Park, Jae-Hwan;Guk, Sang-Mee;Shin, Eun-Hee;Kim, Hyo-Jin;Kim, Jae-Lip;Seo, Min;Park, Yun-Kyu;Chai, Jong-Yil
Parasites, Hosts and Diseases
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v.45
no.1
s.141
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pp.39-44
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2007
A new endemic focus of Gymnophalloides seoi infection has been discovered on Aphae Island(Shinan-gun, Jeollanam-do), Republic of Korea. This area, which is referred to as Bokyong-ri, is a small seashore village located in the northern portion of the island. Fecal samples were collected from a total of 57 residents and examined by the Kato-Katz and formalin-ether sedimentation techniques. Helminth eggs were detected in 37 samples(64.9%); 33 samples were positive for G. seoi eggs(57.9%), 4 for Pygidiopsis summa(7.0%), 13 for other heterophyids(22.8%), 1 for Clonorchis sinensis(1.7%), and 1 for Trichuris trichiura(1.7%). Women(70.4%) revealed higher rates of G. seoi infection than did men(46.7%), and individuals older than 50 years of age also evidenced higher rates of G. seoi infection than in other age groups(P<0.05). In worm collection from 13 G. seoi egg positive cases, G. seoi (total 86,558 specimens), Heterophyes nocens(278), Stictodora sp.(10), Heterophyopsis continua(3), P. summa(3), and unidentified flukes(42) were collected. Oysters, the source of G. seoi infection, were collected from an area proximal to the village and 50 were examined for metacercariae; 47(94%) were found infected and the observed metacercarial density was $9.5{\pm}8.9$ per oyster. The results of this study indicate that Bokyong-ri is a new endemic area of G. seoi infection, with high rates of infection in humans and oysters.
Gymnophalkides seoi has drawn medical attentions since the discovery of the first human case and a highly endemic area on a southwestern coastal island of Shinan- gun, Korea. Marine bivalves especially oysters were strongly suspected as the source of infection. In this study the oysters, Crassostrea girns, naturally produced (rom the endemic area were examined whether they contain gymnophallid metacercariae. All of 50 oysters examined were infected with the metacercaviae of a gymnophallid, with the metacercarial density per oyster of 610 on average (2-4,792 in range). Later they were identified as G. seoi by obtaining adult worms from experimental mice. The metacercariae were unencysted, and firmly attached on the mantle surface of the oysters with their oral sucker. In sectioned specimens they were equipped with the ventral pit, a peculiar organ of the genus Gymophalloides, and non-muscular genital pore which was connected dorsally to the seminal vesicle. The seminal vesicle was in a great majority mono-sac. By this study, it has been confirmed that the oyster is a 2nd intermediate host of G. seoi as well as the major source of human infection with this fluke.
Studies on Gymnophalloides seoi (Digenea: Gymnophallidae) and human infections are briefly reviewed. This minute intestinal fluke was first discovered from a Korean woman suffering from acute pancreatitis and gastrointestinal troubles. It was described as a new species by Lee, Chai and Hong in 1993. The southwestern coastal village where the patient resided was found to be a highly endemic area, and additional endemic areas have been identified. The parasite is very small, 0.33-0.50 mm long and 0.23-0.33 mm wide. and characterized by the presence of a ventral pit. The first intermediate host remains unknown, but the second intermediate host has been found to be the oyster Crassostrea gigas. Man and the Palearctic oystercatcher Haematopus ostralegus have been shown to be natural definitive hosts , and wading birds including the Dentish plover Charadrius alexandrinus are highly susceptible to experimental infection. Gerbils, hamsters, cats, and several strains of mice were also susceptible laboratory hosts. In experimentally infected mice, the parasites inhabit the small intestine, pinching and sucking the root of villi with their large oral suckers, but they did not invade beyond the mucosa in immunocompetent mice. However, they were found to invade the submucosa in immunosuppressed mice. Human G. seoi infections have been found in at least 25 localities; 23 islands on the Yellow Sea or the South Sea, and 2 western coastal villages. The highest Prevalence was found in a village on Aphaedo. Shinan-fun (49% e99 Positive rate) : other areas showed 0.8-25.3% prevalence. Infected people complained of variable degrees of gastrointestinal troubles and indigestion. The infection can be diagnosed by recovery of eggs in the feces; however, an expert is needed to identify the eggs. Praziquantel, 10mg/kg in single dose, is effective for treatment of human infections. Eating raw oysters in endemic areas should be avoided.
Four feral cats and a raccoon dog purchased from a local collector on Aphaedo Island, Shinan-gun, where human Gymnophalloides seoi infections are known to be prevalent, were examined for their intestinal helminth parasites. From 2 of 4 cats, a total of 310 adult G. seoi specimens were recovered, Other helminths detected in cats included Heterophyes nocens (1,527 specimens), Pygidiopsis summa (131), Stictodora fuscata (4), Acanthotrema felis (2), Spirometra erinacei (15), toxocarids (4), and a hookworm (1). A raccoon dog was found to be infected with a species of echinostome (55), hook-worms (7), toxocarids (3), P. summa (3), and S. erinacei (1). No G. seoi was found in the raccoon dog. The results indicate that feral cats and raccoon dogs on Aphaedo are natural definitive hosts for intestinal trematodes and cestodes, including G. seoi, H. nocens, and S. erinacei, It has been first confirmed that cats, a mammalian species other than humans, play the role of a natural definitive host for G. seoi on Aphaedo Island.
Follow-up studies have been conducted every three years on the endemicity of Gymnophalloides seoi infection in a small coastal village of Chollanam-do (Province), Korea, since it was first known as an endemic area in 1994. Special attention was given to its egg laying capacity in the human host. In fecal examinations, the overall helminth egg and/or cyst positive rate was 78.7% (74/94) in 1997 and 76.6% (82/107) in 2000. Among them G. seoi eggs showed the highest rate; 71.3% (67/94) in 1997 and 72.0% (77/107) in 2000. The average number of eggs per gram of feces (EPG) was 1,015 in 1997, while a reduced rate of 353 was observed in 2000. In 1997, total of 320,677 adult flukes of G. seoi (av. 10,344/person, 94-69,125 in range) were collected from the diarrheic stools of 31 treated patients. The EPG/worm obtained from 21 cases ranged from 0.04 to 0.77 (av. 0.23), suggesting density-dependent constraints on the worm fecundity. The relationship between the worm burden (X) and EPG/worm (Y) can be expressed as $Y=0.42{\cdot}e{\cdot}^{-l.2x}(r=0.49)$. The results showed that G. seoi infection is persistently endemic in this village.
The intestinal histopathology and in situ postures of Gymnophalloides seoi (Digenea: Gymnophallidae) were studied using C3H/HeN and C57BL/6 mice as experimental hosts; the effects of immunosuppression were also observed. The metacercariae isolated from naturally infected oysters, 300 or 1,000 in number, were infected orally to each mouse, and the mice were killed at days 3-21 post-infection (PI). In immunocompetent (IC) mice, only a small number of flukes were found in the mucosa of the duodenum and jejunum during days 3-7 PI, with their large oral suckers pinching and sucking the root of villi. The intestinal mucosa showed mild villous atrophy crypt hyperplasia, and inflammations in the villous stroma and crypt, with remarkable goblet cell hyperplasia. These mucosal changes were almost restored after days 14-21 PI. In immunosuppressed (IS) mice. displacement as well as complete loss of villi adjacent to the flukes was frequently encountered, otherwise the histopathology was generally mild, with minimal goblet cell hyperplasia. In these mice, numerous flukes were found, and it seemed that they were actively moving and rotating in situ. Several flukes were found to have invaded into the submucosa, almost facing the serosa. These results indicate that in IC mice the intestinal histopathology caused by G. seoi is generally mild, and the flukes do not penetrate beyond the mucosa, however, in IS mice. the flukes can cause severe destruction of neighboring villi. and some of them invade into the submucosa.
The growth and development of Gymnophalloides seoi were studied in C3H/HeN mice and effects of immunosuppression of the host on the worm development were observed. Two hundred metacercariae of G. seoi were orally administered to each mouse, and worms were recovered on days 1, 3, 5, 7, 14 and 21 post-infection (PI). The worm recovery rate was significantly higher in immunosuppressed (ImSP) mice than in immunocompetent (ImCT) mice except on days 1 and 3 PI. The worms attained sexual maturity by day 3 PI with eggs in the uterus, and worm dimensions and the number of uterine eggs continuously increased until day 14 PI in ImSP mice. Worms recovered from ImSP mice were significantly larger in size than those from ImCT mice on days 1 and 3 PI, and the number of uterine eggs was significantly larger in ImSP mice on days 5 and 7 PI. Genital organs such as the ovary, testes, and vitellaria, that were already developed in the metacercarial stage. grew a little in size until day 14 PI. The results show that the C3H/HeN mouse is, though not excellent, a suitable laboratory host for G. seoi.
Gymnophclloides seoi is a human intestinal trematode prevalent on southwestern islands in Korea. In the present study, we investigated whether G. seoi metacercariae can grow and develop into adults by in vitro cultivation. The metacercariae were obtained from naturally infected oysters, and cultured in uitro for 5 days under three conditions; $37^{\circ}C/5%{\;}CO_2,{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2,{\;}or{\;}41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$, in NCTC 109 complete media containing 20% FBS and 1% antibiotics-antimycotics. The degree of worm growth and development was compared with that grown in uiuo of C3H mice. The length of the worms cultivated in uitro was $200-300{\;}\mu\textrm{m}$, not significantly different from metacercariae, whereas the length of the worms recovered from C3H mice was significantly larger, $300-400{\;}\mu\textrm{m}$. The worms produced eggs when grown in C3H mice or cultured in vitro for 2 days under $41^{\circ}C/8%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/5%{\;}CO_2$, but not when cultured under 37$^{\circ}C/5%{\;}CO_2$. Among the in vitro conditions, $41^{\circ}C/15%{\;}CO_2$ was best for egg Production, although the number of eggs was about half of worms obtained from C3H mice. In conclusion, in vitro cultivation of G. semi metacercariae into egg-pioducing adults was partially successful under culture conditions of $41^{\circ}C/5%{\;}CO_2{\;}or{\;}41^{\circ}C/8%{\;}CO_2$.
An epidemiological survey was performed to know the infection status of oysters with Gwmnophclloides seoi metacercariae in 7 islands of the West Sea known as the habitat of paleartic oystercatchers . Hcemntopus ostralegus osculans, in Korea. The surveyed areas were Aphaedo (Shinan-gun. Chollanam-do) Jangiado, Sonyudo and Munyodo (Okdo-myon, Kunsan-shi, Chollabuk-do), Yubudo (Changhang-up, Sochon-gun Chungchongnam-do), and Polumdo and Chumoondo (Sodo-myon, Kangwha-gup, Inchon ski). The oysters collected from Aphaedo, the known endemic focus, were examined monthly from August 1995 to October 1996 for observation of any seasonal variation of the metacercarial density. The average metacercarial burden was 761-2,077 by month, but the seasonal variation of the metacercarial density was not obvious. A total of 54 metacercariae was detected in 63 oysters collected from Yubudo. Out of 30 oysters from Sonyudo, 25 (83.3%) were infected with 1-66 metacercariae (12.6 in average). All of 50 oysters (100%) from Munyodo were infected with 3-162 metacercariae (53.5 in average), Only 4 metacercariae were detected in 100 oysters from Chumoondo. However, no metacercariae were found in 55 oysters from .Tangjado and 50 oysters from Polumdo. From the above results, it was confirmed that G. seoi is still highly prevalent in oysters from Aphaedo, and several islands of the West Sea known as the habitats of paleartic oystercatchers are new endemic areas of this fluke.
A transmission electron microscopic study was performed on the ultrastructure of the tegumental layer of GymophoLloines seoi (Digenea: Gymnophallidae) metacercarlae and adults. The metacercariae were obtained from naturally infected oysters, Crcssosoea gigas, and the adults from experimentally infected C3H mice. The tegumental layer generally revealed a small number of foldings, numerous small vacuoles, sines, and muscle bundles. Beneath the muscle layer, nuclei of the tegumental cells were located. There was little difference in the structure of the tegument between the metacercariae and adults. The oral sucker, having well-developed muscle layers, showed a similar structure to the ventral sucker except numerous foldlngs in the ventral sucker. The ventral pit was surrounded by a thin spcpiu layer, where a number of microtubules and mitochondria were seen. Around the ventral pit located well-developed circular and longitudinal muscles. The results showed that the ultrastructure of the tegumental layer of G. seoi metacercariae and adults revealed little difference from other trematodes in general. The ventral pit, a peculiar structure of this trematode, seems to function as a sphincter or an accessory adhesive organ.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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