Bovine cumulus-oocyte complexes were recovered from ovaries at a slaughter and then divided into five groups: control group(unvitrified oocytes), 0 hr. group(composed of oocytes vitrified before the onset of maturation) and 10, 14, and 20 hrs groups(vitrified respectively at 10, 14 and 20 hrs after the onset of maturation). The oocytes remained vitrified for 24 hrs, and then were thawed in 30℃ water bath. Survival and cleavage rates were defined as development rate on in vitro culture and stained with aceto-orcein or FDA test.
The present study was undertaken to clarify the role of calcium ion as a factor for the maturation of follicle-enclosed mouse oocytes. Follicles were isolated with two sharp needles under a stereomicroscope from mouse(ICR) ovaries which were treated PMSG 5 IU 45 hours previously. Isolated follicles were cultured for 14-16 hours in an organ culture system at $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ in air and in a 100% humidified incubator by treatment of hCG, EDTA and $^{45}Ca^{++}$. Culture medium was Modified Hank's Balanced Salt Sol. (MHBS) and addition of hCG (human chorionic gonadotropin) was made into two doses level 0.4 IU and 0.8IU from the stock sol. and also $^{45}Ca^{++}$ was treated in the culture medium. To explain the role of calcium, calcium chelating agent EDTA was treated to the culture of the mouse follicle-enclosed oocytes. Two observations were made in the present study; nucleus phase and $^{45}Ca^{++}$ uptake into the oocyte. HCG induced oocyte maturation in the follicle about two folds as much as the control group, whereas there is no difference in oocyte maturation between 0.4 IU and 0.8 IU of hCG. Optimum level of hCG seems to be 0.4 IU/ml in the mouse follicle culture. HCG stimulated $^{45}Ca^{++}$ uptake into the oocyte of the follicles by two folds. $^{45}Ca^{++}$ uptake in the control group is about 2.5 folds in comparison of the EDTA(1.71mM) treated group. However, calcium uptake in the EDTA treated groups tends to increase depending on the decrease of EDTA concentration. These observations suggest that firstly, hCG stimulates maturation of the oocyte of the follicle, secondly, $Ca^{++}$ influx is induced by hCG and thirdly, $Ca^{++}$ influx by the treatment of EDTA decreases as a dosage-dependent process. This $Ca^{++}$ uptake may take place by the changes of permeability which was induced by hCG treatment. That is, $Ca^{++}$ influx may trigger the resumption of oocyte maturation. It is further necessary in the future study how this $Ca^{++}$ uptake is induced by hCG and increases permeability of the follicle and oocyte.
This study investigated the effects of recombinant eel gonadotropin hormone (rJeGTH) produced in silkworms, with and without a carboxyl-terminal peptide from equine chorionic gonadotropin (eCG), on the induction of sexual maturation in female eels Anguilla japonica. Experiments were conducted both in vivo and in vitro. In in vitro trials, germinal vesicle breakdown (GVBD) induction did not significantly differ between rJeFSH and $rJeFSH{\cdot}eCG$ treatments and the control group. However, previous studies did find that rJeLH and $rJeLH{\cdot}eCG$ treatments induced GVBD in female eels. Our in vitro exploration of $estradiol-17{\beta}$ ($E_2$) levels in immature ovarian tissues revealed significantly higher $E_2$ levels in the group treated with $rJeFSH{\cdot}eCG$$1{\mu}g/mL$ than in the control group. In contrast, the in vivo experiments showed no effect of recombinant hormones on the sexual maturation of feminized eels. Previous studies and our own in vitro results have clearly shown that rJeGTH and $rJeGTH{\cdot}eCG$ have a positive effect on the sexual maturation of feminized eels. To develop the activity of rJeGTH in vivo, further studies should confirm circulation time and activity of these hormones in eels' bloodstream, modify the structure of the recombinant gene, and implement additional glycosylation.
본 연구는 비만아동의 골격성숙도가 정상 아동들 보다 높고 성조숙증으로 이어질 확률이 높은 것을 문제점으로 삼아 비만아동의 골격성숙도에 따른 체격 및 체력의 관계를 규명함으로써 비만아동의 건강증진에 기여하는 것을 목적으로 하였다. 연구대상은 10세부터 13세의 비만아동 총 243명을 대상으로 생물학적 성숙지표를 나타내는 골격성숙도는 X-ray 촬영 후 TW3 방법을 이용하여 평가하였고, 골격성숙도에 따른 미숙집단(n=70), 보통집단(n=128), 조숙집단(n=45)으로 나누었다. 체격은 신장계, InBody 270(Biospace, Korea)을 이용하여 3개 항목을 측정하였다. 체력측정은 총 7개 항목으로 근력, 근지구력, 유연성, 순발력, 심폐지구력, 평형성, 민첩성을 측정하였다. 자료처리는 SPSS 25.0을 사용하여 기술통계, 일원변량분석(ANOVA)을 실시하였고, 사후검정은 Duncan's multiple range 방법을 이용하였으며, P< .05 수준에서 유의한 것으로 간주하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 골격성숙도에 따른 신장과 체중의 체격 요인에서 남자와 여자 미숙집단, 보통집단, 조숙집단 간 통계적으로 매우 유의한 차이를 보였다. 둘째, 골격성숙도에 따른 체력 비교에서 남자의 경우 근력, 순발력, 민첩성에서 유의한 차이가 나타났으며, 여자의 경우 근력, 평형성에서 유의한 차이가 나타났다.
Park, Sung Bae;Yang, Hee-Jin;Kim, Chi Heon;Chung, Chun Kee
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제60권3호
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pp.348-354
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2017
Objective : To identify and investigate differences in spinal fusion between the normal and osteopenic spine in a rat model. Methods : Female Sprague Dawley rats underwent either an ovariectomy (OVX) or sham operation and were randomized into two groups: non-OVX group and OVX group. Eight weeks after OVX, unilateral lumbar spinal fusion was performed using autologous iliac bone. Bone density (BD) was measured 2 days and 8 weeks after fusion surgery. Microcomputed tomography was used to evaluate the process of bone fusion every two weeks for 8 weeks after fusion surgery. The fusion rate, fusion process, and bone volume parameters of fusion bed were compared between the two groups. Results : BD was significantly higher in the non-OVX group than in the OVX group 2 days and 8 weeks after fusion surgery. The fusion rate in the non-OVX group was higher than that in the OVX group 8 weeks after surgery (p=0.044). The bony connection of bone fragments with transverse processes and bone formation between transverse processes in non-OVX group were significantly superior to those of OVX group from 6 weeks after fusion surgery. The compactness and bone maturation of fusion bed in non-OVX were prominent compared with the non-OVX group. Conclusion : The fusion rate in OVX group was inferior to non-OVX group at late stage after fusion surgery. Bone maturation of fusion bed in the OVX group was inferior compared with the non-OVX group. Fusion enhancement strategies at early stage may be needed to patients with osteoporosis who need spine fusion surgery.
본 연구는 소의 미성숙 난포란의 체외성숙시 ${\beta}-mercaptoethanol({\beta}-ME)$의 첨가가 체외성숙, 체외수정 후 웅성전핵의 형성 및 세포질 내의 GSH 수준에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 체외성숙시 $25\;{\mu}M$과 $50\;{\mu}M$의 ${\beta}-ME$를 첨가한 경우 대조구에 비하여 성숙율이 증가하는 것으로 나타났으며(p<0.05), 모든 실험구에 있어서 12시간 체외성숙보다 24시간 체외성숙에서 높은 성숙율을 나타냈다(p<0.05). 체외수정 후 웅성전핵 형성에 있어서는 $25\;{\mu}M$와 $50\;{\mu}M$ 농도의 ${\beta}-ME$ 첨가구에서 대조구에 비하여 높게 나타났으나(p<0.05), $25\;{\mu}M$과 $50\;{\mu}M$ 농도구와의 유의적인 차이는 없었다. GSH의 수준은 체외성숙 후 $50\;{\mu}M$의 ${\beta}-ME$ 첨가구가 다른 처리구에 비교하여 높게 나타났으며(p<0.05), 체외수정 후 웅성전핵이 형성된 다음 세포질 내 GSH 수준 역시 $50\;{\mu}M$의 ${\beta}-ME$ 첨가구에서 가장 높은 결과를 나타냈다(p<0.05).
인위적인 가온만으로도 새꼬막의 성숙 및 정상적인 난 발생이 이루어지는지 알아보기 위해 생존율, 성비, 비만도, 생식소 발달빈도, 생식소지수, 수정률, 부화율 및 D형 유생까지의 발생소요시간을 조사하였다. 생존율은 대조구에 비해 가온구에서 낮았으며, 성비는 암컷의 비율이 높았다. 비만도는 대조구와 가온구가 유의한 차이를 보이는 가운데 수온 $17^{\circ}C$ 이상부터 증가폭이 높게 나타났다. 생식소발달빈도는 암 수 모두 대조구의 경우 발달이 느렸으며, 가온구는 수온 $20^{\circ}C$인 사육 21일부터 28일 사이에 성숙기에 도달한 개체들이 80%이상 관찰되었다. 생식소지수는 대조구에 비해 수온이 높을수록 증가하는 경향을 보였다. 새꼬막의 수정률은 $82.17{\pm}3.55%$ 였으며, 부화율은 $63.57{\pm}2.36%$로 나타났다. D형 유생의 발생소요시간은 약 15시간으로 나타났다.
The present study demonstrates the changes in body weight (BW) and plasma sex steroid hormone profiles during artificial maturation induced by human chorionic gonadotropin (HCG) or salmon pituitary extract (SPE) injections in cultured eel, Anguilla japonica, kept in seawater for 3 months. In the weekly SPE-injected female group, BW was relatively stable during vitellogenesis. Following induction of vitellogenesis, females exhibited a rapid increase of BW, and the oocytes were observed to be in the migratory nucleus stage at the end of the experiment. Plasma testosterone (T) and $estradiol-17{\beta}$ ($E_2$) levels increased slightly during vitellogenesis and peaked at an average of 5.82 ng/mL and 4.76 ng/mL, respectively, at the end of the experiment. In the weekly control and HCG-injected female groups, BW slowly decreased during the experimental period, and the oocytes of the two groups were observed to be at the primary yolk globule stage. In the weekly HCG-injected female group, plasma T and $E_2$ levels increased slightly during vitellogenesis and decreased afterward. In the control female group, however, plasma T and $E_2$ levels were not altered during the experimental period. Furthermore, plasma $17{\alpha},20{\beta}-dihydroxy-4-pregnen-3-one$ (DHP) was not detected in all experimental groups. Fertility and hatching rates of SPE-injected females were significantly higher in those that ovulated 15 h after DHP injection than 18 h. These results indicate that long rearing in seawater increases responsiveness to SPE in ovarian maturation of the Japanese eel, resulting in shortened period from completion of vitellogenesis by sex steroid hormone production.
주둥치의 암 수 성비는 1.81 : 1로 암컷의 비율이 높게 나타났다. 난모세포 발달양식은 난군동기발달형에 속하며, 정소 조직상은 정원세포 국재형에 속한다. 암 수 모두 첫 번째 군 성숙에 도달하는 크기는 전장 7.5 cm로 조사되었다. 암컷의 생식소중량지수(GSI)는 7월에 12.83으로 가장 높았고, 9월에는 1.08로 가장 낮았다. 수컷의 GSI는 6월에 19.0으로 가장 높았고, 10월에 0.24로 가장 낮았다. 암컷의 간중량지수(HSI)는 GSI와 같은 경향의 변화를 보였다. 가슴반점지수(TSI)는 생식소의 성숙 및 완숙시기인 5월부터 7월 사이에는 낮은 값을 보였다. 암컷의 생식주기는 성장기 (3~5월), 성숙기(5~6월), 완숙 및 산란기 (6~8월), 회복기 (8~11월) 그리고 휴지기 (11~3월)로 구분할 수 있었다. 수컷의 생식주기는 분열증식 및 성장기 (1~4월), 성숙기 (4~5월), 완숙 및 방정기(6~8월), 회복기 (8~10월) 그리고 휴지기(10~12월)로 구분할 수 있었다.
본 연구는 개 난소의 수송온도가 난자의 생존률에 미치는 영향과 체외성숙 배양시 성숙률에 미치는 영향에 대하여 검토하였다. 1. 개 난소를 4$^{\circ}C$와 38$^{\circ}C$에 저장 후 5시간 내로 연구실로 운반한 난소에서 채취한 난자를 체외배양 하여 생존율을 조사한 결과 체외배양 24시간째 13.2%(15/114), 77.8%(105/135)의 생존율을 보였으며, 48시간째는 0% (0/129), 72.9% (129/177) 의 생존율을 나타내어 38$^{\circ}C$에 수송한 난소에서 채취한 난자가 4$^{\circ}C$에 수송한 난소에서 채취한 난자보다 유의적으로 높은 생존율을 보였다. 2. 체외성숙 배양 24, 48, 96 시간 체외배양하여 핵 성숙율을 확인한 결과 MI∼MII까지의 성숙율이 8.3% (6/72), 8.9% (9/101), 9.5% (8/84)로 체외배양 시간을 96시간까지 연장하여도 성숙률이 증가하지 않았다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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