Porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) strain Chinju99, which was previously isolated from piglets suffering from severe diarrhea was used to characterize the membrane (M) protein gene to establish the molecular information, and the results will be useful in elucidating concepts related to molecular pathogenesis and antigenic structures of PEDV isolates. The Chinju99 M gene generated by reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) consisted of 681 bases containing 22.3% adenine, 22.3% cytosine, 23.1% guanine and 32.3% thymine nucleotides, and the GC content was 45.4%. It had some nucleotide mismatches from M gene of other PEDV strains, such as CV777, Br1/87, KPEDV-9, JMe2, JS2004-2 and LJB-03 with 97-99% nucleotide sequence homology to these strains. Also, it encoded a protein of 226 amino acids, which had some mismatches from those of CV777, Br1/87, KPEDV-9, JMe2, JS20004-2 and LJB-03, as the amino acid sequence homology showed a 97-98% to these strains. The Chinju99 had a very close relationship to the Japanese strain JMe2 for the nucleotide and amino acid sequences of the M gene. The amino acids predicted from Chinju99 M gene consisted of mostly hydrophobic residues and contained three potential sites for asparagine (N)-linked glycosylation, two serine (S)-linked phosphorylation sites by protein kinase C, and two S- or threonine (T)-linked phosphorylation sites by casein kinase II.
To provide information for the molecular pathogenesis and antigenic structures of Korean isolates of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), the small membrane (sM) protein gene of Chinju99 strain, which was previously isolated from piglets suffering from severe diarrhea was characterized and further analyzed with other PEDV strains. The sM gene of Chinju99 generated by reverse transcription and polymerase chain reaction had a single open reading frame with 231 bases consisting of 24.2% adenine, 18.6% cytosine, 18.1% guanine and 39.0% thymine nucleotides. Nucleotide sequence of the gene revealed 97.8% homology to those of Belgian strain CV777 and British strain Br1/87, and 97.0% to Chinese strain LZC. The gene encoded a protein with 76 amino acids, and putative amino acid sequence of the gene revealed 98.7% homology to those of CV777 and Br1/87, and 96.1% to LZC. The amino acids of Chinju99 sM gene consisted of mostly hydrophobic residues, and there were one potential N-myristylation site and one potential threonine (T)-linked phosphorylation site recognized. Also, there was a transmembrane region with 46 amino acids, and Chinju99 was more close to CV777 and Br1/87 than to LZC in phylogenetic analysis on the sM amino acid sequences.
LHON은 사립체 DNA의 점돌연변이에 의해서 유발되며 11778, 3460, 14484의 세 부위가 주된 사립체 DNA 점돌연변이의 위치로 알려져 있다. 이에 저자들은 점진적인 시력 저하를 호소하면서 사립체 DNA 분석 결과 11778 점돌연변이가 확인된 LHON환자 1례를 경험하였기에 문헌고찰과 함께 보고하는 바이다.
표면강화 라만분광학을 이용하여 단일전자 산화반응으로 형성된 발암성 벤조피렌 유도체가 nucleobase와 반응하여 생성된 첨가 생성물을 분석하였다. 표면강화 라만분광학을 이용하여 아데닌 또는 구아닌과 같이 각기 다른 종류의 nucleobase와 결합하여 형성된 첨가생성물을 구분하여 분석할 수 있었고 또한 nucleobase 분자의 다른 부분에 결합하여 형성된 이성길체를 라만분광스펙트럼을 통하여 구분하여 분석이 가능하였다. N7Ade-BP에 대한 검정곡선의 선형도 범위는 20 picogram/${\mu}l$에서 800 nanogram/${\mu}l$였고, 본 실험 조건하에서의 검출한계는 $20{\mu}l$의 샘플을 이용하고 20 picogram/${\mu}l$였다.
Insulin-like growth factors (IGFs), along with IGF-binding protein and IGF receptor, are well-known regulators in the growth and survival of vertebrates. In this study, we investigated the involvement of IGFs and protein variation during embryonic development of the olive flounder (Paralichthys olivaceus). Morphological stages were divided into six main developments as blastula, gastrula, cephalization, cranial regionalization, tail lift, and hatch. During embryonic development, protein variation was investigated using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and electrospray ionization quadrupole time-of-flight mass spectrometry/mass spectrometry. In addition, the mechanism of signaling of IGF-I receptor was examined using immuno-blot analysis. We found marked changes in protein expression at four stages of embryonic development and identified proteins as belonging to the vitellogenin 2 family. As development progresses, expression of IGF-II, phosphotyrosine, and phospho-Akt increased, while expression of growth factor receptor-bound protein 2 (GRB2) and one of guanine-nucleotide-binding proteins (Ras) decreased. These results provide basic information on the IGF system in the embryonic development of the olive flounder.
An oral adhesive tablet of acyclorir [9-(2-hydroxyethoxymethyl) guanine] for herpetic stomatitis was prepared and its physical properties were evaluated. 300 mg weighed tablets containing 30 mg of acyclovir were prepared with six kinds of polymers from direct compression, and the stickiness, fracture resistance and dissolution in pH 6.8 buffer solution were tested. HPMC and MC showed good stickiness and fracture resistance, and their dissolution rates were significantly different from each other. Three factors-HPMC:MC ratio, acyclovir content, compression force-were chosen as an important factor of manufacture and factorial analyses for these three factors were carried out. Eight kinds of formulations from different combination of three factors were prepared and tested in stickiness, fracture resistance and dissolution in pH 6.8 buffer solution. Dissolution rate was significantly affected by polymer ratio, fracture resistance was affected by compression force, and stickiness was not significantly affected by acyclovir content and polymer ratio.
7- Bromomethylbenz[a]anthracene is a known mutagen and carcinogen. The two major DNA adducts produced by this carcinogen, i.e., $N^2$-(benz[a]anthracen-7-yl methyl)-2'-deoxyguanosine (2, b[a]$a^2$G) and $N^6$-(benz[a]anthracen-7-ylmethyl)-2'-deoxyadenosine (4, b[a]$a^6$/A), as wel 1 as the simpler benzylated analogs,$N^2$-benzyl-2'deoxyguanosine (1, $bn^2$G) and $N^6$-benzyl-2'-deoxyadenosine (3, $bn^6$/A), were prepared by direct aralkylation of 2'-deoxyguanosine and 2'-deoxyadenosine. To determine the site-specific mutagenicity of these bulky exocyclic amino-substituted adducts, the suitably protected nucleosides were incorporated into 16-base oligodeoxyribonucleotides in place of a normal guanine or adenine residues which respectively are part of the ATG initiation codon for the lac Z' \alpha-complementation gene by using an in situ activation approach and automated phosphite triester synthetic methods. The base composition and the incorporation of the bulky adducts into synthetic oligonucleotides were characterized after purification of the modified oligonucleotides by enzymatic digestion and HPLC analysis.
Lesch-Nyhan 증후근(LNS)은 hypoxanthine guanine phosphoribosyle transferase(HGPRT) 효소를 암호화 하는 X 염색체가 불완전해서 일어나는 유전적인 추제외로계(또는 기저핵)의 드문 병변이다. 출생시 LNS 유아는 정상적인 운동발달이 관찰되어진다. LNS에게서 현저하게 진단적인 특징으로 보여지는 운동심리적 행동인 self-mutilating 행위는 4살 이후에나 나타난다. LNS 아이들은 오히려 초기에 Rett's 증후근, 뇌성마비, 자폐, 다운증후근과 유사한 운동행위를 보인다. 그래서 LNS 아이들은 앞에 기술한 신경학적 장애로 오진을 받을 수가 있다. 오진으로 인해 초기에 적절한 치료를 받지 못한다면 LNS는 결과적으로 합병증(신장부전)과 self-mutilating 행위로 인하여 치명적일 수가 있다. 그러므로, 이 연구의 목적은 LNS 평가 동안 더 나은 진단을 하도록 하기 위하여 LNS와 관련된 기능부전에 대한 지식을 임상가들에게 제공하고자 함이었다. 연구 대상자는 10살인 2명의 쌍둥이 남아이었으며 실험은 뻗기 과제 수행(reaching task)시 움직임 특성을 보기 위하여 운동형상학적과 비디오 분석을 사용하였다. 기술통계로 분석 결과 움직임 시간과 단위가 증가됨을 보였고 사지의 분절적 움직임이 협응되지 않음을 보였다. ballistic과 jerky 움직임 양상은 dysmetric과 비긴장성 운동 행위에서 우세하였다. LNS은 추체로계 운동 장애 (과근긴장도나 저긴장도) 와 추체외로계의 운동 장애(dystonia와 choreoathetosis)의 혼합된 형태를 보였다. 결론으로 이 연구는 운동발달 장애를 가진 아이들을 치료하고자 할 때 임상가들한테 LNS 아이들의 움직임 장애의 다른 진단적 특징을 알아야 한다는 것을 제시하고자 한다.
The interaction of the rod GTP binding protein, Transducin ($G_t$), with bleached Rhodopsin ($R^*$) was investigated by measuring radiolabeled guanine nucleotide binding to and release from soluble and/or membrane-bound Gt by reconstituting $G_t$ containing bound GDP ($G_t$-GDP) or the hydrolysis-resistant GTP analog guanylyl imidodiphosphate ($G_t$-p[NH]ppG) with $R^*$ under physiological conditions. Release of GDP and p[NH]ppG from $G_t$ occurred to the same extent and with the same light sensitivity both in the presence and absence of added GTP. Significant amounts of $G_t$ without bound nucleotide ($G_{t^-}$) were generated. When ROS containing bleached rhodopsin ($R^*$) were centrifuged in low ionic strength buffer, $G_{t^-}$ remained associated with the membrane fraction, whereas $G_t$-GDP remained in the soluble fraction. These results suggest that $G_t$-GDP and $G_t$-p[NH]ppG have similar affinities for $R^*$. The results also suggest that $G_{t^-}$, rather than $G_t$-GDP, is the moiety which exhibits tight, "light-induced" binding to rhodopsin.
An obligate methanol-oxidizing bacterium, Methylobacillus sp. strain SK1, which grows only on methanol was isolated from soil. The isolate was nonmotile Gram-negtive rod. It does not have internal membrane system. The colonies were small, whitish-yellow, and smooth. The guanine plus cytosine content of the DNA was 48 mol%. Cellular fatty acids consisted predominantly of large amounts of straight-chain saturated $C_{16:0}$ acid and unsaturated $C_{16:1}$ acid. The major ubiquinone was Q-8, and Q-10 was present as minor component. The cell was obligately aerobic and exhibited catalase, but no oxidase, activity. Poly-.betha.-hydroxybutyrate, endospores, or cysts were not observed. the isolate could grow only on methanol in mineral medium. Growth factors were not required. The isolate was unable to use methane, formaldehyde, formate, methylamine, and several other organic compounds tested as a sole source of carbon and energy. Growth was optimal at 35.deg.C and pH 7.5. It could not grow at 42.deg.C. The doubling time was 1.2h at 30.deg.C when grown with 1.0%(v/v) methanol. The growth was not affected by antibiotics inhibiting cell wall synthesis and carbon monoxide but was completely suppressed by those inhibiting protein synthesis. Methanol was found to be assimilated through the ribulose monophosphate pathway. Cytochromes of b-, c-, and o- types were found. Cell-free extracts contained a phenazine methosulfate-linked methanol dehydrogenase activity, which required ammonium ions as an activator. Cells harvested after the late exponential phase seemed to contain blue protein.ein.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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