본 논문은 야채추출물의 인간 암세포 증식 억제효과를 살펴보는 데 목적이 있다. 본 연구는 일반적으로 야채수프에 사용되는 무, 무청, 우엉, 표고버섯, 당근등의 야채추출물을 이용하여 암세포 증식 억제효과를 살펴보았다. 인간 암세포주는 위암 (AGS) 세포주, 급성 전골수성 백혈병 (HL-60) 세포주, 폐암 (A549) 세포주를 사용하였으며 MTS방법으로 암세포 증식 억제를 확인하였다. 위암 세포주는 표고버섯과 당근에서 암세포 증식 억제효과가 있었으며 급성 전골수성 백혈병 세포주는 무청, 우엉, 당근에서 암세포 증식 억제효과가 있었으며 특히 우엉과 당근에서 유의성 있는 억제를 보였으며 폐암 세포주는 무, 무청에서 탁월한 효과를 보였다. 암세포 증식억제 효과가 있는 야채추출물을 이용한 야채스프는 항암성이 있는 기능성 소재로 활용과 융복합적인 웰리스를 위한 기초 자료로 활용이 가능하다고 사료된다.
당유자 과피(GGP) 80% 에탄올 추출물을 4종의 암세포에 (피부암, 대장암, 유방암 및 혈액암) 처리하여 증식 억제 활성을 측정한 결과, 혈액암 HL60 세포에서 높은 증식 억제 활성을 보였다. 이에 CGP 추출물이 HL60 세포에 대한 apoptosis 유도에 따른 세포 증식 억제 활성을 조사하였다. Apoptosis 유도의 첫 단계인 막 투과성을 측정한 결과, confocal image와 flow cytometry에서 CGP를 처리하였을 때 탈분극 현상에 따른 막 투과성이 증가하였고 세포내 핵을 hoechst 33342를 이용하여 염색하였을 때 apoptosis가 일어났을 때 나타나는 전형적인 형태의 apoptotic body가 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었으며 flow cytometry를 통하여 세포 주기를 측정하였을 때 DNA-hypodiploid 형태의 sub-G1가 CGP 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. Apoptosis 유도 기전을 western blot으로 측정한 결과를 보면, CGP 추출물을 혈액암 HL60 세포에 처리하였을 때 Bcl family의 anti-apoptotic Bcl-2 단백질의 감소와 pro-apoptotic Bax 단백질의 증가로 인하여 하위 기전인 caspase-3가 활성화되었으며, 이 활성화로 인하여 apoptosis 유도에 직접적으로 관여하는 PARP 단백질을 활성화시키면서 apoptosis를 유도하였다. 따라서 당유자 과피는 항암과 관련되어진 기능성식품 및 소재 개발 원료로서 개발이 가능하리라고 사료된다.
Water extracts obtained from cultured mountain ginseng (CMG) were evaluated for their ability to stimulate immune cells and inhibit cancer cell proliferation. The lymphocyte subpopulation in mouse splenocytes in vivo was significantly increased by the administration of the CMG extract (27.4 mg/mouse). Interleukin-2 and ${\gamma}$-interferon in the mice serum increased up to 30% in CMG extract-treated mice. At a concentration of 1.37 mg/mL, nitric oxide increased up to 400% in the macrophage cell line treated with CMG extract. The CMG extract significantly retarded the proliferation of human acute promyelocytic (HL60), human histiocytic (U937), and mouse lymphocytic (L1210) leukemia cell lines in vitro at concentrations over 2.74-13.7 mg/mL. In addition, CMG extract treatments (1.37 mg/mL and 2.74 mg/mL) lead to the increased expression of the p53 gene and protein in cultured U937 leukemia cell lines. These results indicate that water extracts of CMG are capable of both immune cell stimulation and cancer cell growth inhibition.
Toxoplasma gondii를 HL-60 세포와 함께 in vitro 배양시 Toxopsasma 침투 정도가 각 세포에서 균일하지 않으므로 세포의 주기에 따른 일정 phase가 그 침투에 좋은 환경을 제공할 것이라는 추론으로 HL-60세포 주기를 동시화(synchronization)하여 각 stage에서 변화를 관찰하였다. 동시화는 과량의 thymidine이 DNA 합성을 억제함을 이용하여 2mM thymidine을 10시간 간격으로 각 24, 18시간 동안 처리하여 (double thymidine block method) S (synthetic) phase를 진행하는 세포를 얻었고 이후 30시 간 동안 13회의 간격을 두고 $5{\times}10^6/ml$의 Toxoplasma를 첨가하여 1시간 동안 배양하였다. 숙주세포의 동시화 정도는 (1) 3H-thymidine의 표지량 (2) mitotic index 측전 및 (3) 세포수의 증가를 통해 확인하였다. Toxoplasma의 침투 정도는 S phase중에서도 배지에서 thymidine을 제거한 후 3시간 경과시가 그 전후에 비해 6배 이상 높았으며 특히 이 시기는 DNA 합성이 최고가 되는 점과 일치하였다. 침투된 Toxoplasma 수의 변화 외에 세포의 모양도 상당한 변화가 있었고 이는 19시간 후 2번째 S phase에서도 약하나마 관찰되었다 실험 결과를 통해 특정 약 1시간 동안 일어나는 어떤 세포의 변화가 Toxoplasma 침투에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다. 이는 원충 기생충의 숙주세포 흡착과 interiorization과정에 receptor가 관련되고 몇 receptor는 세포주기에 따라 발현이 조절되는 사실로부터 $G_1/S$ 경계부터 3시간째에 발현되면서 Togopzasma를 유인하는 receptor molecule의 존재 가능성을 시사하였다.
Ju Sung-Min;Lee Jun;Choi Ho-Seung;Yoon Sang-Hak;Kim Sung-Hoon;Jeon Byung-Hun
동의생리병리학회지
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제20권1호
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pp.163-170
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2006
Nardostachyos Rhizoma (N. Rhizoma) belonging to the family Valerianaceae has been anti-arrhythmic effect, and sedation to the central nerve and a smooth muscle. We reported that the water extract of N. Rhizoma induced apoptotic cell death and differentiation in human promyelocytic leukemia (HL-60) cells. Cytotoxicity of N. Rhizoma was detected only in HL-60 cells (IC50 is about 200 ${\mu}g/ml$). The cytotoxic activity of N. Rhizoma in HL-60 cells was increased in a dose-dependent manner. We used several measures of apoptosis to determine whether these processes were involved in N. Rhizoma-induced apoptotic cell death. The high-dose (200 ${\mu}g/ml$) treatment of N. Rhizoma to HL-60 cells showed cell shrinkage, cell membrane blobbing, apoptotic bodies, and the fragmentation of DNA, suggesting that these cells underwent apoptosis. Treatment of HL-60 cells with N. Rhizoma time-dependently induced activation of caspase-3, caspase-8, and caspase-9 and proteolytic cleavage of poly(ADP-ribose) polymerase. Also, we investigated the effect of N. Rhizoma on cellular differentiation and proliferation in HL-60 cells. Differentiation and proliferation of HL-60 cells was determined through expression of CD11b and CD14 surface antigens using flow cytometry and nitroblue tetrazolium (NBT) assay, and through analysis of cell cycle using propidium iodide assay, respectively. N. Rhizoma induced the differentiation of HL-60 at the low-dose (100 ${\mu}g/ml$) treatment, as shown by increased expression of differentiation surface antigen CD11b, but not CDl4 and increased reducing activity of NBT. When HL-60 cells were treated with N. Rhizoma at concentration of $50{\mu}g/ml\;and\;100{\mu}g/ml$, NBT-reducing activities induced approximately 1.5-fold and 20.0-fold as compared with the control. In contrast, HL-60 cells treated with the N. Rhizoma-ATRA combination showed markedly elevated levels of 26.3-fold at $50{\mu}g/ml$ N. Rhizoma-0.1 ${\mu}M$ ATRA combination and 27.5-fold at 50 ${\mu}g/ml$ N. Rhizoma-0.2 ${\mu}M$ ATRA combination than when treated with N. Rhizoma alone or ATRA alone. It may be that N. Rhizoma plays important roles in synergy with ATRA during differentiation of HL-60 cells. DNA flow-cytometry indicated that N. Rhizoma markedly induced a G1 phase arrest of HL-60 cells. N. Rhizoma-treated HL-60 cells increased the cell population in G1 phase from 32.71% to 42.26%, whereas cell population in G2/M and S phases decreased from 23.61% to 10.33% and from 37.78% to 33.98%, respectively. We examined the change in the $p21^{WAF1/Cip1}\;and\;p27^{Kip1}$ proteins, which are the CKIs related with the G1 phase arrest. The expression of the CDK inhibitor $p27^{Kip1},\;but\;not\;p21^{WAF1/Cip1}$ were markedly increased by N. Rhizoma. Taken together, these results demonstrated that N. Rhizoma induces apoptotic cell death through activation of caspase-3, and potently inhibits the proliferation of HL-60 cells via the G1 phase cell cycle arrest in association with $p27^{Kip1}$ and granulocytic differentiation induction .
Photodynamic therapy (PDT) is a treatment modality based on photochemical reaction and the resultant cytotoxic reactive oxygen species. The platelet thrombus formation leading to stasis observed in vivo during PDT is called vascular shut down (VSD) effect. To investigate the mechanism of the VSD effect, we observed Human Umblical Vein Endothelial Cell (HUVEC) injury induced by photochemical reaction. We observed cell retraction and blebbing after PDT. It seems that the injury was not fetal and only morphological change. Then, the cytoplasm was stained by Calcein-AM and subendothelial area was evaluated from fluorescence microscopy. The rate of subendothelial area after PDT increased significantly. Second, we investigated interaction between neutrophils and HUVEC. Human promyelocytic leukemia cells (HL-60) were differentiated into neutrophil by incubation with all-trans retinoic acid. Calcein-AM labeled neutrophil adhesion to HUVEC was evaluated from fluorescence microscopy. PDT-induced neutrophil adhesion to HUVEC depended more on the exposure of subendothlial area than on neutrophil activation. This result suggests that there is a certain interaction between neutrophil and HUVEC during PDT.
Kim, Heui-og;Chung, Won-Yoon;Park, Min-Ah;Kim, Mi-Jeong;Park, Jae-Hee;Park, Kwang-Kyun
한국독성학회:학술대회논문집
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한국독성학회 2001년도 International Symposium on Dietary and Medicinal Antimutgens and Anticarcinogens
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pp.141-142
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2001
Curcuma xanthorrhiza Roxb(Zingiberaceae) has been traditionally used in Indonesia for dietry and medicinal purposes. Xanthorrhizol is a sesquiterpenoid isolated from C. xanthorrhiza that has been known to possess anti-inflammatory and anticarcinogenic defects.(omitted)
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.157.3-158
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2003
The antioxidant and anticancer properties of a medicinal plant, Betula platyphylla var. japonica were investigated. The total methanol extract of B. platyphylla var. japonica had protective effects against hydrogen peroxide ($H_2O_2$) in the Chinese hamster lung fibroblast (V79-4) cell line and induced apoptotic cell death in human promyelocytic leukemia (HL-60) cells, a cancer cell line. B. platyphylla var. japonica extract significantly increased cell viability against $H_2O_2$. The extract also showed high 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity ($IC_50$ 2.4 mg/ml) and lipid peroxidation inhibitory activity ($IC_50$ below 4.0 mg/ml). (omitted)
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2-2
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pp.199.1-199.1
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2003
In the course of our search for intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1)/leukocyte function-associated antigen-1 (LFA-1) mediated cell adhesion inhibitors from natural sources, new type of cell adhesion inhibitors were isolated from the MeOH extract of Saururus chinensis roots. On the basis of spectral evidence, the structures of the active compounds were identified as manassantin A and B. Manassantin A and B inhibited phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)-induced homotypic aggregation of the human promyelocytic leukemia HL-60 cells without cytotoxicity with MIC value of 1.0 and 5.5 nM, respectively. (omitted)
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[게시일 2004년 10월 1일]
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