrate 계열 대사산물 pyruvate는 사료 급여 전 반추위액에서만 측정 되었으며, succinate는 사료 급여 전 후에서 모두 측정 되었다. Amino acid 계열 대사산물은 총 9가지가 측정 되었다. Lipid 계열 대사산물 ethylene glycol는 사료 급여 전 Con구에서 유의적(P<0.05)으로 높게 측정 되었다. Aiphatic acylic compounds 계열 대사산물 trimethylamine N-oxide는 유의적인 차이는 보이지 않았다. 이번 연구를 통해 $^1H-NMR$를 이용하여 반추위액 내 많은 대사산물 측정이 가능한 것을 알 수 있었으며 사료 급여 전 후 급여 방식에 따라 대사산물의 변화가 나타나는 것을 확인 할 수 있었다.

• 대한본초학회지
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• 제22권4호
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• pp.261-270
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• 2007

Objective : The 5-HMF was not index material suitable to do the quality control of Rehmanniae Radix Preparata. In this study, We estimated the changes of oligosaccharide contents in Rehmanniae Radix Preparata using high-performance anion-exchange chromatography with pulsed amperometric detection(HPAEC-PAD). Methods : The analysis of oligosaccharide was conducted by HPAEC-PAD with Carbopac PA1, $250{\times}4mm$, 5um, and Carbopac PA1 guard column. Column temperature was kept at $30^{\circ}C$. Elution was carried out at 1000 ${\mu}l/min$ with 70mM NaOH and the injection volume was $10{\mu}l$. Each component was detected by PAD. Results : Nine constituents were found from merchandising Rehmanniae Radix Preparata(MR), while seven constituents were found in various processed Rehmanniae Radix Preparata. Not all constituents were defined but stachyose and raffinose were found in all cases. And The most common constituents of Rehmanniae radix was stachyose. In the course of processing, most of stachyose and raffinose were decreased. Stachyose was decreased slowly in the course of processing with rice wine(RR), amomi and rice wine(AR), and crataegi and rice wine(CR). However stachyose was decreased rapidly in the course of processing with fresh rehmannia juice(FR). The method with crataegi and rice wine(CR) showed the smallest decrease of stachyose. And processing method with crataegi and rice wine(CR) showed the most abundant amount for stachyose after the nineth processing. Conclusion : The changes of oligosaccharides in the course of processing were a very important direct barometers to do the quality control and set up a standard of Rehmanniae Radix Preparata.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제33권2호
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• pp.136-141
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• 2005

고형 양식사료에 포함된 질소와 인의 미생물학적 제거 공정을 알아보기 위하여 벤치규모의 실험을 수행하였다. CK-10과 CK-13 균주가 새우양식장의 물시료로부터 분리되었다. CK-10과 CK-13의 혼합배양에서 N/P의 동시제거 실험을 실시하였다. 그 결과, $400\;{\mu}M\;NH^{+}_4$ 와 $NO^{-}_2$는 12시간 이내에 제거되었고, $NO^{-}_3$는 36시간 이내에 각각 제거되었으며, $500\;{\mu}M\;PO^{3-}_4$ 36시간 이내에 제거되었다. CK-10과 CK-13 배양을 새우양식사료에서 용출된 N와 P의 제거에 적용하였다. HPAEC-PAD 시스템을 이용하여 양식사료의 당을 분석하였으며, glucose, galactose, galatosamine, mammonse, fucose 등의 여러 가지 당이 분석되었다. 세균에 의한 질소와 인 제거를 수행하기 위하여 인공 해수에서 $0.2\%$(w/v)의 양식사료를 용출시켰으며, 72 시간동안 용출된 질소의 양은 대략 $33.3\;{\mu}M\;NH^{+}_4,\;12.9\;{\mu}M\;NO^{-}_2.\;81.5\;{\mu}M\;NO^{-}_3,\;248\;{\mu}M\;PO^{-3}_4$였다. 혼합배양은 $0.2\%$ 사료에 포함된 질소와 인을 84시간 이내에 완전히 제거하였으나, 단일배양은 주어진 배양기간동안 질소와 인을 완전제거 하지 못하였다. 이 연구에서 CK-10과 CK-13 배양은 새우양식사료에서 유래하는 질소와 인을 효과적으로 제거하는 것이 입증되었다.

• Food Science and Biotechnology
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• 제14권4호
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• pp.470-473
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• 2005

Starch was isolated from turnip (Brassica rapa L.), and to elucidate the structure-function relationship its structural and physical properties were characterized. Morphological structure of the starch was analyzed by SEM (Scanning Electron Microscopy). Most of the starch granules were spherical in shape with diameter ranging from 0.5-10mm. Apart from larger granules ($<10\;{\mu}m$) which dominated the population size of turnip starch, significant amount of small ($0.5-2\;{\mu}m$) and mid-size granules (${\sim}\;{\mu}m$) were also detected. It was revealed that presumably, erosion damages occurred due to the attack of amylase-type enzymes on the surface of some granules. Branch chain-length distribution was analyzed by HPAEC (High-Performance Anion-Exchange Chromatography). The chain-length distribution of turnip starch revealed a peak at DP12 with obvious shoulder at DP18-21. The weight-average chain length ($CL_{avg}$) was 16.6, and a large proportion (11.8%) of very short chains (DP6-9) was also observed. The melting properties of starch were determined by DSC (Differential Scanning Calorimetry). The onset temperature ($T_o$) and the enthalpy change (${\Delta}H$) of starch gelatinization were $50.5^{\circ}C$ and 12.5 J/g, respectively. The ${\Delta}H$ of the retrograded turnip starch was 3.5 J/g, which indicates 28.2% of recrystallization. Larger proportion of short chains as well as smaller average chain-length can very well explain relatively lower degree of retrogradation in turnip starch.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제34권9호
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• pp.2663-2670
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• 2013

The purpose of stability testing is to provide evidence about how the quality of a drug varies with time under the influence of a variety of environmental factors. In this study, erythropoietin (EPO) was analyzed under different pH (pH 3 and pH 9) and temperature ($25^{\circ}C$ and $40^{\circ}C$) conditions according to current Good Manufacturing Practice (cGMP) and International Conference on Harmonisation (ICH) guidelines. The molecular weight difference between intact EPO and deglycosylated EPO was determined by SDS-PAGE, and aggregated forms of EPO under thermal stress and high-pH conditions were investigated by size exclusion chromatography. High pH and high temperature induced increases in dimer and high molecular weight aggregate forms of EPO. UPLC-ESI-TOF-MS was applied to analyze the changed modification sites on EPO. Further, normal-phase high-performance liquid chromatography was performed to identify proposed glycan structures and high pH anion exchange chromatography was carried out to investigate any change in carbohydrate composition. The results demonstrated that there were no changes in modification sites or the glycan structure under severe conditions; however, the number of dimers and aggregates increased at $40^{\circ}C$ and pH 9, respectively.

• 한국신재생에너지학회:학술대회논문집
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• 한국신재생에너지학회 2006년도 추계학술대회
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• pp.525-528
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• 2006

아임계 및 초임계수에 의한 목질바이오매스의 당화특성을 분석하기 위하여 분해공정 동안 압력을 23MPa(물의 임계압력)로 고정하고 물의 아임계 온도$(325^{\circ}C,\;350^{\circ}C)$와 초임계 온도$(380^{\circ}C,\;400^{\circ}C,\;425^{\circ}C)$에서 현사시나무 목분을 각각 60초 동안 처리하였다. 생성된 현사시나무의 분해산물에는 액상과 고형분의 분해산물이 섞여 있었다. 각 처리조건에 따른 목질바이오매스의 분해율은 온도가 상승함에 따라 증가하였으며 초임계 온도인 $425^{\circ}C$에서 최고 83.1%의 분해율을 나타냈다. 아임계 및 초임계수에 의해서 생성된 단당류는 고성능 음이온 교환 크로바토그래프(HPAEC)를 이용하여 분석하였다. 목질바이오매스의 초임계수 분해과정에서 처리 온도가 높아지면서 단당류 수율은 증가하는 경향을 보였으며, $425^{\circ}C$에서 가장 높은 7.3%의 단당류 수율을 나타내었다. 아임계 온도 범위에서는 현사시나무의 섬유소 성분 중에서 자일란이 우선적으로 분해되어 자일로스의 생성비율이 비교적 높았으며, 처리온도가 높아지면서 셀롤로오스의 분해에 의한 글루코오스 생성율이 급격히 상승하였다. 이렇게 생성된 단당류 성분들은 고온의 반응조건하에서 열분해 반응에 의해서 더욱 분해되어 퓨란계 화합물로 변형되었다.