브로콜리와 같은 십자화과 식물에서 glucoraphanin의 가수분해를 통해 생성되는 isothiocyanate의 일종인 sulforaphane은 강력한 항암효과를 가지며, 역학적 조사를 포함한 다양한 선행 연구에서 androgen 비 의존적으로 성장하는 전립선 암세포의 증식을 억제하는데 효과가 있었다. 최근 연구 결과에 따르면 sulforaphane은 다양한 인체암세포의 증식을 억제하고 apoptosis를 유발할 수 있는 것으로 알려지고 있으나, 정확한 분자생물학적 기전은 밝혀져 있지 않은 상태이다. 본 연구에서는 sulforaphane의 항암작용 기전을 조사하기 위하여 HeLa 인체자궁경부암세포의 증식에 미치는 sulforaphane의 영향을 조사하였다. Sulforaphane의 처리에 의한 HeLa 세포의 증식억제 및 형태적 변형은 세포주기 C2/M arrest 및 apoptosis 유발과 밀접한 관련이 있음을 알 수 있었다. RT-PCR 및 Western blot 분석 결과, sulforaphane 처리에 의하여 cyclin A 및 cyclin-dependent kinase (Cdk)4 단백질의 발현이 선택적으로 저하되었으며, Cdc2, Cdk inhibitor인 p16 및 p21의 발현은 증가되었다 그러나 sulforaphane은 cyclooxygenases의 발현이나 telomere 조절에 중요한 역할을 하는 인자들의 발현에는 큰 영향을 주지 못하였다. Sulforaphane의 항암 기전을 규명하기 위해서는 더 많은 연구가 부가적으로 필요하겠지만, 본 연구의 결과들에 의하면 sulforaphane은 강력한 인체암세포의 증식 억제 및 항암작용이 있을 것을 시사하여 준다고 할 수 있다.
본 연구에서는 SDS/polyacrylamide젤 전기영동과 2차원 전기영동을 사용하여 Gerris paludum(소금쟁이)의 난 형성 동안 난소 단백질과 혈림프 단백질을 비교하였다. 또한 난물질의 구성성분인 glycoprotein의 양상을 살펴 보았다. 결과는 다음과 같다. 난을 갖지 않는 5령의 난소 단백질의 양상을 성체의 산란 무 난소 단백질 퍼턴과 유사하였다. 난 발달동안의 난소의 단백질중 M.W 66,000-110,000 사이의 단백질이 난을 갖지 않은 난소 단백질에 비해 많은 양이 존재하였다. 난을 갖지 않은 난소에서는 glycoprotein은 나타나지 않았다. glycoprotein은 5령의 난 발달이 진행됩에 따라 점차적으로 증가하였다. 산란후 성체의 난소에서는 5령의 난을 갖지 않는 난소에서처럼 glycoprotein은 나타나지 않았다. 또한, M.W 66,000-110,000 사이의 혈림프 단백질은 5령의 난 형성 동안 양적으로 증가하였다. 이러한 결과는 난소 단백질 중 일부를 혈림프로부터 얻을 것이라는 사실을 제시하는 것이다. 발달하고 있는 난의 glycoprotein은 이 단계의 혈림프에서도 점차 증가하였다. 낮은 분자 영역에서 하나의 band (M.W. 9,500)가 난을 갖지 않는 5령과 성체의 혈림프에서 분리되었다. 이 단백질은 고분자량의 영역(M.W. 66,000-110,000)에서 나타나는 glycoprotein 전구체라고 생 각된다. 2차원 전기영동에서는 난을 갖지 않은 난소 단백질이 난을 가지고 있는 난소 단백질에 비해 적은 spots로 분리되었고 그 양도 적었다. M.W 45,000-110,000 사이의 band들은 2차원 전기영동에서 산성쪽으로 분리되어 나타났다. 특히, M.W. 102,000의 분자량을 가지는 band는 4개의 spots bl, b2, b3 및 b4로 분리되었다. 반면에 M.W 24,000이하의 단백질들은 산성쪽의 단백질보다 염기성쪽으로 분리되었다. Gepris paludum의 난황 형성과정에 있어서 세포내 기관(= 세포 소기관)의 기작이 난세포의 난황단백질 합성과 관계를 가지고 있었다.
The present study was carried out to evaluate the nutritional quality of rabbit meat protein. The composition of amino acids contained in rabbit meat was compared with those of other animal meats such as beef, pork and chicken. Also included in this study was the question whether the cooking and storage conditions affect the amino acid composition and the pepsindigestibility of rabbit meat protein. The results are summarized as follows: 1. The large variation observed from sample to sample of EAA (essential amino acid) composition in rabbit meat was found to be an interesting but peculiar property of rabbit meat protein. The most limiting amino acid of rabbit meat protein was phenylalanine, whereas methionine was the first limiting amino acid of both beef and pork proteins. Chemical scores of various meat proteins were 68, 65, 66, and 74 for rabbit meat, beef, pork, and chicken respectively. 2. In pan roasting, the EAA damaged most by heat was methionine (15%). When cooked after two months of frozen storage, lysine decreased most. 3. Higher pepsin digestibility was obtained by cooking rabbit meat after seasoned in alcohol, ginger juice, and other spices compared with various other cooking conditions without seasoning. The pepsin digestibility value was even higher for the seasoned meat than for the raw meat. 4. Among various meats tested the rabbit meat showed the lowest pepsin digestibility. 5. A simple measurement of released methionine could be used to determine relative digestibility instead of measuring $NH_2-N$ content after pepsin digestion. From all the results obtained in this study it can be concluded that rabbit meat is a good Protein food item when used fresh and stored properly to prevent rancidity problems. It is suggested to study further the peroxidation effect of unsaturated fatty acids on protein quality. This study was supported by the Ministry of Science and Technology in Korea.
Bone morphogenetic protein-2/4 (BMP-2/4) are members of Transforming Growth $Factor-{\beta}\;(TGF-{\beta})$ superfamily and they may differentiate the osteoprogenitor cell and induce formation of cartilage and bone in vivo. This study was performed to investigate the effects of bone morphogenetic protein-2/4 on the characteristics of rat periodontal ligament cells(RPDL) and rat calvaria cells(RCV). In the control group, the cells were cultured alone with Dulbeco's Modified Eagle's Medium contained with 20% fetal bovine serum, $100{\mu}/ml$ penicillin, $100{\mu}/ml$ streptomycin. In the experimental groups, recombinant human bone morphogenetic protein-2/4 (25ng, 100ng, 250ng/ml) were added into the above culture condition. And then each group was characterized by examing the cell proliferation at 1, 2, 3, 5, 7th day, the amount of total protein synthesis and alkaline phosphatase activity at 2, 5, 7th day. And also, the calcified nodule was examed. The results were as follows ; 1 . Both RCV and RPDL cells in both control and experimental groups proliferated during the entire experimental period, but there is no stastically significant difference according to the BMP-2/4 concentration. 2 . Amount of total protein synthesis of both cells in both groups was steadily increased until 5th day, but all experimental groups were significantly different from the control group at 7th day. 3. Alkaline phosphatase activity of both cells in both groups was increased during the entire experiment period. In RCV cells, the experimental group treated with 100ng/ml and 250ng/ml BMP-2/4 were significantly different from the control group at 7th day. In RPDL cells, the experimental group treated with 100ng/ml and 250ng/ml BMP-2/4 were significantly different from the control group at 5th day, and all experimental groups were significantly different from the control group at 7th day. 4. In the both of the cultured Rat Periodontal ligament and calvaria cell treated with BMP-2/4 to compared with control group, it revealed more rapid cell polarization, cell aggregation and hyperchromatic stained on HE agent, and even though only 1 day treated with BMP-2/4 both RPDL and RCV showed more rapid cell reaction than control group. More sensivitve cell reaction of RCV were observed than RPDL in this experiment. From the above results, we could conclude that BMP-2/4 influenced the induction, proliferation and differentiation of bone forming cells
Maternal malnutrition during pregnancy may give rise to female offspring with disrupted ovary functions in adult age. Neonatal ovary development predisposes adult ovary function, yet the effect of maternal nutrition on the neonatal ovary has not been described. Therefore, here we show the impact of maternal protein restriction on the expression of folliculogenic and steroidogenic genes, their regulatory microRNAs and promoter DNA methylation in the ovary of neonatal piglets. Sows were fed either standard-protein (SP, 15% crude protein) or low-protein (LP, 7.5% crude protein) diets throughout gestation. Female piglets born to LP sows showed significantly decreased ovary weight relative to body weight (p<0.05) at birth, which was accompanied with an increased serum estradiol level (p<0.05). The LP piglets demonstrated higher ratio of bcl-2 associated X protein/B cell lymphoma/leukemia-2 mRNA (p<0.01), which was associated with up-regulated mRNA expression of bone morphogenic protein 4 (BMP4) (p<0.05) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) (p<0.05). The steroidogenic gene, cytochrome P450 aromatase (CYP19A1) was significantly down-regulated (p<0.05) in LP piglets. The alterations in ovarian gene expression were associated with a significant down-regulation of follicle-stimulating hormone receptor mRNA expression (p<0.05) in LP piglets. Moreover, three microRNAs, including miR-423-5p targeting both CYP19A1 and PCNA, miR-378 targeting CYP19A1 and miR-210 targeting BMP4, were significantly down-regulated (p<0.05) in the ovary of LP piglets. These results suggest that microRNAs are involved in mediating the effect of maternal protein restriction on ovarian function through regulating the expression of folliculogenic and steroidogenic genes in newborn piglets.
Since its identification in 1989, hepatitis C virus has been the subject of extensive research. The biology of the virus and the development of antiviral drugs are closely related. The RNA polymerase activity of nonstructural protein 5B was first demonstrated in 1996. NS5B is believed to localize to the perinuclear region, forming a replicase complex with other viral proteins. It has a typical polymerase structure with thumb, palm, and finger domains encircling the active site. A de novo replication initiation mechanism has been suggested. To date, many small molecule inhibitors are known including nucleoside analogues, non-nucleoside analogues, and pyrophosphate mimics. NS5B interacts with other viral proteins such as core, NS3, 4A, 4B, and 5A. The helicase activity of NS3 seems necessary for RNA strand unwinding during replication, with other nonstructural proteins performing modulatory roles. Cellular proteins interacting with NS5B include VAMP-associated proteins, heIF4AII, hPLIC1, nucleolin, PRK2, ${\alpha}$-actinin, and p68 helicase. The interactions of NS5B with these proteins might play roles in cellular trafficking, signal transduction, and RNA polymerization, as well as the regulation of replication/translation processes.
TALP-32 is highly basic protein with a molecular weight of 32 kDa purified from human term placenta. Some basic proteins such as defensins and cecropins are known to induce cell death by increasing membrane permeability and some of them are under development as an anticancer drug especially targeting multi-drug resistant cancers. Therefore, we investigated cytotoxic effect and mechanism of TALP-32 When HeLa cell was incubated with TALP-32, cytotoxicity was increased in time and dose dependent manner. As time goes by, HeLa cells became round and plasma membrane was ruptured. Increase of plasma membrane permeability was determined with LDH release assay. Also in transmission electron microscopy, typical morphology of necrotic cell death, such as cell swelling and intracellular organelle disruption was observed, but DNA fragmentation and caspase activation was not. And necrotic cell death was determined with Annexin V/Pl staining. The cytotoxicity of TALP-32 was minimal and decreased or RBC and Hep3B respectively. These data suggests that TALP-32 induces necrosis on rapidly growing cells but not on slowly growing cells implicating the possibility of its development of anticancer peptide drug.
Breast cancer is now the leading cause of cancer death in women worldwide. Cancer progression is driven not only by cancer cell intrinsic alterations and interactions with tumor microenvironment, but also by systemic effects. Integration of multiple profiling data may provide insights into the underlying molecular mechanisms of complex systemic processes. We performed a bioinformatic analysis of two public available microarray datasets for breast tumor stroma and peripheral blood mononuclear cells, featuring integrated transcriptomics data, protein-protein interactions (PPIs) and protein subcellular localization, to identify genes and biological pathways that contribute to dialogue between tumor stroma and the peripheral circulation. Genes of the integrin family as well as CXCR4 proved to be hub nodes of the crosstalk network and may play an important role in response to stroma-derived chemoattractants. This study pointed to potential for development of therapeutic strategies that target systemic signals travelling through the circulation and interdict tumor cell recruitment.
Three dietary ME levels of 3,200, 2,900 and 2,600 kcal /kg in the same 13% single-stage low protein diet were compared to evaluate the effect of ME levels of grower diets on egg-type pullet growth and subsequent laying performance. As the ME levels of grower diets decreased, cumulative feed and protein consumptions increased(P<0.05), however, the ME intake and body weight at 18 wk of age decreased(P<0.05). Grower feed cost decreased as the dietary ME level was decreased, but no significant difference was found among dietary ME levels of grower diets. During the laying period, sexual maturity, hen-day egg production and average egg weight were not significantly affected by the ME levels of grower diet, however, daily feed intake and feed required per egg decreased as the dietary ME level of grower diet was reduced(P<0.05). Results of this study indicate that pullets can be reared on the low ME diet of 2,600 kcal /kg and it would he economical to utilize the low energy diet during the growing period when they are reared on a 13% single-stage low protein diet.
The functional properties of mechanically deboned chicken meat(MDCM) from whole carcass, whole carcass without exsanguination, neck without skin, leg hone, and upper back and rib were studied. Also, the effects of adding different levels of gelatin and MDCM to the comminuted meats were investigated. Proximate composition values of MDCM ranged from 54.2 to 68.6% moisture, 14.5 to 19.7% protein, 12.3 to 30.1% fat, and 1.1 to 1.3% ash. The MDCM from leg hone had a higher content of fat, and a lower contents of moisture and protein. The MDCM from neck without skin tended to be opposite to the MDCM from leg hone. The total pigment and myoglobin levels were highest in MDCM from whole carcass without exsanguination such as 3.83 and 0.29 rng /g, and those from the other parts were 1.58~2.93 mg /g and 0. 17~0.31 mg /g, respectively. The emulsifying capacity and water holding capacity were highest in MDCM from neck without skin which contained lower levels of fat, collagen and hydroxyproline, but a higher level of salt soluble protein. The emulsifying capacity of comminuted meat decreased as gelatin content increased. The extractability of hydroxyproline from gelatin showed a higher solubility in acidic solution. The MDCM could he added up to 20% level without detrimentally affecting functional properties of comminuted meats although they had less water holding capacity and cooking loss as the proportion of MDCM increased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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