• The Korean Journal of Pharmacology
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• v.23 no.2
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• pp.101-111
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• 1987

We investigated the binding properties of $(^3H)$ QNB and $(^3H)$ NMS to mAchR to elucidate the characterstics of mAchR in rat brain by using two different preparations (homogemates & intact brain cell aggregates). The binding properties of both ligands demonstrated high affinity and saturability in both experiments, however $(^3H)$ QNB showed a significantly higher maximal binding capacity than tha ot $(^3H)$ NMS 1. In rat brain homogenates; Displacement of both lignands with several mAchR antagonists resulted in competition curves in accoradnce with the law of massaction for QNB, atropine & scopolamine in thie preparation, also a similar profile was found for the quaternary ammonium analogs of atropine & scopolamine (methyl atropine & methylscopolamine) when $(^3H)$ NMS was used to label the receptors in rat brain. But when these hydrophillic antagonists were used to displace $(^3H)$ QNB, they showed interaction with high- and low-affinity binding sites in brain homogenates. Pirenzepine, the nonclassical mAchR antagonist, was able to displace both ligands from binding sites in this preparation. 2. In intact rat brain cell aggregates; Intact bain cell aggregates were used to elucidate the binding characteristics of $(^3H)$ NMS to mAchR in rat. The magnitude of binding of this ligand was related linearly to the amount of cell protein in the binding assay with a high ratio of total to nonspecific binding. mAchR antagonists displaced specific $(^3H)$ NMS binding according to the law of mass-action, while it was possible to resolve displacement curves using mAchR agonist into high-& low-affinity component. 3. Our results indicate that more hydrophilic receptor ligand $(^3H)$ QNB, displacement experiments in both tissues demonstrated that the lipid solubility of a particulr mAchR ligand might play an important role in determining its profile of binding to the mAchR, and the concentrations of mAchR in rat brain are both on the cell surface (membrane-bound receptor) and in the intracelluar membrane (intermembrane-bound receptor). 4. The results are discussed in terms of the usefulness of dissociated intact rat brain cells in studying mAchR in central nervous system.

• Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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• 1994.11a
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• pp.99-104
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• 1994

Renin-Angiotensin계는 정상 및 질병시의 혈압조절에 매우 중요한 역할을 담당하고 있음이 밝혀지면서, 이 조절계의 특정단계를 간섭함으로써 새로운 고혈압치료제를 개발하려는 연구가 일찍부터 시도되었다. (그림 1). 그 중에서 내인성 생리활성물질인 Angiotensin II의 합성을 차단하는 ACE 저해제는 임상적으로 고혈압 및 심부전치료제로서 유용성이 인정되어 현재 널리 사용되고 있다. ACE 저해제는 종종 마른기침, 발적과 같은 부작용이 나타나므로 이러한 부작용을 극복하려는 연구가 많이 있었으나 이는 작용기전에서 기인되는 것으로 해결에 한계를 보여왔다. 그런데 1982년 일본의 Takeda사의 연구진은 S-8307, 8308이라는 효과가 매우 약하기는 하지만 Angiotensin II 수용체를 선택적으로 차단하는 비펩타이드성의 AII길항물질을 특허 출원하였다. 미국의 Du Pont사는 AII길항약물이 효능은 그대로 유지하면서 ACE 저해제들의 부작용을 해결할 수 있을 것으로 예상하고 Takeda 화합물을 모핵으로하여, 많은 유도체들을 합성하면서 구조-활성 연구를 수행한 결과 비펩타이드성길항제인 Dup 753(Losartan, Cozaar$^{R}$) (2-N-butyl-4-chloro-5-hydroxymethyl-1-(2'-(1H-tetrazole-5-yl)biphenyl-4-yl) imidazole, potassium salt)을 발견하게 되었다. 이 Dup 753은 특별히 AII수용체중 혈압조절과 관련이 있는 AT1 수용체를 선택적으로 차단하는데, 효력은 ACE 저해제인 captopril과 유사하며, 경구흡수가 잘되고 지속시간이 길어 하루에 한번 먹는 경구제제로 개발되고 있는 것으로 알려져 있다. 이 Dup 753의 지속시간이 긴 것은 그 대사물인 Exp 3174에 기인하는 것으로 알려져 있으며, 대사체가 Dup 753에 비해 효력도 훨씬 더 높고 지속시간도 길어서, Dup 753은 일종의 prodrug적 개념이 들어있는 약물이라 할 수 있다.

• Journal of the Korean Applied Science and Technology
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• v.29 no.3
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• pp.429-434
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• 2012

A kind of Antihistamines, Azelastine HCl which known as modern H1-blockers, was synthesized by four step process using phthalic anhydride, 4-chlorophenylacetic acid, hydrazine 2HCl. The first step was the reaction of removing carboxyl group and hydroxyl group and the second step was saponification of 3-(4-chlorobenzylidene)phthalide. The third step was the nucleophilic addition reactions of primary amines and the fourth step was addition reaction of N-methyl-1-aza-bicyclo[3,2,0]heptane to 4-(4-chlorobenzyl)-1-(2H)phthalazinone. As a result, product was analyzed by FT-IR and $^1H$-NMR and could be obtained with a yield of 80%.

• Korean Journal of Veterinary Research
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• v.28 no.1
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• pp.17-22
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• 1988

평골근(平滑筋)으로 된 자궁근(子宮筋)은 자동성(自動性)을 가지고 있어서 신경지배(神徑支配)와 관계(關係)없이 근자체(筋自體)로 운동(運動)을 하게 된다. 그러나 이러한 자궁근(子宮筋)의 형태적(形態的) 및 기능적(機能的) 정상상태유지(正常狀態維持)에는 estrogen의 작용(作用)이 불가결(不可缺)한 요소(要素)로 되어 있으며 이 estrogen의 작용(作用)에 의하여 histamine의 자궁근(子宮筋)에 대한 (작용)作用이 수용체(受容體)의 어떤 기전에 의한 것인지를 알기 위하여 본(本) 연구(硏究)는 histamine과 5-hydroxytryptamine 및 이들 길항물질(拮抗物質)들의 자궁근(子宮筋) 운동성(運動性)에 대한 수축(收縮) 및 이완작용(弛緩作用)을 조사(調査)하였다. 자궁근(子宮筋)의 운동성(運動性)은 physiograph를 통(通)해 자궁수축(子宮收縮)의 빈도(頻度)와 크기를 기록하여 아래와 같은 결론(結論)을 얻었다. 1. 5-hydroxytryptamine에 대한 phenoxybenzamine의 억제작용(抑制作用)은 phenoxybenzamine의 길항성(拮抗性)의 결과(結果)이다. 2. histamine은 $H_1$-receptor를 통해서 흰쥐의 자궁평활근(子宮平滑筋)의 운동성(運動性)은 증가(增加)한다. 3. 반면 histamine은 $H_2$-receptor를 통해서는 자궁평활근(子宮平滑筋)의 운동성(運動性)을 이완(弛緩)시켰다. 4. 흰쥐의 자궁근(子官筋)에서 $H_2$-receptor 차단제(遮斷劑)가 $H_1$-receptor 차단제(遮斷劑)의 작용(作用)보다 더욱 강하였다.

• Korean Journal of Veterinary Research
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• v.38 no.3
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• pp.525-534
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• 1998

신장 근위세뇨관세포들은 사구체에서 여과된 물질의 재흡수, 분비 및 대사에 관여하는 여러 호르몬들의 수용체들을 가지고 있다. 이들중에서 norepinephrine(NE)과 angiotensin II(ANG II)는 $Na^{+}/H^+$ 상호운반계를 조절함으로써 혈압조절에 관여하는 것으로 알려져 있으나 이들의 상호관계에 대해선 연구보고가 많지 않다. 본 연구는 초대배양한 토끼신장 근위세뇨관세포를 이용한 $Na^+$ uptake 실험을 통하여 NE이 어떠한 수용체를 통하여 $Na^{+}/H^+$ 상호운반계를 조절하는지 그리고 이러한 작용에 있어서 NE과 ANG II의 상호관계를 알아보고자 실시하였다. NE(>$10^{-9}M$)은 $Na^+$ uptake를 유의성 있게 증가시켰다($10^{-9}M$ NE : $27{\pm}4%$ increase vs. Control;p < 0.05). $\alpha$ 길항제(phentolamine, $10^{-10}M$)는 NE($10^{-9}M$)에 의해 유도된 $Na^+$ uptake를 유의성 있게 차단하였으나 (phentolamine+NE : $29{\pm}5%$ inhibition vs. NE ; p〈 0.05), ${\alpha}_1$ (pra-zosin, $10^{-10}M$) 및 ${\alpha}_2$ 길항제(yohimbine, $10^{-10}M$)는 부분적으로 차단하였다. ${\beta}$ 길항제(propra-nolol, $10^{-10}M$)도 역시 NE에 의해 유도된 $Na^+$ uptake를 유의성 있게 차단하였으나(propranolol+NE : $24{\pm}6%$ inhibition vs. NE ; p< 0.05), ${\beta}_1$(atenolol, $10^{-10}M$) 및 ${\beta}_2$ 길항제(butoxamine, $10^{-10}M$)는 부분적으로 차단하였다. 이러한 결과들은 NE에 의해 유도된 $Na^+$ uptake 증가작용은 ${\alpha}$(${\alpha}_1$ 및 ${\alpha}_2$ )와 ${\beta}$(${\beta}_1$ 및 ${\beta}_2$) 수용체 모두를 통하여 일어난다는 것을 시사해주고 있다. ANG II($10^{-11}M$) 또는 NE(${\alpha}_1$, ${\alpha}_2$, ${\beta}_1$, ${\beta}_2$ 작동제) 단독처리군의 $Na^+$ uptake는 대조군에 비해 유의성 있게 증가하였으나 (ANG II : $23{\pm}9%$ increase vs. Control; p < 0.05), 병합처리시 상승작용은 나타나지 않았다. ${\alpha}$ 또는 ${\beta}$ 길항제 처리시 NE 및 ANG II에 의해 유도되었던 $Na^+$ uptake 증가는 유의성 있게 차단되었다(phentolamine+NE+ANG II : $25{\pm}3%$ inhibition, propranolol+NE+ANG II : $24{\pm}6%$ inhibition vs. NE+ANG II, respectively ; p〈 0.05). 이 결과들은 $Na^+$ uptake에 있어서 ${\alpha}$(${\alpha}_1$ 및 ${\alpha}_2$)와 ${\beta}$(${\beta}_1$ 및 ${\beta}_2$) 수용체와 ANG II의 관련성을 시사해 준다. 결론적으로 토끼 신장 근위세뇨관세포에서 NE은 ${\alpha}_1$, ${\alpha}_2$, ${\beta}_1$ 및 ${\beta}_2$ 수용체를 통하여 $Na^+$+ uptake를 증가시켰으며 이들 수용체는 ANG II $Na^+$ uptake 증가작용에 관여하였다.

• Horticultural Science & Technology
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• v.33 no.4
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• pp.492-500
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• 2015

Our previous report demonstrated successful isolation of soil-borne bacteria that suppressed the potential of Rhizoctonia solani AG2-2 (IV) causing turfgrass large patch disease when applied to Korean lawngrass (Zoysia japonica). The current study aimed to uncover the mechanisms of this antagonism of Rhizoctonia solani and to define culture conditions for the isolated microbes. We found that two Bacillus isolates, I-009 and FRIN-001-1 strains, produced cellulase and siderophore, but not chitinase, while the Pseudomonas YPIN-022 strain was found to release only siderophore, implying that three antagonistic bacteria commonly interrupt Fe uptake by the large patch pathogen. The I-009 and FRIN-001-1 isolates grew best at 35 and $30^{\circ}C$ in growth medium of pH 5 to 8 for 32 and 28 h, respectively, while optimum growth for the YPIN-022 strain was found at $35^{\circ}C$ at pH 5 to 9 for 24 h. Good growth of I-009 and YPIN-022 over 24 h was obtained in M9 minimal medium supplemented with 1% sucrose, 0.5% yeast extract and 0.1% potassium chloride. FRIN-001-1 grew well in M9 medium with 1% mannitol, 0.5% yeast extract and 0.1% potassium phosphate dibasic.

• Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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• v.16 no.11
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• pp.7575-7581
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• 2015

Corticotropin-releasing factor(CRF), one of the stress driven neuropeptides, was widely proposed to influence hair loss and re-growth. For the development of receptor antagonists, the screening system based on intracellular calcium signal process was developed and optimized. The aequorin parental cells were transfected with CRF1 receptor and alpha 16 promiscuous G protein cDNA to establish HEK293a16/hCRF1, a stable cell line for the human CRF1 receptor. In HEK293a16/hCRF1 cells, the range of sauvagine dose response was 12-fold higher($EC_{50}:15.21{\pm}1.83nM$) than in the transiently expressed cells, hence essential conditions for the antagonist screening experiments such as the robust signals and high solvent tolerance were secured. The standard antagonists for the CRF1 receptor, antalarmin and CP154526, resulted $IC_{50}$ values of $414.1{\pm}5.5$ and $290.7{\pm}1.9nM$, respectively. Similar results were presented with frozen HEK293a16/hCRF1 cells. Finally, our HEK293a16/hCRF1 cells with the aequorin based cellular functional assay can be a model system for the development of functional cosmetics and modulators that can have a clinical efficacy on hair re-growth.

• Proceedings of the Korean Society of Applied Pharmacology
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• 1992.05a
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• pp.28-28
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• 1992

브라디키닌은 체내에서 강력한 혈관 확장 작용을 일으키는 autacoid(local hormone)로서 혈압의 항상성 유지, 모세혈관 투과성 증진, 염증 및 통증 반응 등에 관여하고 여러 장관 평활근을 수축시킨다. 또한 septic 혹은 endotoxic shock의 여러 원인 물질로도 생각되어진다. 최근 rhinovirus로 인한 감기의 제증상 원인 물질로도 브라디키닌이 주목을 받고있다. 이와같이 브라디키닌온 다양한 질병에 있어 중요한 원인 물질로 여겨지므로 브라디키닌 길항제들은 한두 질병의 치료제로 개발될 가능성이 높음이 강력히 제시되고 있는 실정이다. 이의 개발을 위해서 브라디키닌 수용체에 대한 연구는 필수적이라고 할 수 있다. 본 연구는 두 부분으로 나누어 진행중인데 첫째, 이제까지 보고된 브라디키닌 길항 물질들은 대부분이 브라디키닌의 특정 아미노산 잔기를 치환시킨 펩타이드 유도체로서 이들을 경구 투여시 peptidase어 의하여 쉽게 분해되고 또한 부분적인 효능제 활성을 갖는 불리한 점을 감안하여, 비펩타이드성 브라디키닌 길항제를 개발할 목적으로 한방 및 민간에서 자주 사용되어온 생약중에 브라디키닌 작용에 선택적 길항효과가 있는 물질을 검색한 바 활성을 보인 황금으로부터 작용 성분을 추적중에 있다. 둘째, 브라디키닌 수용체를 순수하게 분리 정제하기 위한 첫 단계로서 이 수용체의 결합시험(binding assay) 방법을 확립하고 더불어 여러 조직내(흰쥐의 여러 기관, 토끼 및 사람의 신장)의 브라디키닌 수용체의 분포를 파악하는 일이다. 횐쥐 조직의 실험 결과로부터 신장에 브라디키닌 수용체가 많이 분포함을 확인되었고 향후 토끼 신장으로부터 동수용체를 분리하고자 한다. 또한 토끼 신장의 근위세뇨관일차배양세포을 이용하여 브라디키닌의 신장에서의 작용기전도 살펴보고 있다.+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$) 수용액 메디움에서의 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 Dowex 1-X8, Cl$^{-}$ 수지에 대한 흡착은 역시 어떤 메디움에서도 Cd(II) 흡착이 제일 크며, 다음이 Zn(II) 이고 착이온을 형성않는 Mg(II)이 제일 작았다. 한편 메디움 종류별 D값의 크기순위는 H$^{+}$>K$^{+}$> $Na^{+}$>NH$_{4}$$^{+}$이였다. 메디움의 종류에 따라 D값의 차이가 나는 것은 금속이온의 착이온 형성과 금속이온의 용액내에서의 이온종의 상태와 관련이 있다고 생각된다. 마. MCl(M:K$^{+}$, $Na^{+}$, NH$_{4}$$^{+}$ 및 H$^{+}$)과 MNO$_{3}$ 용리액에 의한 Cd(II), Mg(II) 및 Zn(II)의 용리는 예상한 바와 같이 MCl에서 작은 Dv 값을 갖는데, 이것은 CdCl$_{4}$$^{2-}$ 착이온을 형성하거나 ZnCl$_{4}$$^{2-}$ , ZnCl$_{3}$$^{-}$같은 이온과 MgCl$^{+}$, MgCl$_{2}$같은 이온종을 형성하기 때문인것 같다. 한편 어떠한 용리액에서던지 NH$_{4}$$^{+}$의 경우

• Journal of Life Science
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• v.20 no.6
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• pp.831-837
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• 2010

KR-31125 (2-butyl-5-dimethoxymethyl-6-phenyl-7-methyl-3-[[2'-(1H-tetrazol-5-yl)biphenyl-4-yl]methyl]-3H-imidazo[4,5-b]pyridine) is a potent inhibitor of angiotensin II type 1 ($AT_1$) receptors in human recombinant $AT_1$ receptors and rabbit aorta. These in vitro studies revealed that KR-31125 inhibited specific [$^{125}I$] [$Sar^1$, $Ile^8$]-angiotensin II binding to human recombinant $AT_1$ receptors in a concentration dependent manner with an $IC_{50}$ value of $19.72{\pm}2.65$ nM. However, no interaction with $AT_2$ receptors was detected as displayed by the competition binding of [$^{125}I$] CGP 42112A to human recombinant $AT_2$ receptor. The binding action was also confirmed as a competitive mode that was identical to the previously studied compound, losartan. In addition, KR-31125 caused a nonparallel shift to the right in the concentration response curves to angiotensin II with a 30-80% decrease in the maximum contractile responses ($pK_B$: 7.63). Compared to the previous studies with losartan that showed a parallel right shift in the maximum contractile responses to AII ($pA_2$: 7.59), KR-31125 presented a different mode of action with a similar potency to losartan. These results demonstrate that KR-31125 is a highly potent and $AT_1$ selective angiotensin II receptor antagonist that can be applied to the fields of new diagnostic and research tools with upcoming in vivo study results.

• YAKHAK HOEJI
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• v.35 no.5
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• pp.368-371
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• 1991

For the development of new antiulcer agents 5, 6-dihydroimidazo[2, 1-b]- thiazoles substituted at the 3-position are sythesized. Thus, the reaction of 3-chloromethyl-5, 6-dihydroimidazo[2, 1-b]thiazole(2) with thiourea and subsequently with 3-chloro-propionitrile gives 3-[3-[5, 6-dihydroimidazo[2, 1-b]thiazolyl]methylthio]propionitrile(4), which by partial alcoholysis with methanol is converted into methyl-3-[3-[5, 6-dihydro-imidazo[2, 1-b]thiazoyl]methylthio]propionimidate(5) . This compound(5) is treated finally with sulfamide or sulfonamides. 3-[3-[5, 6-dihydroimidazo[2, 1-b]thiazoyl]methylthiol-N$^{2}$-sulfamoyl-propionamidine(6) inhibited gastric acid secretion (45%) when administered intraduodenally (100 mg/kg) to pylorus-ligated rats.