본 연구는 시판되는 증자 녹차의 에탄을 추출물과 에탄을 추출물로부터 분획한 분획물로부터 최근 병원성 식중독균으로서 문제시되고 있는 E. coli O157:H7균에 대한 항균성을 검색하였다. 에탄을 추출물로부터 그 유효성분을 조사하기 위하여 핵산, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 물로서 분획한 후 MIC를 검색한 결과 에틸아세테이트 분획물이 $500{\mu}g/ml$의 농도로 가장 강한 활성을 나타내었으며, 헥산 분획물은 활성이 없었다. 가장 강한 항균력을 나타낸 에틸아세테이트 분회물의 농도별 항균력 및 pH에 대한 영향을 조사한 결과 균종에 따라 차이는 있지만 3균주 모두 $250-2000{\mu}g/disk$농도에서 생육이 억제되었다. 또한 E. coli O157:H7균은 산성조건에서는 생육이 가능하지만 pH 10 이상의 강한 알칼리 조건에서는 생육이 크게 억제되었다. $35^{\circ}C$에서 E. coli O157:H7 933과 932균에 대한 에틸아세테이트 분획물의 농도별 생육저해 효과를 검색한 결과 두 균주 모두 $250{\mu}g/ml,\;500{\mu}g/ml$의 농도에서는 12시간 이후부터 생육하기 시작하였으나 $1000{\mu}g/ml$의 농도에서는 생육이 크게 저해되었다.
The objective of this study was to evaluate the effect of soluble carbohydrates (glucose, cellobiose), pH (6.0, 6.5, 7.0), and rumen microbial growth factors (VFA, vitamins) on biohydrogenation of linoleic acid (LA) by mixed rumen fungi. Addition of glucose or cellobiose to culture media slowed the rate of biohydrogenation; only 35-40% of LA was converted to conjugated linoleic acid (CLA) or vaccenic acid (VA) within 24 h of incubation, whereas in the control treatment, 100% of LA was converted within 24 h. Addition of VFA or vitamins did not affect biohydrogenation activity or CLA production. Culturing rumen fungi at pH 6.0 slowed biohydrogenation compared with pH 6.5 or 7.0. CLA production was reduced by pH 6.0 compared with control (pH 6.5), but was higher with pH 7.0. Biohydrogenation of LA to VA was complete within 72 h at pH 6.0, 24 h at pH 6.5, and 48 h at pH 7.0. It is concluded that optimum conditions for biohydrogenation of LA and for CLA production by rumen fungi were provided without addition of soluble carbohydrates, VFA or vitamins to the culture medium; optimum pH was 6.5 for biohydrogenation and 7.0 for CLA production.
The CO substitution reactions in the complex, $Cp^*(C_5H_7)$CrCO with $PR_3(PR_3=PMePh_2,\;P(OCH_3)_3,\;PMe_2Ph)$ were investigated spectrophotometrically at various temperatures. For the reaction rates, it was suggested that the CO substitution reaction took place by first-order (dissociative) pathway. Activation parameters in decaline are ${\Delta}H^{\neq}= 21.99{\pm}2.4$ kcal/mol, ${\Delta}S^{\neq}= 8.9{\pm}7.1$ cal/mol·k. Unusually low value of ${\Delta}S^{\neq}$, suggested an ${\eta}^5-S{\to}\;{\eta}^5$-U conversion of the pentadienyl ligand. At various temperature, the rates of reaction for the Cp(pdl)CrCO complexes increase in the order $Cp^*(C_5H_7)$-CrCO < Cp$(C_5H_7)$CrCO < Cp(2,4-$C_5H_{11}$)CrCO, which can be attributed to the usual steric acceration or electronic influence for the ligand substitution of metal complexes. This suggestion was confirmed by the extended-Huckel molecular orbital (EHMO) calculations, which revealed that the energy of $[Cp^*(U-C_5H_7)Cr]^{\neq}$ transition state is about 4.93 kcal/mol lower than that of [Cp(S-$C_5H_7)Cr]^{\neq}$ transition state, and the arrangement of the overlap populations between Cr and the carbon of CO is $Cp^*(C_5H_7)$CrCO > Cp($C_5H_7$)CrCO > Cp(2,4-$C_7H_{11}$)CrCO.
The inhibitory effect of various organic acids on the growth and survival of Escherichia coli O157:H7 in tryptic soy broth with 0.6% yeast extract at 37$^{\circ}C$ or 4$^{\circ}C$ was determined. Minimal inhibitory pHs of acetic acid, citric acid, fumaric acid, hydrochloric acid and lactic acid were 5.0, 4.0, 4.5, 4.0 and 4.5, respectively. Acetic acid (0.012 m) showed the strongest antimicrobial activity, based on the pH values or equivalent molar concentrations, followed by lactic acid (0.0006 M), fumaric acid (0.004M) and citirc acid (0.004 M), respectively, E. coli O157:H7 with an initial inoculum of {TEX}$10^{7}${/TEX} CFU/ml and {TEX}$10^{5}{/TEX} CFU/ml in tryptic soy broth supplemented with 0.6% yeast extract, acidified to target pH with citric, fumaric and lactic acids at 37$^{\circ}C$, was completely inactivated after 7 d and 5 d incubation, respectively, except for the acetic acid (9 d). The bactericidal effect decreased at the same pH when the incubation temperature a was reduced from 37$^{\circ}C$ to 4$^{\circ}C$. The pH values of 0.2% acetic (pH 5.1), 0.6% citric (pH 4.2) and 0.4% lactic acid (pH 4.3) in TSBYE were almost correspondent to the minimal inhibitory pH values on E. coli O157:H7 of acetic (pH 4.0), citric (pH 4.0) and lactic acids (pH 4.5).
In batch culture for Poly(vinyl alcohol) (PVA)-degrading enzyme (PVAase) production by a mixed culture, higher pH (pH 7.5) was favorable for PVAase production at the prophase of cultivation, but lower pH (pH 7.0) was favorable at the anaphase. This situation was caused by the fact that the optimum pH for different key enzymes [PVA dehydrogenase (PVADH) and oxidized PVA hydrolase (OPH)] production is various. The activity and average specific production rate of PVADH reached the highest values at constant pH 7.5, whereas those of OPH appeared at pH 7.0. A two-stage pH control strategy was therefore developed and compared for its potential in improving PVAase production. By using this strategy, the maximal PVAase activity reached 2.05 U/ml, which increased by 15.2% and 24.2% over the fermentation at constant pH 7.5 and 7.0.
Prophylactic effects of Bifidobacterium longum HY8001, Korean isolate, against Escherichia coli O157:H7 and Salmonella typhimurium DT104 enteric infection were examined at four groups of specific pathogen free(SPF)-ICR mouse for each pathogen. B. longum HY8001+B. typhimurium DT104+B. longum HY8001(BL+ST+BL) group and B. longum HY8001+E. coli O157:H7+B. longum HY8001(BL+E+BL) group were fed with B. longum HY8001 before and after E. coli O157:H7 or s. typhimurium DT104 challenge, while B. longum HY8001+S. typhimurium DT104(BL+ST) and B. longum HY8001+e. coli O157:H7(BL+E) groups were fed with B. longum HY8001 only before E. coli O157:H7 or S. typhimurium DT104 challenge. E. coli O157:H7(E) and S. typhimurium DT104(ST) groups were challenged with each pathogen without B. longum HY8001 administration and control groups were administered with phosphate buffered solution(PBS). After the oral administration with B. longum HY8001(109cfu), th emice were challenged with E. coli O157:H7(2$\times$1010cfu) or S. typhimurium DT104(108cfu) and the mortality rate and the fecal shedding of challenged pathogen were also examined define the reactivity of the B. longum HY8001. Production of toxin neutralizing substance(s) of B. longum HY8001 was determined by cell cytotoxicity assay using Vero cells. Fecal shedding of th eS. typhimurium DT104 was significantly decreased in BL+ST+BL group fed with B. longum HY8--1 before and after challenge(p<0.05), while the fecal shedding s of S. typhimurium DT104 in BL+ST and St groups remained more than 106cfu. the protective effect of the B. longum HY8001 against E. coli O157:H7 was significantly high only in BL+E+BL group fed with b. longum Hy8001 before and after E. coli O157:H7 challenge from the result of fecal E. coli O157:H7 isolation rate, mortality rate, and intestinal contents culture to detect E. coli O157:H7. the mortality rate of the BL+e and E groups. The cytopathic effect (CPE) of the Vero cytotoxin (Shiga like toxin I & II) in Vero cell was neutralized in B. longum HY8001 culture supernatant added wells which indicate the presence of soluble Vero cytotxin neutralizing substance(s) in B. longum HY8001 culture suprnatant.
Imaging ellipsometry (IE) for detection of binding of Escherichia coli O157:H7 (E. coli O157:H7) to an immunosensor is reported. A protein G layer, chemically bound to a self-assembled layer of 11-mercaptoundecanoic acid (11-MUA), was adopted for immobilization of monoclonal antibody against E. coli O157:H7 (Mab). The immobilization of antibody was investigated using surface plasmon resonance. To fabricate antibody spots on a gold surface, protein G solution was spotted onto the gold surface modified with an 11-MUA layer, followed by immobilizing Mab on the protein G spot. Ellipsometric images of the protein G spot, the Mab spot, and Mab spots with binding of E. coli O157:H7 in various concentrations were acquired using the IE system. The change of mean optical intensity of the Mab spots in the ellipsometric images indicated that the lowest detection limit was $10^3$CFU/ml for E. coli O157:H7. Thus, IE can be applied to an immunosensor for detection of E. coli O157:H7 as a detection method with the advantages of allowing label-free detection, high sensitivity, and operational simplicity.
Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 is a major foodborne pathogen causing severe disease in humans worldwide. Healthy cattle are a reservoir of E. coli O157:H7, and bovine food products and fresh produce contaminated with bovine waste are the most common sources for disease outbreaks in the United States. E. coli O157:H7 also survives well in the environment. The abilities to cause human disease, colonize the bovine gastrointestinal tract, and survive in the environment require that E. coli O157:H7 adapt to a wide variety of conditions. Three major virulence factors of E. coli O157:H7 have been identified including Shiga toxins, products of the pathogenicity island called the locus of enterocyte effacement, and products of the F-like plasmid pO157. Among these virulence factors, the role of pO157 is least understood. This review provides a board overview of E. coli O157:H7 with an emphasis on pO157.
Objectives : The aim of this study was to examine the effects of electroacupuncture(EA) at the $H_7$ (Shinmun) on normal humans using power spectral analysis. Methods : EEG power spectrum exhibit site-specific and state-related differences in specific frequency bands. In this study, power spectrum was used as a measure of complexity. 32 channel EEG study was carried out in 9 subjects (9 males; age=25,8 years). Results : In alpha band, the power values at Fp2 channels(p<0.05) during the $H_7-acupoint$ treatment significantly were decreased. In beta band, the power values at Fp1, Fp2 channels(p<0.05) during the $H_7-acupoint$ treatment significantly were decreased. In delta and theta band, the power values at the $H_7-acupoint$ treatment significantly was increased than the before-acupuncture treatment. Conclusions : This results suggest that electroacupuncture at the $H_7$ is significantly in beta band of EEG.
When the human parathyroid hormone (hPTH) is expressed as a secretory product in S. cerevisiae, most of the secreted hPTH is internally cleaved by endoproteolytic processing. To investigate whether the yeast endoproteases such as Kex2p, Yap3p, and Mkc7p are involved in the endoproteolytic processing of hPTH in S. cerevisiae, hPTH was expressed in S. cerevisiae mutants deficient in one or two of the following well-known endoproteases such as Kex2p, Mkc7p, and Yap3p. Among these mutants, the yap3-disrupted(yap3$\Delta$) and yap3/mkc7-disrupted (yap3Δmkc7$\Delta$) yeasts showed a significant reduction in the extent of hPTH proteolysis. In contrast, the mkc7-disrupted (mkc7$\Delta$) yeast did not reduce the proteolysis of hPTH as compared to the wild type. This suggests that Mkc7p is not involved in the endoproteolytic processing of hPTH. It was also found that the kex2-disrupted (kex2$\Delta$) mutant was not able to secrete a detectable amount of hPTH.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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